MAGE-3逆抗原转染树突状细胞的抗胃癌免疫效率

目的构建逆抗原表达载体,以获得理想的肿瘤疫苗。方法运用RT-PCR方法合成MAGE-3cDNA,分别将RANTES基因分泌段前导序列和受体Fc段克隆至MAGE-3cDNA两端(pS-MAGE-3-Fc)再转染入DC表达,将致敏的DC与外周血T细胞和胃癌细胞共培养,观察产生的免疫效应。结果转染pS-MAGE-3-Fc的DC诱导的刺激淋巴细胞增殖反应和CTL杀伤效应均显著高于转染pMAGE-3的转染组和对照组(P<0.05)。结论逆抗原策略是理想的肿瘤疫苗策略,能够显著提高肿瘤免疫效率。

肿瘤相关抗原MAGE-A3的研究进展

肿瘤相关抗原MAGE-A3广泛表达于多种恶性肿瘤,而在正常组织中(除睾丸和胎盘外)不表达。该抗原经抗原递呈细胞加工后能被HLA I类或II类分子递呈,引起针对MAGE-A3表达阳性的肿瘤细胞的特异性免疫。近年来,MAGE-A3抗原已被广泛应用于肿瘤的诊断和免疫治疗,本文就MAGE-A3抗原在肿瘤中应用做一综述。

白介素-18在肿瘤血管生成中的作用研究进展

白介素 18(IL 18),最初被称为干扰素诱导因子(IFN γinducingfactor,IGIF)。它在结构上与IL 1同源,但功能上又与IL 12类似。自 1995年被发现以来,其生物学功能也被越来越多地揭示。如:诱导IFN γ产生、增强NK细胞和CTL的功能、诱导Th1细胞的分化和克隆增殖等多种生物学活性。近年来,白介素 18在肿瘤中起的作用被广泛关注并成为研究热点。肿瘤的浸润、转移与血管生成密切相关,本文主要就IL 18在肿瘤血管生成中的作用作一综述。

吉非替尼对胃癌细胞株放射增敏的作用

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在绝大部分人类上皮肿瘤中都有表达,其表达高低与放疗抗拒有关。我们检测EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(gefitinib)对高表达胃癌细胞株放射增敏的作用,并初步探讨其机制。方法:Western blot法测定7株人胃癌细胞株(MKN45、SGC7901、SNU-1、N87、AGS、SNU-16、KATO-Ⅲ)中EGFR蛋白的表达,选取2株EGFR相对高表达的胃癌细胞用于后续实验。采用MTT法测定吉非替尼的半数抑制浓度(50%inhibition concentration,IC50),克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线并计算放射生物学参数,流式细胞仪检测吉非替尼联合放疗的凋亡率及细胞周期分布。结果:选取7株胃癌细胞中EGFR表达最高的MKN45和SGC7901细胞,发现其存活率均随吉非替尼浓度或放射剂量的增加而明显下降(P<0.05)。MTT法检测吉非替尼对MKN45及SGC7901细胞的IC50分别为0.4mmol/L和0.8mmol/L。MKN45细胞在0.1×IC50及0.2×IC50剂量下的增敏比(SER)分别为1.102和1.154,SGC7901则为1.092和1.176。吉非替尼或照射均可增加凋亡率,减少S期细胞比例及增加G2/M期细胞比例(P<0.01)。结论:吉非替尼序贯照射应用可提高EGFR高表达胃癌细胞的放射敏感性并阻碍细胞增殖、促进凋亡和干扰细胞周期分布。吉非替尼有望成为EGFR高表达胃癌的放射增敏剂。

