电针预处理通过PTEN/PI3K通路减轻2型糖尿病大鼠足细胞损伤的机制研究

目的:观察电针预处理对2型糖尿病肾脏损伤大鼠足细胞和磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路的影响,探讨其减轻2型糖尿病的可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、抑制剂组、假电针组,10只/组。空白组正常饮食,不予处理;余组予高脂高糖饮食并联合链脲佐菌素腹腔注射造模。电针组造模前电针“中脘”“关元”及双侧“足三里”“丰隆”,假电针组取穴同电针组,针至皮下不通电,隔日1次,每次15 min,抑制剂组在电针组的基础上腹腔注射BPV(HOpic,0.6 mg/kg,0.5 mg/mL),所有治疗均持续8周。检测大鼠随机血糖,ELISA法检测尿微量白蛋白(ALB)含量,全自动生化分析仪检测血清尿素(Urea)、肌酐(Crea)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量,HE染色、PAS染色、Masson染色观察大鼠肾脏组织病理学变化,透射电镜观察肾脏足细胞超微结构改变,Western blot法检测肾脏Synaptopodin、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、PTEN和PI3K蛋白表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠血糖、血清ALB、Urea、Crea、TC、TG含量及肾脏PI3K蛋白表达水平显著上升(P<0.01),Synaptopodin、LC3-Ⅱ、PTEN蛋白表达水平降低(P<0.01),肾小球肥大,肾小球内糖原沉积,胶原纤维增多,基底膜增厚,足突融合或消失,自噬体明显减少;与模型组相比,电针组大鼠血糖、血清ALB、Urea、Crea、TC、TG含量及肾脏PI3K蛋白表达水平下降(P<0.01,P<0.05),Synaptopodin、LC3-Ⅱ、PTEN蛋白表达水平上升(P<0.01),肾小球肥大和基底膜增厚减轻,糖原沉积明显减少,足突基本正常,并见自噬体;与电针组相比,抑制剂组大鼠血糖、ALB、Urea、Crea、TC、TG含量及肾脏PI3K蛋白表达水平不同程度上升(P<0.05,P<0.01),Synaptopodin、LC3-Ⅱ、PTEN蛋白表达水平下降(P<0.01),假电针组血糖、ALB、Urea、TC、TG含量及肾脏PI3K蛋白表达水平上升(P<0.05,P<0.01),Synaptopodin、LC3-Ⅱ、PTEN蛋白表达水平下降(P<0.01),两组肾小球肥大和基底膜增厚较明显,可见糖原沉积,足突不同程度融合,自噬体少见。结论:电针预处理对大鼠肾脏足细胞的保护作用可能是通过促进PTEN基因编码蛋白的表达从而抑制PI3K的激活,提高足细胞自噬水平而实现的。