REST及其剪切变体REST4在肿瘤中的研究进展

抑制元素l-沉默转录因子(repressor element 1-silencing transcription factor,REST)又称为神经元限制性沉默因子(neuron-restrictive silencer factor,NRSF),是神经元特异性表达的负向调控因子,存在广泛的选择性剪切现象。REST及其剪切变体REST4在不同类型肿瘤中发挥重要作用,在胶质瘤、髓母细胞瘤等神经性肿瘤中REST可作为致癌因子,而在结肠癌、肺癌、乳腺癌等上皮性肿瘤中REST作为抑癌因子发挥肿瘤抑制作用。本文就REST及其剪切变体REST4在肿瘤中的研究进行综述。

TERT启动子突变在甲状腺癌中的研究进展

甲状腺癌是内分泌系统常见的肿瘤之一,其发病率逐年上升。端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)启动子突变(C228T,C250T)自2013年在甲状腺癌中被发现以来,其与甲状腺癌的关系即被广泛研究。绝大多数研究认为该突变与甲状腺癌的发生及临床病理特征以及不良预后息息相关,该突变为甲状腺癌致病基因突变。本文对TERT启动子突变在不同类型甲状腺癌中的发生及其临床意义进行综述,以期为TERT启动子突变在甲状腺癌中的研究及甲状腺癌的分子诊治提供新思路。

多巴胺D_1受体Ala229Thr多态性对受体信号转导功能的影响

目的:构建表达不同基因型的人多巴胺D_1受体(DRD_1)真核细胞表达载体,明确DRD_1Ala229Thr多态性对受体信号转导功能的影响。方法:从人基因组经PCR扩增DRD_1基因编码区全长,将纯化后的PCR产物与pMD_19-T载体进行T连接,得到DRD_1229Ala(野生型)重组克隆载体。在野生型重组克隆载体的基础上,应用定点突变方法构建229Thr(突变型)重组克隆载体。用KpnⅠ和EcoR Ⅰ双酶切野生型和突变型重组克隆载体,将酶切后得到的目的片段纯化后与经相同双酶切的pc DNA3.1(+)表达载体连接,即得到野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体。将pc DNA3.1(+)空载体、野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体瞬时转染入COS-7细胞,用c AMP ELISA试剂盒分别检测forskolin和不同浓度多巴胺及(±)-SKF38393处理下细胞内基础cAMP的水平及激动剂诱导的cAMP的水平。结果:经双酶切及测序证实野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体构建正确。在forskolin处理的情况下,空载体组和阴性对照组细胞内cAMP的水平分别为(0.40±0.14)和(0.78±0.24)pmol/well,两者之间并没有显著差异(P=0.082),野生型组和突变型组细胞内c AMP的水平分别为(2.06±0.35)和(1.37±0.12)pmol/well,野生型组细胞内c AMP水平显著高于空载体组(P<0.001)和突变型组(P=0.007);在多巴胺及SKF38393处理的情况下,细胞内cAMP的水平均呈浓度依赖性升高,但突变型组细胞内的cAMP水平均显著低于野生型组(P<0.001)。多巴胺的EC_(50)值在野生型组为625 nmol/L,突变型组为9 612 nmol/L,比野生型组增加15倍;SKF38393的EC_(50)值在野生型组为421 nmol/L,突变型组为417 nmol/L,两者之间不存在明显差异。结论:本研究成功构建了野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体;DRD_1Ala229Thr多态性影响受体的激活和信号转导功能,与野生型相比,229Thr型受体信号转导功能显著降低。

农药产品的质量控制与管理

农药是一种涉及农民切身利益的特殊商品,它对农业收成影响极大。农药品种繁多,一种农药产品按介绍的使用方法施用后,能否达到预期效果,与产品质量有密切关系。因质量不一样,同一种农药在药效上表现出很大差异。