大鼠中枢P物质含量与针刺镇痛的关系

已知 P 物质(SP)在痛觉调制中,具有双重作用:鞘内注射 SP 拮抗剂可对抗 SP 引起的痛阈下降,将 SP 注入脑室、中脑导水管周围灰质,可出现镇痛作用。其镇痛效应可能是通过释放脑啡肽而实现的。以往的研究多应用脑室(或中脑导水管周围灰质),腹腔、肌肉以及鞘内注射或微电泳导入 SP 或 SP 抗体等方法,观察痛阈及神经元电位的变化。但在电针时,动物不同脑区和脊髓 SP 含量的变化有何不同,已有报道。为了进一步探讨中枢 P 物质与针刺镇痛的关系,本工作从三个方面进行观察:一是电针时大鼠海马、下丘脑、纹状体和脊髓内SP 免疫活动物质(Ir-SP)含量的变化;二是电针强度和频率对 Ir-SP 含量的影响;同时还观察了阿片受体和5-羟色胺(5-HT)受体在电针引起不同脑区 Ir-SP 含量变化中的作用。

大鼠脑内GABA含量与细胞免疫在ACTH镇痛中的相互影响

促肾上腺皮质激素(ACTH)可提高海马内 r-氨基丁酸(GABA)含量和痛阈,降低淋巴细胞转化指数和白细胞介素Ⅱ(IL-Ⅱ)的产生。GABA 合成酶抑制剂异烟肼(INH)和 GABA 受体阻断剂印防(?)毒素(PTX)可对抗 ACTH 升高痛阈和降低淋巴细胞转化指数和 IL-Ⅱ产生的作用;而免疫抑制剂环孢素 A(CyA)则可削弱 ACTH 镇痛及其提高海马内 GABA 含量的效应。结果提示 ACTH可通过海马 GABA 增多而镇痛,ACTH 对细胞免疫的抑制作用可能与脑内 GABA 有关,细胞免疫可能参与 GABA 含量的调节,GABA 合成及其受体在下述作用中起着重要的介导作用。

安定加强小鼠的促肾上腺皮质激素镇痛作用

将安定、印防己毒素和异烟肼注入小鼠腹腔内,采用痛阈测定和荧光分光光度法测定脑区5-HT含量的方法观察安定在ACTH镇痛中的作用。安定能显著加强ACTH镇痛作用,而印防己毒素或异烟肼可显著削弱ACTH的作用及安定对ACTH镇痛作用的影响。安定加强ACTH镇痛作用也可被纳洛酮或阿托品所取消。安定使海马、下丘脑和中-桥脑5-HT含量增加,而安定+ACTH可使三脑区5-HT含量进一步增加,印防己毒素或异烟肼则可对抗安定+ACTH使三脑区5-HT含量升高的作用。结果提示,安定加强ACTH镇痛作用,可能与加强脑内GABA系统的功能及激活脑内5-HT系统有关。阿片受体和胆硷能M-受体在此作用中起着重要作用。

构建学科群课程体系的思考与初步实践

教学内容和课程体系改革是整个教学改革的突 及整体完整性。破口。现代教育思想推动着教学内容和课程体系的50年代以来,我国高等医学教育基本照搬苏联改革.而教学内容和课程体系改革又进一步促进着 模式,在教学内容和课程体系方面.虽有严谨、完整、教育思想、教育观念的转变和教学方法、教学手段、系统等持点,但也存在许多问题,如围绕过细过窄的教学管理的改革。我们抓住教学内容和课程体系改 专业进行课程设置,学生知识很窄,缺乏专业之间的革这一关键环节,对基础医学课程体系进行了改革 有叽联系;不同课程之间,由于强凋完整性.而彼此实践。重复;重理论,轻实践,忽视临床实际工作能力培养 一、问题的提出 等.都不利于学生知识和视野的开拓,不利于学生能 教学内容的选定和课程体系的构建,决定着人 力培养和人才综合素质的提高。才培养的基本模式,所以世界各国都把课程设置作 二、对策的选择为教学改革的重要环节。发达国家医学基础类课程 从我国国情出发,借鉴世界先进国家高等医学改革归纳起来,主要推行的是:“以问题为中心”的教 教育的有益经验,以培养素质型学生为目标.以21学法或“问题定向”教学法,建立多学科综合教学课 世纪人才必须具备的知识结构为基本依据、构思课程。

