经脐单孔腹腔镜技术在腹部外科的应用

目的探讨经脐单孔腹腔镜技术在腹部外科的应用价值。方法总结2009年5-11月在上海交通大学医学院附属新华医院普外科行单孔腹腔镜腹部手术(单孔组)的43例患者的临床资料,并与同期58例行两孔腹腔镜手术(两孔组)患者的临床资料进行比较。结果两组患者手术均获成功,术后恢复好,无出血、胆漏、切口感染等并发症发生。单孔组行胆囊切除的平均手术时间为(54.2±23.3)min,显著长于两孔组的(39.4±13.2)min(P<0.05);单孔、两孔组行胆囊切除术患者的平均住院时间分别为(5.9±2.3)、(5.2±3.1)d,差异无统计学意义(P>0.05)。单孔组患者的切口愈合良好,瘢痕隐蔽不易发现,有93%(40/43)的患者表示比预期结果满意。结论经脐单孔腹腔镜技术的操作难度较大,但具有无瘢痕的优点,有技术条件的医院可在严格把握适应证的基础上开展。

氧调节蛋白150在人肝细胞癌中的过度表达及其对凋亡的作用(英文)

在前期研究中发现,氧调节蛋白150(ORP150)是与肝细胞癌相关的糖蛋白.进一步研究了ORP150的表达水平与肝细胞癌的相关性.免疫印迹、细胞免疫化学和定量PCR分别在蛋白质水平和mRNA水平检测了ORP150的表达.运用RNA干扰技术检测了其对凋亡和肝细胞癌侵袭性的影响.发现:无论是蛋白质水平还是mRNA水平,与正常肝细胞相比,ORP150在肝细胞癌中表达明显上调;经RNA干扰后,肝细胞癌的凋亡明显增加,但肿瘤细胞的侵袭性无改变.肝细胞癌中,ORP150表达上调,它可能抑制肿瘤细胞的凋亡而促进其生长.ORP150有可能成为肝细胞癌的治疗靶点.

“申请考核制”博士招生条件下临床医学硕士专业学位研究生培养方法的初步探讨

临床医学硕士专业学位研究生(规培住院医师)培训合格后可同时获得医学硕士专业学位与规培合格证书,目标是培养具备较强临床能力、操作技能和临床科研能力的应用型医学专门人才,目前越来越多的医学院校开始采取“申请考核制”的博士招生办法,为提高临床医学硕士专业学位研究生参加“申请考核制”博士成功的机会,结合博士招生要求,上海交通大学医学院附属新华医院普外科就如何有效统一两者的培训内容和方式进行了有益的探索,在成立导师组的前提下为每位学生指定了临床与科研双导师,即改善普通外科住院医师规范化培训的效果,又提高临床医学硕士专业学位研究生的科研思维与能力,为申请博士奠定坚实的基础。

TRAIL及其5种受体DNA片段的扩增与序列分析

目的制备TRAIL及其5种受体的特异性基因探针。方法以PHA刺激人外周血淋巴细胞(PBL)增殖,从而诱导TRAIL及其受体的mRNA转录水平提高,然后用RTPCR方法扩增出TRAIL及其5种受体的DNA基因片段,并采用基因测序法确证所得基因片段序列的正确性。结果获得了TRAIL及其5种受体的DNA基因片段。结论所用方法正确,为研究TRAIL及其受体调控细胞凋亡的机制提供了有价值的工具。

叶酸缺乏对大隐静脉内皮细胞增殖的影响

目的测定叶酸缺乏对人大隐静脉内皮细胞(HSVECs)增殖的影响。方法将HSVECs在叶酸缺乏的培养液(实验组)和正常培养液(对照组)中培养30d,用细胞培养和流式细胞仪(FCM)测定叶酸缺乏对HS-VECs细胞增殖数量、细胞周期分布和凋亡的影响。结果 HSVECs在2种培养液中生长30d后,观察结果显示叶酸缺乏可引起HSVECs细胞数量减少、增殖周期细胞比例减少、凋亡增高(P<0·01)。结论叶酸缺乏可抑制HSVECs细胞的增殖生长。

