空肠弯曲菌共同抗原单克隆抗体的研制及其在细菌检验中的应用

应用B淋巴细胞杂交瘤技术,建立了5株稳定分泌抗空弯菌共同抗原(CA)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,其中4株的McAb针对CA中的耐热抗原成分,1株的McAb针对CA中的不耐热抗原成分。应用32种其它细菌对这些McAb的特异性检查表明,除与幽门弯曲菌发生交叉反应外,均为阴性反应。应用不同地区、不同来源的516株空弯菌对这些McAb进行检查,结果均为阳性反应。应用BA-ELISA、间接-ELISA对909份实际标本进行了检测,结果均与常规培养法无显著差异,可在28小时内报告结果。这表明本文研制的McAb对空弯菌的鉴定与检测具有特异、敏感和对本菌覆盖率高的特点,可用于人、兽空弯菌的鉴定与检验。

BA-ELISA检测空肠弯曲菌的研究

应用抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体,以BA-ELISA法对猪、鸡胴体、脏器及粪便标本中的空肠弯曲菌进行检验。建立的BA-ELISA法具有较强的特异性,在参试的15种其它细菌中,除与幽门弯曲菌出现交叉反应外,与其它细菌均为阴性反应;其敏感性可达3.2×10~4cell/ml。对猪的140份、鸡的142份标本进行了检测,BA-ELISA和常规分离培养法的阳性率分别为38.6％、37.1％和50％、48.6％,两种检验方法的结果相差不显著,BA-ELISA法可在27小时内报告结果,而常规分离培养法则需5～7天,这为空肠弯曲菌的检验提供了一种快速、敏感的方法。

BA—DOT—ELISA方法的建立及其在空肠弯曲菌鉴定上的应用

通过对实验条件的筛选,建立了BA—DOT—ELISA的工作程序。在该程序中,应用抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体,对空肠弯曲菌进行了鉴定。本方法具有较强的特异性。在参试的15种其它细菌中,除与幽门弯曲菌出现弱阳性反应外,与其它细菌均为阴性反应。其敏感性可达1.6×10~5cell/ml。对不同地区、不同来源的148株空弯菌进行鉴定,结果均为阳性反应,与常规鉴定法的结果一致。这为空肠弯曲菌的鉴定提供了一种特异、敏感、快速的方法。 DOT—ELISA是近几年发展起来的一项新技术,具有简便、经济、不需要特殊仪器、结果可长期保存的优点,自八十年代初期问世以来,已得到较广泛的应用。将生物素一亲和素(BA)系统引入酶联免疫吸附试验,提高了ELISA的敏感性,但在DOT—ELISA中的应用效果如何,尚有待探讨。本研究应用抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体和BA系统,建立了BA—DOT—ELISA的工作程序,并应用这种方法对空肠弯曲菌进行快速鉴定,取得了较满意的结果,现简要报告如。