日本沼虾桩蛋白基因的克隆与镉胁迫对其表达的影响

镉(Cd)是蓄积性和毒性较强的生物非必需重金属元素之一,会对水生生物造成较大的危害。为更好地了解镉对日本沼虾的分子毒性作用,为水环境镉污染的生态风险预警和评估提供生物标志物,克隆了日本沼虾(Macrobrachium nipponenes)桩蛋白(paxillin)基因MnPXN,并检测了镉胁迫对其表达的影响。MnPXN基因全长为3655 bp,包含1491 bp的编码区,编码496个氨基酸;MnPXN蛋白具有6个低复杂区域和3个保守的LIM结构域,与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)聚成一支,与家蚕(Bombyx mori)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum)等昆虫的亲缘关系较近,与线虫(Nematoda)亲缘关系最远。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,MnPXN在日本沼虾的肝胰腺、胃、鳃中表达水平较高,在心脏和肌肉中表达水平较低。在0.2427 mg·L^(-1)CdCl_(2)中暴露24 h,肝胰腺中MnPXN基因表达水平较对照组均显著升高,0.0200 mg·L^(-1)CdCl_(2)胁迫6 h后MnPXN基因表达水平显著升高,24 h表达量达到最大值,96 h恢复至起始水平。RNA干扰能显著(P<0.05)降低MnPXN在肝胰腺中的表达水平,显著(P<0.001)增加日本沼虾的死亡率,表明MnPXN基因能够降低镉胁迫对日本沼虾的毒性作用,其作用机理尚需进一步研究。

中华鳖诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达分析

一氧化氮(NO)参与生物体内多种重要的生理病理活动,可增强机体的免疫功能,而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是一氧化氮合成过程中的关键限速酶。为了探明iNOS在中华鳖(Pelodiscus sinensis)先天免疫中的作用,研究了iNOS基因在中华鳖组织的分布及外源刺激物对其基因和蛋白表达的影响。荧光定量PCR结果显示,iNOS基因在中华鳖的心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肌肉、小肠和大肠中均有表达,其中在大肠中表达量最高,其次是小肠、肾脏和脾脏。在受脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激后,肝、脾、肾、肌肉和小肠iNOS mRNA的表达显著升高。免疫组化实验结果显示LPS刺激后12 h、24 h iNOS蛋白在小肠、脾脏表达水平显著高于生理盐水对照组。研究结果表明iNOS可能参与了中华鳖的机体免疫反应。

基于点云数据的曲面重构方法研究

点云数据的曲面重构是逆向工程的关键技术。本文在分析现有重构方法局限性的基础上，提出了一种以边界为中心的新方法。这种方法重构出的曲面间具有内置连续性。