卡培他滨节拍化疗在转移性结直肠癌维持治疗中的探索性Ⅱ期研究

背景与目的:转移性结直肠癌患者一线诱导化疗后的维持治疗方案如何选择,尚存在争议。本研究将卡培他滨节拍化疗应用于转移性结直肠癌维持治疗,评估其疗效与安全性。方法:本研究是单臂、单中心探索性研究。接受一线诱导化疗(XELOX、mFOLFOX6、FOLFIRI)18～24周的转移性结直肠癌患者,评估为临床获益后接受卡培他滨500 mg,每天2次口服维持治疗,直至疾病进展。研究首要终点是无进展生存期(progression-free survival,PFS),包括卡培他滨维持治疗的PFS和诱导化疗续贯维持治疗的PFS。次要终点为总生存期(overall survival,OS)和不良反应。结果:2014年10月16日—2017年12月31日于上海交通大学医学院附属瑞金医院接受治疗的转移性结直肠癌患者37例接受节拍化疗维持治疗。中位随访时间15.0个月(4.0～41.4个月)。节拍化疗维持治疗的中位PFS为5.6个月(1.7～38.5个月),诱导化疗续贯维持治疗的中位PFS为11.4个月(6.8～44.3个月)。主要的不良反应为白细胞减少(8/37,21.6%)、恶心呕吐(5/37,13.5%)和手足综合征(3/37,8.1%)。没有1例患者出现3～4级严重不良反应。结论:卡培他滨节拍化疗应用于转移性结直肠癌诱导化疗后维持治疗安全、有效。

不同化疗方案(PCF vs OLF)治疗晚期胃癌的疗效及安全性评价

背景与目的：化学治疗可提高晚期胃癌患者的生活质量，延长生存期，但胃癌化疗方案众多，目前尚无“金标准”可循。本研究对61例晚期胃癌分别施以紫杉醇＋顺铂（DDP）＋氟尿嘧啶（5-FU）（PCF）方案或草酸铂＋亚叶酸钙（LV）／5-FU（OLF）方案化疗，探讨不同方案的化疗疗效、不良反应及预后的影响因素。方法：61例晚期胃癌患者分两组，分别接受PCF方案（紫杉醇135mg／m^2，第1天；DDP15mg/m^2，第1～5天；5-FU500mg／m^2，第1～5天；每21d重复），或OLF方案（草酸铂130mg/m^2，第1天；LV200mg／m^2，第1～5天；5-FU750mg／m^2．第1～5天；每21d重复）3～6个周期，然后对所有患者进行随访至死亡为止。结果：PCF组有效率为51．6％（16／31），OLF组有效率为33．3％（10／30），两组近期疗效差异无显著性（P=0．209），PCF和OLF组的中位肿瘤进展时间（TTP）均为8个月（P=0．414），而前者的中位总生存期（OS）14个月，略优于后者（13个月），但差异无显著性（P=0．300）；PCF组的白细胞减少发生率达80％（22／31），显著高于OLF组（43．3％，P=0．033），而OLF组的外周神经炎发生率显著高于PCF组（P〈0．001）。单因素生存分析提示女性、临床分期Ⅳ期、近期疗效较差者的预后不佳，而多因素生存分析显示，近期疗效是决定晚期胃癌TTP和OS的唯一独立预后因素。结论：PCF和OLF两种方案治疗晚期胃癌，近、远期疗效相近而耐受性较好，而化疗的近期疗效是晚期胃癌患者TTP和OS的独立预后因素。

犬腺病毒 1型疫苗株 E3缺失表达载体的构建

探索以犬腺病毒 1型疫苗株 (Cannaught Laboratory Limited, CLL)作为病毒重组疫苗和基因转移载体的可行性。方法构建带增强型绿色荧光蛋白（ enhanced green fluorescent protein, EGFP）报告基因的 E3缺失重组病毒 CLLEGFP。将 CLLEGFP感染各种人源细胞，并以灌胃、腹腔注射、尾静脉注射和肌肉注射等不同途径接种昆明小鼠。多时间点取小鼠组织标本，冷冻干燥切片，观察 EGFP的表达。 4周后采集小鼠血清，以 Western blot分析抗 EGFP抗体的产生。结果 CLLEGFP能够感染各种人源细胞并表达 EGFP。在腹腔接种 CLLEGFP 3 d的小鼠肝组织细胞中可见转导的 EGFP。 Western blot分析显示，以各种途径免疫接种重组病毒 4周后的小鼠血清中均存在抗 EGFP特异抗体。结论 CLL具有开发成为病毒重组疫苗和基因转移载体的潜力。

