原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白70在肝癌转移亚细胞中表达上调

建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ,从多个差异蛋白质点中选择出 3个在M H74 0 2细胞中表达明显上调的蛋白质点进行ESI QUAD TOF质谱分析 ,并在MSDB公共蛋白数据库中进行同源比较和分析鉴定 .初步确定这 3个蛋白质分别为原肌球蛋白 (tropomyosin) ,波形纤维蛋白 (vimentin)和热休克蛋白 70 (heatshock 70protein ,HSP70 ) .这些蛋白质参与细胞骨架构成、蛋白质折叠和蛋白质相互作用等许多正常生理活动 ,并有报道原肌球蛋白和波形纤维蛋白与肿瘤转移有关 .利用蛋白质组学方法发现 ,在肝癌转移亚细胞M H74 0 2中 ,原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白 70表达明显上调 ,进一步揭示它们在肿瘤转移中具有重要的作用 .

不同转移能力乳腺癌细胞株的差异表达蛋白研究

背景与目的:肿瘤转移相关蛋白在肿瘤细胞转移过程中具有重要作用,本研究在建立高转移潜能乳腺癌细胞株LM-MCF-7的基础上,筛选乳腺癌细胞转移相关蛋白并探讨其功能。方法:应用蛋白质组学和免疫印迹等方法比较和筛选来源相同但具有不同转移能力的乳腺癌细胞株(MCF-7/LM-MCF-7)的蛋白质表达差异。将克隆有存活蛋白(survivin)的真核表达载体pcDNA3-Sur转染至MCF-7细胞,通过“伤口愈合”实验检测存活蛋白对乳腺癌细胞迁移的影响。结果:应用蛋白质组学技术获得8个有意义的蛋白质,分别有参与细胞骨架构成、物质代谢、细胞凋亡、蛋白折叠和蛋白质相互作用等功能。应用免疫印迹方法发现,在MCF-7细胞中nm23、p27表达水平较高,在LM-MCF-7中存活蛋白、肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)和Bcl-2表达水平较高。“伤口愈合”实验显示,存活蛋白过表达可明显增强MCF-7细胞的迁移能力。结论:不同转移能力的乳腺癌细胞株中存在与乳腺癌转移相关的蛋白质,存活蛋白与乳腺癌转移有密切的关系。

Cdk5/p35激酶与肌动蛋白细胞骨架结合关系的鉴定

Cdk5,一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其活性只有通过结合其神经特异性调节亚基才能被激活。p35是Cdk5的两个主要调节亚基之一。尽管Cdk5/p35激酶可以调控神经细胞中肌动蛋白细胞骨架的动态变化,但直到目前为止Cdk5/p35激酶与肌动蛋白细胞骨架的结合关系仍不是很清楚。现利用几种不同的方法对两者的结合关系进行了初步鉴定。目前的试验结果表明在鼠脑组织中肌动蛋白细胞骨架是Cdk5/p35超大蛋白复合体的一个组分,p35可以直接结合纤维状肌动蛋白,这说明在鼠脑组织或神经细胞中Cdk5很有可能是通过p35结合到肌动蛋白细胞骨架上并进一步调控肌动蛋白细胞骨架的动态活动的。

关于收藏文化的探讨

没有广博的知识,相当的修养,是无法从事收藏,尤其是文物收藏的。反过来,在收藏的过程中,又会逐渐培养积累起越来越多的知识和修养。由于收藏的广泛性、持久性和强大的生命力,它早已成为群众文化现象中一个闪耀的亮点,别具特色,不容忽视。

山东奶牛产业将逐粮而建 “一线、一带、若干片”

从山东省畜牧兽医局了解到，山东省将对奶牛产业进行布局，重点布局在粮食优势产区，搞好“一线、一带、若干片”养殖区域建设。 一线，即济青北线高速公路两侧。一带，即沿黄畜牧产业带。东营、滨州、德州、聊城、菏泽5市，是粮食优势产业带，应该发展成奶业优势产业带，黄河三角洲要建成优质乳、肉生产基地。

中心体相关蛋白CDK5RAP2单克隆抗体的制备及其在乳腺癌中的表达

目的通过制备中心体相关蛋白CDK5RAP2的单克隆抗体,检测CDK5RAP2在正常乳腺及乳腺癌中的表达差异,为进一步研究CDK5RAP2在乳腺癌发生、发展中的作用提供依据。方法采用传统的杂交瘤方法制备CDK5RAP2的单克隆抗体,通过敲除CDK5RAP2的细胞模型进行免疫荧光检测,验证其特异性。选取正常乳腺、导管内癌和浸润性导管癌3组标本各30例,用制备的单克隆抗体进行免疫组化检测。结果得到一株CDK5RAP2单克隆抗体(5F6),亚型为IgG1,用免疫荧光检测确证其特异性。免疫组化检测CDK5RAP2的表达显示浸润性导管癌和导管内癌之间无明显的差别,但是两组均明显高于正常乳腺组(P<0.001)。结论乳腺正常组织不表达或低表达CDK5RAP2,而乳腺癌组织中该蛋白的表达率明显增高,提示CDK5RAP2可能成为乳腺癌诊治的新型标志物。