肝癌患者血浆巨噬细胞移动抑制因子水平及其临床意义

目的:分析肝细胞癌患者术前血浆中巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)浓度,及其与临床病理特征和预后的关系。方法:用双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)测定44例肝细胞癌和20例肝良性占位患者血浆中MIF、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、IL-8浓度,分析血浆MIF浓度与临床病理特征和预后的关系。结果:肝癌患者血浆MIF浓度高于肝良性占位患者,差异有统计学意义(中位浓度,9.09ng.mL-1对4.80ng.mL-1;P=0.002)。肝癌患者血浆MIF与VEGF浓度呈正相关(r=0.547,P<0.001)。血浆MIF浓度和肿瘤数目(P<0.001)、大小(P=0.039)、包膜完整性(P=0.044)、血管侵犯(P=0.041)、临床TNM分期(P<0.001)有关。低MIF表达(<9.09ng.mL-1)患者的总体生存时间(中位总体生存时间,26.9个月对20.3个月;P=0.0069)和无瘤生存时间(中位生存时间,24.5个月对12.3个月;P=0.0023)明显高于高MIF表达(>9.09ng.mL-1)患者。多因素分析结果表明,血浆MIF水平是影响肝癌患者术后总体生存和无瘤生存的独立危险因素。结论:MIF可能通过刺激VEGF分泌影响肿瘤血管生成,进而促进肿瘤的转移复发。血浆MIF可能成为肝癌侵袭性的生物学标志和预测患者预后的独立指标。

术前CT联合CA-199在预测肝内胆管细胞癌淋巴结转移中的作用

目的通过研究影响肝内胆管细胞癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)淋巴结转移的临床病理因素,建立预测肝内胆管细胞癌淋巴结转移的模型。方法回顾性分析2000年1月至2015年1月在上海交通大学附属新华医院行手术治疗并淋巴结清扫或活检的84例ICC患者的临床病理资料。单因素和多因素logistic回归分析与淋巴结转移相关的危险因素,采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价临床病理指标的预测价值。结果 84例患者中淋巴结转移的发生率为29.76%,单因素分析结果显示肿瘤数目、肿瘤分化程度、术前血清CA-199水平、血管侵犯以及术前CT显示淋巴结直径≥1 cm与淋巴结转移相关;进一步多因素分析显示,只有术前血清CA-199水平和术前CT显示淋巴结直径≥1cm与淋巴结转移相关。ROC曲线中,CA-199、术前CT以及CT联合CA-199的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.660、0.732和0.746。结论术前诊断ICC淋巴结转移仍然比较困难,CT联合CA-199对预测淋巴结转移的效能较单用CT高。

战创伤急救一体化模式

目的探讨一体化战创伤急救模式在创伤患者急救中的应用价值。方法 80例严重创伤患者作为传统分科救治的对照组,96例严重创伤患者作为实施创伤急救一体化模式的实验组。观察两组患者急诊室停留时间、急诊至手术间隔时间等急救反应时间。比较两组患者的抢救成功率和死亡率。结果实验组的急诊室停留时间、急诊至手术间隔时间明显缩短,救治成功率提高,死亡率降低(P<0.05)。结论在战创伤患者中应用一体化创伤急救模式,值得在临床推广应用。