伊立替康联合卡培他滨二线治疗38例晚期结直肠癌的临床观察

目的:观察伊立替康联合卡培他滨二线治疗晚期结直肠癌的疗效及不良反应。方法:38例晚期结直肠癌患者予以伊立替康200mg/m2,第1天,口服卡培他滨1000mg/m2一日两次,联用14天,每21天重复,至少治疗2周期。结果:本组患者有效率7.9%(3/38),疾病控制率55.3%(21/38),其中部分缓解(PR)3例,稳定(SD)18例,进展(PD)17例。中位进展时间(TTP)及中位总生存期分别为4月和11月,临床疗效是影响TTP及OS的主要预后因素。3度以上不良反应主要为中性粒细胞减少(18.4%)及腹泻(10.5%)。结论:伊立替康联合卡培他滨二线治疗晚期结直肠癌具有良好的疗效与耐受性。

IL-12与IL-18在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨胃癌组织中白介素12(IL12)与白介素18(IL18)的表达,及其与胃癌临床病理特征、血管生成及预后的关系。方法:选取50例胃癌标本,通过免疫组化检测IL12与IL18在胃癌组织中的表达,显微图像分析系统测定微血管密度。结果:IL12与IL18在胃癌中的阳性表达率分别为44%(22/50)和26%(13/50),IL12与病理分化(P=0.029)、浸润深度(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.002)、远处转移(P=0.003)和TNM分期(P=0.005)相关,IL18与远处转移密切相关(P=0.001);多因素生存分析显示IL12、MVD和T分期是胃癌的独立预后因素。结论:IL12和IL18阳性表达与肿瘤进展和转移有关,IL12是提示胃癌患者预后不良的独立因素。

犬腺病毒Ⅰ型疫苗株DNAE3区序列分析

对犬腺病毒Ⅰ型（CAV－Ⅰ）疫苗株CLL（CannughtLaboratoryLimited）DNA的E3区，pVⅢ基因和部分fiber基因进行序列测定，E3区为病毒DNA复制非必需区，因而本实验结果对构建CLLE3缺失表达载体具有重要指导意义。

奈达铂或顺铂联合紫杉醇治疗晚期食管癌的临床观察

目的评价并比较奈达铂/顺铂联合紫杉醇治疗晚期食管癌的疗效和不良反应。方法回顾性分析2006年至2011年收治的80例接受奈达铂联合紫杉醇(41例)或顺铂联合紫杉醇(39例)治疗的晚期食管癌患者,对比两种治疗方法的疗效及不良反应。结果奈达铂联合紫杉醇组(TN组)缓解率为26.8%;顺铂联合紫杉醇组(TP组)缓解率为23.1%,两组间差异无统计学意义(P=0.603);TN组和TP组的中位疾病进展时间(time to progress,TTP)和中位总生存时间(overall survival,OS)分别为6个月和5个月、11个月和10个月,差异具有统计学意义(P=0.003,P=0.068)。常见的毒副反应主要是消化道毒性,血液学毒性和脱发。奈达铂组消化道毒性发生率及严重程度显著低于顺铂组,差异具有统计学意义(P=0.0001)。结论奈达铂联合紫杉醇治疗晚期食管癌患者其疗效和总生存与顺铂联合紫杉醇相似,但是在疾病无进展时间和消化道毒性发生率及严重程度上,奈达铂较顺铂有着显著的优势。