促肾上腺皮质激素的痛调制作用研究

促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）的痛调制作用与中枢内源性阿片或非阿片镇痛系统有关，包括中枢ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达与细胞免疫的影响．

安定加强小鼠的肾上腺皮质激素镇痛作用

本实验腹腔注射安定等多种影响γ-氨基丁酸(GABA)受体和代谢的药物，采用痛阈测定和荧光分光光度法测定小鼠脑区5-HT含量的方法，观察安定在小鼠ACTH镇痛中的作用及其作用机理。

电针抑制P物质引起的痛反应和脊髓c-fos表达

目的：观察电针“夹脊”穴对大鼠鞘内注射Ｐ物质（ＳＰ，１０μｇ）引起的痛反应和脊髓ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达的影响。方法：采用免疫组织化学法和痛阈测定法。结果：大鼠鞘内注射ＳＰ可引起痛反应，并诱发脊髓ｃ－ｆｏｓ样免疫反应（ＦＬＩ）减少，此效应可部分被纳洛酮（Ｎｘ）翻转。结论：电针可能是通过内源性阿片肽抑制ＳＰ而产生镇痛作用。

重楼皂甙对急性吗啡耐受大鼠痛反应及海马ACTH和β-EP含量的影响

目的 探讨大鼠急性吗啡镇痛耐受时 ,痛行为和海马ACTH和 β 内啡肽 (β EP)含量变化及重楼皂甙对其影响。方法 本实验采用大鼠急性吗啡镇痛耐受模型 ,运用热测痛法观察重楼皂甙对其痛阈的作用 ,并用放射免疫法测定海马ACTH和 β EP含量变化。 结果 在急性单次皮下注射盐酸吗啡 (6mg/kg)后 ,海马ACTH和 β EP含量升高 ,而当连续 5次皮下注射盐酸吗啡 (6mg/kg ,间隔 2h)后 ,海马ACTH和 β EP含量回降。重楼皂甙对这一回降过程有抑制作用 ,并增强吗啡对急性吗啡耐受大鼠痛阈的提高作用。结论 重楼皂甙在吗啡急性耐受形成后可能有增强吗啡镇痛的作用 ,并可能通过影响脑内ACTH和 β

严重烫伤大鼠海马NMDA受体活性变化的机制研究

目的 研究严重创伤对海马NMDA受体 (NR)活性的影响及其相关机制 ,为设法调节NR的活性从而控制创伤后HPA轴的过度兴奋提供实验依据。方法 以大鼠背部 3 0 %TBSAⅢ度烫伤作为严重创伤过度应激模型 ,利用放射配基结合法检测烫伤后海马NR活性 (最大结合容量及亲和力 )的变化 ;Western blot +免疫共沉淀方法检测烫伤海马NR1、NR2A、NR2B酪氨酸磷酸化的改变 ;高效液相色谱方法检测烫伤海马谷氨酸含量的变化。结果 严重烫伤后 0 5、1、2、4、8、2 4、48h海马NR的亲和力显著增加 ,尤以烫伤后 2h最为明显 ,最大结合量从 1h起亦显著增加 ;各时相点海马酪氨酸磷酸化NR1、磷酸化NR2A及磷酸化NR2B蛋白水平皆显著增高 ;烫伤后 0 5、1、2、4h ,海马内谷氨酸释放量增加非常明显 ,伤后 2 4h及 48h无明显变化。结论 严重烫伤导致海马NR持续过度激活 ;NR酪氨酸磷酸化水平的增加是其过度激活的重要原因 ,谷氨酸释放量的变化可能不是其持续激活的主要因素。

