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人类鼻咽癌细胞株CNE2的转化基因Tx的一个Eco RI片段的核苷酸序列分析 被引量:5
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作者 胡维新 曹亚 +1 位作者 黎民敬 姚开泰 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第3期331-336,共6页
本文运用定点克隆法并结合鸟枪法,对人类鼻咽癌细胞抹CNE2转化基因Tx中一个与转化作用有关的Eco RI片段,进行了核苷酸序列分析。此种克隆方法的运用,大大减少了DNA模板的数量,并加快了测序的进展。将序列分析结果输入美国NCI的CRAY-2型... 本文运用定点克隆法并结合鸟枪法,对人类鼻咽癌细胞抹CNE2转化基因Tx中一个与转化作用有关的Eco RI片段,进行了核苷酸序列分析。此种克隆方法的运用,大大减少了DNA模板的数量,并加快了测序的进展。将序列分析结果输入美国NCI的CRAY-2型超级电子计算机作进一步分析,以寻找基因库中的同源序列,酶切位点,开放阅读框架(ORF)。在人类DNA基因数据库中没有找到同源序列,从而证实Tx基因是一种新的人类转化基因。计算机的分析还得出了一系列有价值的结论,为进一步深入探讨这个基因在人类鼻咽癌发病学中的作用,提供了重要的资料。这是首次报道的Tx基因核苷酸序列分析结果。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 转化基因 核甘酸 分析
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EB病毒潜伏膜蛋白1介导c-Jun/Jun B异源二聚体对cyclin D1的调节 被引量:2
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作者 宋鑫 陶永光 +6 位作者 曾亮 杨静 唐发清 黎民敬 龚建平 吴乔 曹亚 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2004年第6期555-563,共9页
研究发现LMP1可介导c-Jun/JunB活性异源二聚体的形成,在此基础上,利用建立的Tet-on系统调控LMP1表达的细胞系,采用间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显徽镜技术、Westernblot方法、荧光素酶活性检测、Super-EMSA方法和流式细胞术,探讨L... 研究发现LMP1可介导c-Jun/JunB活性异源二聚体的形成,在此基础上,利用建立的Tet-on系统调控LMP1表达的细胞系,采用间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显徽镜技术、Westernblot方法、荧光素酶活性检测、Super-EMSA方法和流式细胞术,探讨LMP1介导c-Jun/JunB异源二聚体对cyclinD1的调节功能.结果表明,LMP1介导的c-Jun/JunB异源二聚体可上调cyclinD1启动子活性及其表达,并影响细胞周期的行进. 展开更多
关键词 C-JUN LMP1 介导 潜伏膜蛋白1 表达 EB病毒 间接免疫荧光法 荧光显微镜技术 启动子活性 利用
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EB病毒潜伏膜蛋白1介导c-Jun/JunB活性异源二聚体形成 被引量:2
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作者 宋鑫 陶永光 +4 位作者 谭运年 黎民敬 邓锡云 吴乔 曹亚 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2004年第4期325-334,共10页
EB病毒编码的潜伏膜蛋白1可以活化AP-1转录因子, 其中c-Jun和JunB的相互关系和复杂作用一直是人们关注的焦点. 以Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系为动态研究模型, 主要应用c-Jun/Jun B双染色间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显微镜技术、... EB病毒编码的潜伏膜蛋白1可以活化AP-1转录因子, 其中c-Jun和JunB的相互关系和复杂作用一直是人们关注的焦点. 以Tet-on-LMP1 HNE2鼻咽癌细胞系为动态研究模型, 主要应用c-Jun/Jun B双染色间接免疫荧光法联合激光共聚焦荧光显微镜技术、Western blot方法、免疫共沉淀-Western blot方法以及Super-EMSA方法, 同时, 结合信号转导通路研究中的阻断策略, 研究证实EB病毒编码的潜伏膜蛋白1介导c-Jun/Jun B异源二聚体形成, 而且该二聚体具有与DNA结合活性. 该研究为LMP1调控下, AP1二聚体家族成员在不同时空信号传导通路中的动态组合和作用模式提供了新的机制. 展开更多
关键词 LMP1 JUNB C-JUN 异源二聚体 DNA结合活性 EB病毒潜伏膜蛋白 免疫共沉淀 肿瘤
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Point mutation of 2.8 kb EcoRI fragment of the NPC transforming gene in NPC cell lines
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作者 邓锡云 曹亚 +2 位作者 曹莉 黎民敬 姚开泰 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1998年第3期55-55,共1页
AbstractObjective To determine whether the previously isolated transforming sequence, designated the Tx gene, which was derived from a Chinese human nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE 2, is mutated in NPC ... AbstractObjective To determine whether the previously isolated transforming sequence, designated the Tx gene, which was derived from a Chinese human nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE 2, is mutated in NPC cell lines and biopsy tissues. Methods DNA samples prepared from various cell lines and 11 cases of NPC biopsies were subjected to analysis with the modified polymerase chain reaction single strand conformation polymorphism (PCR SSCP) Laboratory of Tumor Molecular Biology, Cancer Research Institute, Hunan Medical University, Changsha 410078, Hunan Province (Deng XY, Cao Y, Cao L and Yao KT) FCRDC National Cancer Institute, P.O. Box B, Bldg 433, Frederick, Maryland, MD 21702, USA (Lee LM) silver staining technique to screen for possible point mutation(s). Results Mobility shifted bands were revealed in two NPC cell lines, CNE 2 and HONE 1, but not in non NPC cell lines, including stomach cancer cell line HGC 1, colon cancer cell line SW 480 and cervical cancer cell line HeLa. No sequence changes or polymorphisms were found in 11 cases of primary NPC biopsies. Conclusions In most cases of NPC, activation of this transformation associated sequence does not involve a mechanism of gene mutation. The role played by this gene in NPC is to be further determined. 展开更多
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