术前肿瘤标志物检测对肝内胆管细胞癌淋巴结转移的预测价值

目的：探讨术前肿瘤标志物检测对肝内胆管细胞癌（ICC）淋巴结转移的预测价值。 方法：采用回顾性队列研究方法。收集2006年5月至2016年5月上海交通大学医学院附属新华医院收治的 69例ICC患者的临床病理资料。69例ICC患者中，24例术后病理学检查证实有淋巴结转移，设为有淋巴结转移组； 45例术后病理学检查证实无淋巴结转移，设为无淋巴结转移组。术前检测两组患者肿瘤标志物：AFP、CEA、前列腺特异抗原（PSA）、CA199、CA125、CA242、CA153、CA724、CA211、神经烯醇化酶（NSE）、鳞状上皮癌细胞抗原（SCC）。选取差异有统计学意义的指标构建受试者工作特征（ROC）曲线。根据ROC曲线计算各指标的临界值、灵敏度和特异度。计算差异有统计学意义的指标与术后病理学检查结果的符合率。观察指标：（1）血清肿瘤标志物总阳性率。（2）两组患者血清肿瘤标志物水平比较。（3）血清肿瘤标志物检测预测ICC淋巴结转移的ROC曲线分析及与术后病理学检查结果符合率。符合正态分布的计量资料采用±s表示，组间比较采用t检验。偏态分布的计量资料采用M（Q25，Q75）表示，组间比较采用Wilcoxon秩和检验。计数资料比较采用x2检验。有统计学意义的指标进一步行ROC曲线分析。 结果：（1）血清肿瘤标志物总阳性率：69例ICC患者AFP、CEA、PSA、CA199、CA125、CA242、CA153、CA724、CA211、NSE、SCC 11项肿瘤标志物的阳性率分别为27.5%（19/69）、29.0%（20/69）、4.3%（3/69）、69.6%（48/69）、36.2%（25/69）、50.7%（35/69）、26.1%（18/69）、21.7%（15/69）、62.3%（43/69）、31.9%（22/69）、21.7%（15/69）。其中，AFP、CEA、CA199、CA125、CA242、CA153、CA724、CA211、NSE、SCC阳性率均〉20%，列入两组患者比较指标。（2）两组患者血清肿瘤标志物水平比较：有淋巴结转移组ICC患者血清CA199、CA125、CA242、CA211分别为284.9 U/mL（42.5 U/mL，730.3 U/mL）、63.6 U/mL（23.4 U/mL，172.1 U/mL）、71.7 U/mL（25.6 U/mL，138.9 U/mL）、6.7 μg/L（3.9 μg/L，17.5 μg/L）；无淋巴结转移组分别为58.0 U/mL（25.9 U/mL，405.9 U/mL）、18.2 U/mL（11.7 U/mL，33.8 U/mL）、11.0 U/mL（3.7 U/mL，41.7 U/mL）、3.7 μg/L（2.7 μg/L，6.9 μg/L），两组比较，差异均有统计学意义（Z=2.016，3.213，3.143，2.482，P〈0.05）。（3）血清肿瘤标志物检测预测ICC淋巴结转移的ROC曲线分析及与术后病理学检查结果符合率：血清CA199、CA125、CA242、CA211 对应ROC曲线下面积分别为0.648（95%可信区间：0.515-0.781，P〈0.05），0.736（95%可信区间：0.608-0.864，P〈0.05），0.731（95%可信区间：0.603-0.859，P〈0.05），0.714（95%可信区间：0.581-0.847，P〈0.05）。血清CA199、CA125、CA242、CA211的阳性临界值分别为150.6 U/mL、35.7 U/mL、43.4 U/mL、6.0 μg/L，灵敏度分别为62.5%、66.7%、70.8%、62.5%，特异度分别为71.1%、82.2%、77.8%、75.6%。血清CA199、CA125、CA242、CA211与术后病理学检查结果符合率分别为68.1%（47/69）、76.8%（53/69）、75.4%（52/69）、71.0%（49/69）。 结论：血清CA199、CA125、CA242、CA211预测ICC患者淋巴结转移有重要临床价值。

胆总管下段解剖生理特点与损伤分型的关系

胆总管探查是胆道外科常用的基本手术方法,胆总管下段分为胰腺段和十二指肠壁内段,在进入十二指肠前,胆管以一定的角度向右后下倾斜,并与十二指肠间形成一个(40.5±4.6)夹角,胆管长(1.67±0.52)cm,仅有部分结缔组织覆盖。由于胆总管下段解剖结构的特殊性,加之胆总管末端结石嵌顿、胆管狭窄等病理改变,容易导致胆总管下段探查、取石时发生医源性损伤,引起严重并发症。根据解剖特点及合并脏器损伤情况,胆总管下段损伤大体可分为4型,单纯性胆管损伤、合并胰腺损伤、合并十二指肠损伤及合并胰腺十二指肠损伤,因此了解胆总管下段的解剖特点及损伤分型,采用正确的探查方法及预防、处理措施显得十分重要。