APP695和绿色荧光蛋白在PC12细胞中的共表达及对细胞的影响

目的 构建绿色荧光蛋白和瑞典突变型APP695共表达载体 ,将重组质粒转染PC12细胞获得高表达APP的PC12细胞克隆。观察基因转染后PC12细胞的细胞周期、超微结构和 β淀粉样蛋白的分泌情况。 方法 激光共聚焦显微镜挑选高表达绿色荧光蛋白的PC12细胞克隆。放射免疫方法测定 β淀粉样蛋白 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,电镜观察细胞超微结构。结果 瑞典突变型APP转染能使PC12细胞体积增大 ,形态变长 ,微绒毛增多 ,分泌Aβ增多 ,细胞周期中G0和G1 期细胞比例增多。结论 绿色荧光蛋白和瑞典突变型APP695共表达载体转染的PC12细胞可作为AD发病机制和治疗研究的细胞模型。

严重烧伤影响大鼠脑内c-fos表达和Som-LI与脑水肿的关系

目的 探讨严重烧伤后大鼠海马、下丘脑内c fos原癌基因的表达和生长抑素样免疫反应 (Som LI)的变化及其与脑水肿的关系。方法 采用 30 %TBSAⅢ度烧伤模型 ,用免疫组化技术检测烧伤后 0 5、1、3、6、1 2h的海马、下丘脑内c fos样免疫反应(FLI)、Som LI分布的变化 ,采用干湿比重测定烧伤后海马、下丘脑的水肿情况。结果 烧伤后海马、下丘脑内FLI、Som LI明显增加 ,FLI在 1h点达高峰 ,Som LI在 3h点达高峰 ,随后下降 ,但均高于正常组 (P <0 0 1 ) ,而烧伤后海马、下丘脑的水肿在 6h点达高峰 (P<0 0 1 )。结论 烧伤后大鼠海马、下丘脑内FLI、Som

谷氨酸及其N-甲基-D-天冬氨酸受体1在大鼠前额叶执行控制中的作用机制

目的:探讨谷氨酸及其N-甲基(酰)-D-门冬氨酸受体(NMDAR1)在大鼠前额叶执行控制功能中的作用机制。方法:1.0～1.5月龄的大鼠,进行执行控制训练,选出执行控制能力好组及执行控制能力差组大鼠各8只,用氨基酸分析技术、免疫组化技术和原位杂交技术研究执行控制能力不同的大鼠前额叶谷氨酸(Glu)含量、Glu免疫反应阳性神经元(Glu-IR)数量和N-甲基-D-天冬氨酸受体1mRNA(NMDAR1mRNA)表达。结果:与执行控制能力好组大鼠相比,执行控制能力差组大鼠NM-DAR1mRNA表达较高犤执行控制能力好组大鼠为(117±33)个/μm2,控制能力差组为(165±28)个/μm2,t=1.93,P<0.05犦;而两组间前额叶Glu含量犤(11.9±0.6)μmol/g比(12.4±0.9)μmol/g犦,Glu-IR阳性神经元数量犤(197±94)个/μm2比(212±87)个/μm2;t=1.21,P>0.05犦差异无显著性意义(t=1.21,P均>0.05)。结论:Glu及NMDAR1在前额叶执行控制中起重要作用,机制可能比较复杂,NMDAR1mRNA表达较高可能系代偿的结果。

NMDA受体对烫伤应激大鼠海马糖皮质激素受体基因表达的影响

目的 观察烫伤应激后海马糖皮质激素受体 (GR)基因表达的变化 ,探讨N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D as partate ,NMDA)受体在这种变化中的作用。方法 利用RT PCR技术 ,检测烫伤前腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1及激动剂NMDA对烫伤应激后 2hGRmRNA水平的影响。结果 烫伤应激后 2h海马GRmRNA水平明显降低 (P <0 0 1) ;应激前腹腔注射MK 80 1使烫伤后降低的GRmRNA水平明显恢复 (P <0 0 1) ,注射NMDA使其进一步降低 (P <0 0 5 ) ,注射生理盐水无明显变化。