T淋巴细胞rDNA转录活性在恶性肿瘤中的表现及临床意义

目的 :探讨外周血T淋巴细胞rDNA转录活性在恶性肿瘤中的表现及临床意义。方法 :以外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (AG NORs)作为T淋巴细胞rDNA转录活性分析指标 ,采用KL型肿瘤免疫图像分析系统对 1 0 0例正常健康者 ,2 63例肿瘤患者外周血T淋巴细胞检测的IS %值 (T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值 )进行分析。结果 :外周血T淋巴细胞IS %值在正常人与肿瘤患者之间的表现差异有显著性 (P <0 .0 1 ) ;带瘤的和不带瘤的恶性肿瘤患者之间、健康者中不同年龄组之间差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ;不同性别的健康者及恶性肿瘤患者中、不同部位肿瘤之间、不同细胞类型肿瘤之间、肿瘤组中不同年龄组之间差异无显著性 (P >0 0 5)。结论 :外周血T淋巴细胞IS %值与肿瘤细胞的存在与否有直接的关系 ,与性别、不同部位肿瘤、不同细胞类型无关 。

抗转录中介因子1-γ抗体是成人皮肌炎合并恶性肿瘤的血清学标志物

目的:研究血清抗转录中介因子1-γ(transcriptional intermediary factor 1-γ,TIF1-γ)抗体在诊断皮肌炎(dermatomyositis,DM)和临床无肌病性皮肌炎(clinically amyopathic dermatomyositis,CADM)合并恶性肿瘤中的价值。方法:2016年1月至2019年12月间,收集上海交通大学医学院附属瑞金医院皮肤科病房收治的223例DM和CADM患者[包括209例成人DM(107例)和CADM(102例),5例青少年DM(juvenile DM,JDM)和9例青少年JCADM(juvenile CADM,JCADM)]的临床资料。成人DM和成人CADM分别被分为恶性肿瘤组和无肿瘤组。初诊时血清用酶联免疫吸附测定法检测患者血清抗TIF1-γ抗体,分别比较成人DM和成人CADM患者中恶性肿瘤与无肿瘤患者之间抗TIF1-γ抗体的阳性率,进一步比较抗TIF1-γ抗体阳性与抗体阴性患者之间恶性肿瘤的发生率。结果:①成人DM和CADM中恶性肿瘤共42例(20.1%),占前3位的分别是鼻咽癌、乳腺癌和肺癌。JDM和JCADM患者中无一例发生恶性肿瘤。②成人DM和CADM中有74例(74/209,35.4%)血清抗TIF1-γ抗体阳性,其中DM患者抗TIF1-γ抗体阳性率33.6%(36/107),CADM患者抗TIF1-γ抗体阳性率37.3%(38/102)。5例JDM患者中,无一例抗TIF1-γ抗体阳性;9例JCADM患者中,3例抗TIF1-γ抗体阳性。③成人DM中,恶性肿瘤患者的抗TIF1-γ抗体阳性率显著高于无肿瘤患者[26/35(74.3%)比10/72(13.9%),P<0.0001];抗TIF1-γ抗体阳性患者恶性肿瘤的发生率显著高于阴性患者[26/36(72.2%)比9/71(12.7%),P<0.0001]。成人CADM中,恶性肿瘤患者与无肿瘤患者之间抗TIF1-γ抗体的阳性率差异无统计学意义[4/7比34/95(35.8%),P=0.420];抗TIF1-γ抗体阳性与抗体阴性患者之间恶性肿瘤的发生率差异无统计学意义[4/38(10.5%)比3/64(4.7%),P=0.420]。结论:抗TIF1-γ抗体阳性与成人DM患者恶性肿瘤的发生相关,而与成人CADM患者恶性肿瘤发生无关。抗TIF1-γ抗体可能是成人DM合并恶性肿瘤的血清标志物,对于抗TIF1-γ抗体阳性的成人DM患者需要加强恶性肿瘤筛查。

抗PD-1免疫检查点治疗的临床疗效预测标志物

·程序性细胞死亡1（programmed death1，PD-1）是肿瘤细胞及其微环境中的负反馈信号系统。PD-1与其配体结合，可抑制Thl细胞激活和免疫应答。

纤维素载体的酶免疫测定技术

纤维素载体的酶免疫测定技术黎皓（北京生化免疫制剂中心开发室）程伯鲲（中国预防医科院流研所微生物室）自１９６６年Ｎａｋａｎｅ建立酶标记抗体技术以来，酶免疫测定技术（ＥｎｚｙｍｅＩｍｍｕｎｏａｓ－ｓａｙｓ，ＥＩＡ）在很多领域得到广泛应用，被认为是继放射免...