胰十二指肠切除术后不留置鼻胃及鼻肠营养管可行性研究

目的探讨在胰十二指肠切除术后不留置鼻胃和鼻肠营养管的安全性及可行性。方法回顾性分析2014年1月至2019年12月上海交通大学医学院附属新华医院普外科收治的238例胰十二指肠切除术病人的临床资料,其中110例不留置鼻胃及鼻肠营养管(未留置组),128例留置鼻胃及鼻肠营养管(留置组)。对比分析两组病人术后恢复情况、营养状况及术后并发症。结果未留置组与留置组病人的手术时间、术中出血量、术后首次肛门排气和排便时间差异均无统计学意义(P>0.05),但未留置组病人术后住院时间更短,住院费用明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。未留置组病人在消化道不适症状(咽喉疼痛、恶心呕吐)、肺部感染方面明显优于留置组(P<0.05),且未增加胰瘘、胆瘘、切口感染、胃排空延迟、术后出血、腹腔感染的发生率(P>0.05);两组在术后30 d死亡及二次手术方面差异无统计学意义(P>0.05)。术后第3、5天未留置组病人血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PAB)水平明显高于留置组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胰十二指肠切除术后病人不常规放置鼻胃及鼻肠营养管安全可行,有利于病人的术后康复,减轻痛苦,改善术后营养状况。

生长抑素联合顺铂对胆囊癌细胞生长的协同抑制作用

目的评估生长抑素（SST）联合顺铂（DDP）对胆囊癌（GBC）细胞生长的协同抑制作用及分子机制。方法免疫组化方法检测PTEN蛋白在GBC组织中的表达；CCK-8法检测SST联合DDP对GBC细胞GBC—SD和SGC996体外增殖的影响，并通过等效法分析两种药物的协同作用；裸鼠荷瘤模型评估药物处理后细胞体内增殖；Annexin V／PI双染法检测SST联合DDP对细胞凋亡的影响；组织活性氧荧光定量（DCFH—DA）法检测药物处理后细胞内氧化应激活性氧（ROS）的水平变化；JC-1法检测药物处理后细胞线粒体膜电位变化；蛋白印迹（Western blot）法检测药物处理后细胞内PTEN、p-AKT等蛋白表达水平变化。结果PTEN蛋白在GBC组织中表达异常降低，且表达水平与肿瘤分化程度呈负相关，与患者生存期呈正相关。DDP可以降低细胞内PTEN蛋白表达水平，SST作用与之相反，两者联合可以发挥协同抑制作用，并且能够显著抑制裸鼠荷瘤组织的生长。SST和DDP均能诱导细胞凋亡，且两药联合的凋亡诱导作用更显著。SST可以抑制AKT信号通路激活，但并不诱导ROS生成。DDP作用与之相反。两者均能诱导线粒体细胞色素C（cytochrome C）释放，激活caspase-3。结论SST通过诱导PTEN蛋白表达增强DDP对GBC细胞生长的抑制作用，二者联合用药有望成为今后临床GBC患者化疗的选择之一。

木香烃内酯对胆囊癌的抗肿瘤活性及其机制

目的探讨木香烃内酯(Cos)对胆囊癌细胞增殖与侵袭能力的影响及其可能机制。方法用不同浓度的Cos作用于胆囊癌细胞,采用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、Transwell、Western blot实验检测细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移及相关蛋白表达的变化。实验数据比较采用t检验。结果 CCK-8实验显示,Cos组细胞活性受到不同程度抑制,且抑制作用呈时间和剂量依赖性。克隆形成实验显示Cos组细胞克隆数明显少于对照组,且呈剂量依赖性关系。流式细胞术结果显示,Cos组细胞凋亡率和处于S、G2/M期的细胞比例均增加。Western blot检测结果显示,随着Cos浓度的增加,cyclin A和cyclin B1表达水平逐渐降低,p-JNK蛋白以及凋亡相关蛋白cleaved PARP、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bax等表达增加,Bcl-2表达减少。Transwell实验结果显示,穿膜细胞数随Cos浓度增加而逐渐减少。Western blot结果显示,MMP-2和MMP-9的表达水平随着Cos浓度的增加而逐渐降低。结论 Cos可在体外抑制胆囊癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期并可抑制细胞迁移。