褪黑素受体亚型Mel1a和Mel1b在大鼠中枢神经系统的分布差异——原位杂交研究

目的 研究Mel 1a、Mel 1b褪黑素膜受体在大鼠中枢神经系统的表达及分布差异。 方法 原位杂交组织化学。 结果 (1)Mel 1amRNA阳性细胞主要分布于海马、大脑皮层、视上核、室旁核、视交叉上核、橄榄核、小脑皮层、小脑顶核、脊髓前角、面神经核、巨细胞网状核、纹状皮质、三叉神经核等。 (2 )Mel 1bmRNA阳性细胞主要分布于小脑皮层和顶核、球状核、栓状核、海马、大脑皮层、脊髓前角、视上核和交叉上核。 结论 Mel 1amRNA在中枢分布广泛、含量丰富 ,而Mel 1bmRNA在中枢分布较局限。在海马和大脑皮层 。

电针和吗啡对慢性痛大鼠下丘脑、桥延脑内ACTH含量和痛反应的影响

目的 探讨电针和吗啡对慢性痛大鼠脑内ACTH含量和痛反应的影响。方法 实验采用佐剂性单关节炎大鼠慢性痛模型 ,应用放射免疫测定及痛行为评分法。结果 大鼠注射完全弗氏佐剂 (CFA)后2 4h ,与对照组比较 ,痛行为评分和下丘脑及桥 延脑内ACTH样免疫活性物质 (Ir ACTH)的含量明显增多。摘除双侧肾上腺或切除垂体以及脑室注射生长抑素或IL 2不影响慢性痛大鼠痛行为评分和两脑区Ir ACTH含量的升高 ;但是此升高效应可被电针“夹脊穴”或腹腔注射吗啡所抑制 ,这一抑制作用能为腹腔注射纳洛酮翻转。结论 佐剂性关节炎慢性痛大鼠的痛行为评分和下丘脑及桥 延脑内Ir ACTH含量均升高 ,该升高效应被电针与吗啡所抑制 ,此抑制作用可能与阿片受体有关。

褪黑素在叠氮钠所致的海马锥体细胞钙超载中的神经保护作用

目的 观察叠氮钠对急性分离的大鼠海马锥体神经元胞内游离钙的作用以及不同浓度的褪黑素 (Melatonin ,MT)的影响。方法 海马锥体细胞的急性分离、新型游离钙荧光探针Fluo 4AM负载海马锥体细胞 ,激光共聚焦动态检测胞内游离钙的变化及叠氮钠、褪黑素和荷包牡丹碱的作用。结果 在孵育液中加入叠氮钠 (0 8mg ml)能使急性分离的海马锥体细胞胞内游离钙在 2 0 0s内急剧升高并维持在高水平 ,处于钙超载状态。褪黑素能使NaN3所致的海马锥体细胞内处于超载状态的游离钙显著下降 ,并有量效关系。结论 叠氮钠导致海马神经细胞损伤的早期原因可能是钙超载 。

