FSTL1基因促进猪前体脂肪细胞分化成脂的机制

【目的】构建猪FSTL1基因过表达载体和RNAi载体,探究FSTL1基因对猪前体脂肪细胞分化成脂的作用及机制。【方法】通过构建FSTL1基因过表达载体和RNAi载体,在猪前体脂肪细胞中过表达、干扰FSTL1基因并诱导其分化,测定细胞中甘油三酯含量以及脂肪细胞分化相关调节基因的mRNA表达量。【结果】成功克隆得到猪FSTL1基因cDNA序列,其开放阅读框全长924 bp,并将序列提交到GenBank,登录号为KF021281。成功构建猪FSTL1基因的过表达载体pcDNA3.1-FSTL1和RNAi载体pSilencer 4.1-491以及pSilencer 4.1-530。过表达FSTL1基因促进了猪前体脂肪细胞中甘油三酯生成,干扰FSTL1基因抑制了猪前体脂肪细胞中甘油三酯的生成。FSTL1在猪前体脂肪细胞中使PPARγ2和AP2基因表达分别上调了73%和113%,使LPL、Adiponectin和FASN等基因表达分别下调了44%、79%和16%。【结论】FSTL1基因通过上调PPARγ2和AP2基因,下调LPL、Adiponectin及FASN基因的表达,促进猪前体脂肪细胞的分化,提高猪前体脂肪细胞中甘油三酯的含量。

猪FSTL1基因克隆、鉴定及组织mRNA表达水平分析

为了研究猪FSTL1基因,并探明其在猪不同组织中的表达情况和脂肪组织生长发育中的调控作用,试验克隆了猪FSTL1基因,对其生物信息学进行了分析,并采用荧光定量PCR技术检测了其在猪不同组织与脂肪细胞分化时序表达情况。结果表明:猪FSTL1与其他动物氨基酸序列同源性较高,属于亲水性蛋白;FSTL1基因在猪的12个组织中均有表达,其中在肺脏、皮下脂肪组织中的表达量较高;在猪皮下脂肪细胞分化前期表达量短暂增加,随后显著下降。