CT值对原发性肝癌肝周淋巴结转移的诊断价值

目的探讨CT值在原发性肝癌（肝癌）肝周淋巴结转移中的诊断价值。方法回顾性分析2001年10月至2015年1月在上海交通大学医学院附属新华医院行肝癌切除＋淋巴结清扫术的14例患者临床资料。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。其中男8例,女6例;年龄36~73岁,中位年龄51岁。14例患者经术前增强扫描检查发现15组淋巴结可疑阳性,根据术后病理学检查分为阳性组（8组）和阴性组（7组）。比较两组淋巴结平扫、动脉期CT值及动脉期CT值变异系数（CV）的差异等,并分析上述指标诊断淋巴结转移的准确率。两组观察指标比较采用t检验,诊断淋巴结转移的准确率分析采用受试者工作特征（ROC）曲线。结果阳性组平扫CT值、动脉期CT值及其CV分别为（30±4）HU、（45±10）HU、（30±10）%,阴性组相应为（43±5）HU、（65±18）HU、（17±6）%,两组差异有统计学意义（t=-5.400,-2.660,2.990;P〈0.05）。ROC曲线分析显示平扫CT值、动脉期CT值及其CV诊断分界值分别为38 HU、54 HU及22%,诊断准确率分别为100%、80%、80%。结论 CT值定量分析对肝癌肝周淋巴结转移具有诊断价值。当肝周淋巴结平扫CT值〈38 HU、动脉期CT值〈54 HU、动脉期CT值CV〉22%时,提示转移可能性大。

青蒿素抑制胆囊癌细胞的迁移侵袭及其机制

目的探讨青蒿素对胆囊癌细胞体外迁移、侵袭能力的影响及其机制。方法20μmol/L青蒿素处理胆囊癌细胞GBC-SD(青蒿素组),同时设立未加青蒿素处理的对照组。采用划痕实验检测胆囊癌细胞迁移能力变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力变化,免疫荧光技术检测细胞形态变化。采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中E-cadherin、Slug、Vimentin、MMP-2、MMP-9等基因的m RNA和蛋白水平变化。两组表达量比较采用t检验。结果划痕24 h青蒿素组划痕宽(393±23)μm,明显大于对照组的(210±15)μm(t=13.415,P<0.05)。青蒿素组GBC-SD穿膜细胞数为(93±8)个,明显少于对照组的(202±14)个(t=-17.037,P<0.05)。青蒿素促使细胞形态从间质型向表皮型转化。青蒿素组GBC-SD细胞的Slug、Vimentin、MMP-2、MMP-9基因的mRNA分别为0.89±0.03、1.35±0.10、3.30±0.13、1.15±0.08,明显低于对照组的2.08±0.12、3.22±0.15、4.72±0.19、1.95±0.15(t=-19.812,-20.775,-12.259,-9.438;P<0.05);而E-cadherin mRNA为2.06±0.08,明显高于对照组的1.03±0.06(t=20.956;P<0.05)。Western blot检测显示青蒿素下调Slug、Vimentin、MMP-2、MMP-9,上调E-cadherin蛋白。结论青蒿素可抑制胆囊癌细胞迁移和侵袭,其作用可能与抑制Slug基因表达逆转上皮间质转化,进而降低MMP表达有关。

基于TNM分期的胆囊癌手术治疗

选择合适的手术方式使病人获得良好预后是目前胆囊癌外科治疗的重要研究方向。具体手术方式应根据胆囊癌分期而定,目前国内外最常用的是TNM分期。对于Tis、T1a期胆囊癌病人行单纯胆囊切除术即可达到治愈目的,T1b、T2、T3、T4N0-1M0期胆囊癌病人可根据术中评估结果采取根治切除术或扩大根治切除术,从而达到R0切除。M1期病人行扩大根治切除手术意义已不大,可采取姑息手术治疗,以改善病人生活质量为目标。