ACTH及电针对甲醛痛敏大鼠脊髓NOS阳性神经元增多的影响

本文采用ＮＡＤＰＨｄ组化染色技术，研究鞘内注射（ｉ．ｔ．）ＡＣＴＨ及电针剌激（ＥＡ）对甲醛痛敏大鼠脊髓背角浅层ＮＯＳ阳性神经元增多的影响。结果显示ＡＣＴＨ（０．５Ｕ，ｉ．ｔ．）及电针（１ｍＡ５０Ｈｚ，５ｍＡ５Ｈｚ，１ｍＡ５Ｈｚ）剌激“夹脊穴”３０ｍｉｎ均可显著抑制脊髓背角浅层ＮＯＳ阳性神经元增多；ｉ．ｔ．ＡＣＴＨ（０．５Ｕ）和电针剌激（１ｍＡ５Ｈｚ）同时给予时，抑制作用显著增加；ｉ．ｔ．ＮＯ前体左旋精氨酸（ＬＡｒｇ，１０ｎｍｏｌ）可部分逆转ＡＣＴＨ的抑制作用，ｉ．ｔ．阿片受体阻断剂纳络酮（ＮＬＸ，１０μｇ）可部分逆转电针的抑制作用。结果提示ＡＣＴＨ和电针可能通过不同机制抑制甲醛痛敏大鼠脊髓ＮＯＳ阳性神经元增多。

小鼠胚胎干细胞体外分化为神经前体细胞的研究

目的 探索小鼠胚胎干细胞 (Embryonicstemcell ,EScell)体外分化为神经前体细胞 (Neuralprecursorcells ,NPC)的无血清培养条件 ,比较人胚胎成纤维细胞 (Humanembryonicfibroblasts ,HEF)与小鼠胚胎成纤维细胞 (Mouseembryonicfibroblasts ,MEF)对小鼠ES细胞生长的作用。方法 在MEF或HEF饲养层上培养ES细胞 ,培养液中含白血病抑制因子。采用无血清方法培养NPC ,免疫组化方法检测巢蛋白 (Nestin) ,用硝基四氮唑蓝 /5 溴 4 氯 3 吲哚基磷酸 (NBT/BCIP)显色检测碱性磷酸酶。结果 无血清培养可以获得 86 %的NPC。HEF与MEF一样能维持ES未分化状态。结论 无血清培养方法有利于ES细胞向NPC分化 ,HEF可用于小鼠ES细胞的培养 ,而且比MEF优越。

小剂量梭曼对大鼠学习记忆和海马脑片LTP的影响

目的 研究长期给予小剂量梭曼 (Soman)对大鼠空间学习记忆和大鼠海马脑片LTP的影响。方法 采用连续 14d皮下注射小剂量梭曼 (6～ 10 μg·kg 1 ,s c ,sig× 14 )为慢性中毒模型 ,Morris水迷宫试验进行行为检测 ,电生理学方法研究大鼠海马脑片CA1区长时程增强现象 (long termpotentiation ,LTP)的变化。结果 Morris水迷宫试验中大鼠的逃避潜伏期延长 ,穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率下降 ;大鼠海马脑片LTP诱出率、PS幅值增加百分率均明显低于生理盐水对照组。结论 长期给予小剂量梭曼可降低大鼠的空间学习记忆能力 。

促肾上腺皮质激素对慢性痛大鼠痛行为和海马内BDNF、CRF水平的影响

目的与方法 :采用痛行为评分方法、免疫组化和原位杂交技术 ,观察促肾上腺皮质激素 (ACTH)对完全福氏佐剂所致的关节炎大鼠海马内脑源性神经营养因子 (BDNF)及其功能性受体trkB和促肾上腺皮质激素释放激素 (CRH)水平的影响。结果 :关节炎大鼠的痛行为评分显著高于正常对照组 ,同时注射侧对侧海马内BDNF免疫活性(IR)神经元、CRHmRNA阳性神经元和BDNF/CRHmRNA双染神经元数在注射佐剂后 2 4h显著高于正常对照组 ,而腹腔注射ACTH (2 5IU/kg或 12 5IU/kg)后 ,上述指标显著低于关节炎组 ;摘除双侧肾上腺后 ,腹腔注射ACTH的关节炎大鼠对侧海马内BDNF -IR、CRHmRNA阳性神经元和BDNF/CRHmRNA双染神经元数明显高于未摘除肾上腺的关节炎组。结论 :海马内的BDNF和CRH参与慢性痛的调制 ,ACTH能抑制海马内BDNF和CRH的升高而产生镇痛作用 。