深圳西部2005～2011年献血者血液复检结果分析

目的了解深圳西部地区近7年来无偿献血人群结构状况,为推动无偿献血健康发展提供科学依据。方法收集2005～2011年无偿献血资料,运用统计方法对年度、季节、年龄结构、性别等检测不合格情况进行比较分析。结果检测总不合格率为2.50%,2005～2011年不合格率分别为3.69%、2.97%、2.51%、2.71%、2.10%、2.02%、1.78%,不合格呈降低趋势;季节分布以2月份与8月份较高,占2.98%及2.89%;不合格率随年龄增长有增高趋势,其中36～40岁年龄段最高,占3.87%,之后出现回落;男女献血比例为2.40:1,男性不合格率高于女性,主要为男性ALT不合格率较高,为0.65%,女性为0.11%。结论需进一步加大无偿献血的宣传力度,重点关注适宜献血人群,从低危人群中招募献血者,保障血液安全。

血站血液检测标本保存信息管理的初步探讨

《血站管理办法》规定：血液标本的保存期为全血或成分血使用后2年。照这样计算,最短的保存时间是2年,最长的是12年（例如冰冻红细胞）,如此大量的血液标本,在需要复查时,怎样才能快速而准确地查找出来呢？血站检验科正面临这样一个重大难题,

“两个规范”与ISO9001:2008及ISO/IEC17025:2005质量管理体系的融合

将《血站质量管理规范》、《血站实验室质量管理规范》与ISO9001:2008、ISO/IEC17025:2005质量管理体系进行融合,在兼顾各条款要素的同时,以要求较高的要素为主,建立了一体化的血站质量管理体系。

HBV抗原基因修饰树突状细胞疫苗体外抗HBV的作用

目的：探讨腺病毒载体介导HBV抗原基因修饰的树突状细胞(DCs)诱导抗HBV特异性CTL反应方法：制备携带HBsAg、HBeAg和HBcAg基因的3种重组腺病毒Ad-HBs,Ad-HBe,Ad- HBc,分别转染自脐带血体外诱导培养的DCs,观察腺病毒转染DCs效率和DCs中HBV抗原的表达；混合淋巴细胞反应(MLR)测定HBV抗原基因修饰DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力；乳酸脱氢酶释放法检测特异性CTL细胞对HepG_222．1．5靶细胞的杀伤能力．结果：腺病毒载体能够高效介导HBV三个抗原基因在DCs中表达,90%以上DCs表达示踪基因EGFP,且DCs细胞形态完整：感染后72 h HBsAg和HBeAg含量分别为0．919和0．328(吸光度A值)．MLR实验显示,HBV抗原基因修饰DCs仍然具有刺激同种异体T细胞的增殖能力,Ad-HBs转染DCs组、Ad-HBe转染DCs组、Ad-HBc转染DCs组和未转染DCs组之间刺激T细胞的增殖水平无明显差异(F=1．194,P=0．389)；在E：T比例为2：1,10：1和25：1时,Ad-HBs转染DC组、Ad-HBe转染DCs组和Ad-HBc转染DCs组对HepG_222．1．5细胞的杀伤率均明显高于未转染DCs组(P＜0．001)；以Ad- HBc转染DC组对HepG_222．1．5细胞杀伤率最高．结论：HBV抗原基因修饰DCs疫苗具有刺激同种异体T细胞增殖能力,同时能增强抗HBV特异性CTL反应的能力,可能发展为一种新型抗病毒疫苗．

亚甲蓝光化学法灭活对血浆HBV前S2基因降解的研究

目的探讨亚甲蓝处理HBV血浆前S 2抗原(HBV Pre S2-Ag)与其DNA降解的关系。方法将乙肝表面抗原和前S2抗原均阳性的血浆,分为未处理组,亚甲蓝处理0、5、10、20、35 min,共6组,每组20 m L。ELISA检测处理前后pres2蛋白变化;设计多对引物,含重叠区,检测pres2基因DNA完整性。结果亚甲蓝能降解DNA序列,并且呈现区域特异性。结论亚甲蓝在基因水平灭活病毒,并且呈现核酸序列特异性,对pres2蛋白含量没有影响。运用核酸检测技术,对评价血浆HBVpres2基因病毒灭活效果的有一定的意义。

应用核酸扩增技术对血液中HBV、HCV和HIV-1检测

目的探讨采用核酸扩增技术(NAT)对血液进行HCV、HBV和HIV1核酸检测的可行性。方法采用手工法将血清学检测HBsAg、抗HCV、抗HIV1/2和TPHA呈阴性,以及ALT<40U的血浆标本进行48份×50μl混合;超速离心浓缩病毒后提取病毒核酸,采用RocheCOBASAmplicor分析系统对微量血浆混合标本进行HBVDNA、HCVRNA和HIV1RNA的检测;阳性反应的混合标本进行交叉混合和单份确认检测。结果18621份血清学检测合格的血液中,发现5份HBsAg阴性、HBVDNA呈阳性的血液,阳性率为0.027%(5/18621)。经进一步随访6～20月显示,2名献血者为HBV低水平感染,1例为HBV血清转换窗口期感染。结论NAT检测能够发现HBV低水平和窗口期感染的标本。