脐血CD34^+细胞体外诱导分化为树突状细胞及其扩增

目的探索脐血CD34+细胞体外诱导分化为树突状细胞及其扩增、培养大量树突状细胞(DCs)的方法。方法Ficoll分离脐血单个核细胞,免疫微磁珠法分离纯化CD34+细胞,以rhIL-4、GM-CSF、rhSCF、rhFlt-3Ligand、TGF-β1及TNF-α体外诱导培养14d,进行形态学观察、表型检测及上清液IL-12测定。结果体外培养14d后,细胞呈现典型的成熟DCs形态学及表型特征:胞体表面粗糙,可见大量突起,高水平表达CD1a、CD11c、CD40、CD80、CD83、CD86和MHCⅡ类分子;同时,IL-12浓度随着培养时间的增加而升高,且在加入TNF-α刺激成熟后,IL-12浓度较未成熟时显著升高(P<0.05)。结论体外联合运用rhIL-4、GM-CSF、rhSCF、rhFlt-3Ligand、TGF-β1、TNF-α,能够成功诱导脐血CD34+细胞分化为大量活力好的DCs。

肝外胆道癌68例预后因素分析

[目的]探讨影响肝外胆道癌患者的预后因素。[方法]随访68例肝外胆道癌患者,根据临床资料使用单因素生存分析和Cox多元回归进行预后因素的分析。[结果]行根治切除术、单纯切除术和姑息引流术患者的中位总生存期(OS)分别为27个月、16个月和6个月(P=0.001),Ⅲ～Ⅳ期和Ⅰ～Ⅱ期肝外胆道癌患者的中位OS分别为16个月和37个月(P=0.015)。Cox模型发现手术方式(P=0.001)与临床分期(P=0.037)是影响OS的独立预后因素。临床分期为Ⅰ～Ⅱ期肝外胆道癌的中位无复发生存期(RFS)显著长于Ⅲ～Ⅳ期患者(21个月vs.11个月,P=0.003);术后辅助化疗者的中位RFS亦显著高于未化疗者(19个月vs.11个月,P=0.046)。Cox模型证实临床分期(P=0.033)与术后辅助化疗(P=0.038)是影响RFS的独立预后因素。[结论]手术方式与临床分期是肝外胆道癌OS的独立预后因素,而临床分期与是否行辅助化疗为影响RFS的独立预后因素。

错配的双链RNA及其稳定性研究

研究了核糖胞嘧啶和脲嘧啶共聚物的酶促合成条件。共聚物ＰｏｌｙＣｘＵ与ＰｏｌｙＩ在类似生理盐水条件下形成错配的双链ＲＮＡ，然后对ＰｏｌｙＩ：Ｃ和错配的双链ＲＮＡ对核酸酶的敏感性及紫外熔化曲线进行了比较研究。

人腺病毒载体的研究进展

目前腺病毒载体已成为基因治疗和重组疫苗研究的热点，随着分子生物学技术及基因治疗理论的进一步发展，腺病毒载体将发挥越来越重要的作用。本文综述了腺病毒载体构建及其应用的研究进展。

胃癌细胞免疫治疗的研究进展

目前，胃癌治疗仍以手术为主、化疗为辅．其他有术中放疗、中医治疗等。免疫治疗一直被人们寄以厚望，然而，由于肿瘤发病机制复杂．对肿瘤免疫机制认识还不够深人．以及胃癌异质性明显．发病机制多样，因此胃癌的免疫治疗进展不明显。但免疫治疗的理念最符合人们的期望．尤其在肿瘤预防、肿瘤切除术后预防复发、转移等方面有着非常积极的意义．目前．肿瘤免疫治疗方面有不少研究进展值得胃癌治疗的研究借鉴．以期有所突破。本文就细胞免疫以及应用于胃癌治疗方面的研究进展作一介绍。