深圳市宝安区采供血现状调查分析

为了解深圳市宝安区血液采供血现状，预测本地区的采供血总体发展趋势，本组对2004～2008年该区采供血现状进行了调查分析，旨在完善本区公共卫生应急体系建设，加速输血事业发展，保障临床用血安全和降低输血风险，为政府增加无偿献血投入决策提供依据。

无偿献血工作中献血者满意度调查

目的了解无偿献血工作中献血者满意程度,及时改进献血服务质量。方法设计含有10项调查内容的满意度调查表,每年2次随机发放给献血者进行问卷调查。结果满意度调查表平均回收率为70.9%;2004和2005年共调查4次,献血者对血站综合满意度均在96.0%以上;对工作人员服务态度、技术水平、注射乙肝疫苗的满意度均稳定在98.5%以上;针对调查中发现的问题积极采取整改措施后,满意度明显上升。结论科学合理地开展献血者满意度调查能有效促进血站献血服务水平的提高。

对HBsAg和抗-HCV ELISA筛查阳性献血者进行确认试验分析

目的探讨对HBsAg和抗-HCVELISA筛查阳性献血者进行确认试验分析的意义。方法分别采用中和试验对ELISA检测HBsAg阳性献血者和重组免疫印记试验(RIBA)对抗-HCV阳性献血者进行确认检测,并对确认试验阴性献血者进行NAT检测。结果38693份献血者中,ELISA筛查出HBsAg和抗-HCV阳性分别为381(0.98%)份和173(0.45%)份。在ELISA筛查出的381份HBsAg阳性献血者中,经中和试验确认HBsAg阳性352份,29份为阴性;173份抗-HCV阳性献血者中,RIBA试验确认79份阳性,59份阴性,35份为可疑;29份中和试验确认HBsAg阴性标本和94份RIBA确认抗-HCV阴性或可疑的标本,NAT检测HBVDNA和HCVRNA均为阴性。结论对献血者进行HBsAg和抗-HCV确认试验能够避免假阳性结果的发生,有利于保护献血者的利益和推动志愿无偿献血事业的开展。

核酸扩增检测技术在血液筛查中的应用

目的探讨核酸扩增检测技术在血液筛查中的应用价值。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)常规筛查血液,对免疫指标合格的血液采用美国Roche Cobas Amplicor全自动PCR诊断系统检测HBV DNA、HCV RNA和HIV-1 RNA,样本混合采用48人份×50μL汇集,采用汇集池阳性的再分拆检测。结果 70 953份无偿献血标本中,HBV DNA阳性10份(1.4/10 000),未发现HCV RNA和HIV-1 RNA阳性样本。结论血站系统采用微量标本混合方式使用核酸扩增检测技术筛查血液是可行的,能有效提高临床用血的安全。

HCV无症状感染者外周血中病毒载量的检测分析

目的 了解丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus, HCV) 无症状感染者病毒载量分布以及与ALT水平的相关性。方法 采用荧光定量PCR检测80例HCV无症状感染者外周血中HCVRNA, 同时进行重组免疫印迹试验和血清丙氨酸转氨酶(ALT) 水平测定。结果 80例HCV无症状感染者外周血HCVRNA含量在102 1 ~105 8拷贝/ml, 其中82.5% (66 /80) 在104 0 ~105 8拷贝/ml。RIBA不同反应组HCVRNA含量间差异无显著性意义(P>0.05), ALT异常升高组HCVRNA含量与ALT正常组之间差异无显著性意义(P>0.05)。结论 HCV无症状感染者病毒载量处于相对低水平, 病毒载量与RIBA抗体反应模式和ALT水平的关系有待进一步研究。

核酸扩增检测在血液筛查的初步应用

目的 为提高血站供血安全性 ,探讨核酸扩增检测在血站血液筛查中的可行性。方法 在酶联免疫吸附试验 (ELISA)常规筛查血液的基础上 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)方法 ,检测乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、丙型肝炎抗体 (抗 HCV)和人免疫缺陷病毒抗体 (抗 HIV) 1/ 2呈阴性的献血者微量血浆汇集池标本 (2 0人份× 5 0 μl汇集 )中的丙肝病毒 (HCV)和乙肝病毒 (HBV)核酸 ,再对阳性汇集池中的标本进行单份检测。结果 880 5份 (分 44 2个汇集池 )血液被检测HCVRNA ,结果有1例 (0 .0 1% )为阳性 ;144 1份血液被检测HBVDNA ,结果 6例 (0 .4% )为阳性。从标本汇集到筛查出单份阳性献血者大约需要 3d。结论 ELISA结合荧光定量PCR检测微量血浆汇集池标本的方法筛查血液HBV和HCV感染是可行的 。

HBV抗原基因修饰树突状细胞疫苗体外抗HBV的研究

慢性乙型肝炎产生免疫耐受的原因之一是患者体内抗原提呈细胞不正常,尤其是树突状细胞（DCs）数量减少和功能存在缺陷,不能将抗原信号有效提呈给机体的免疫系统而发挥免疫清除效应.本研究利用整合HBV基因组的HepG2 22.1.5为细胞模型,通过携带编码HBV抗原基因的重组腺病毒载体的介导,探讨腺病毒介导的HBV抗原基因修饰的DCs能否诱导产生特异性抗感染免疫反应,为慢性乙型肝炎的治疗探索一种新的免疫治疗措施.