《食品安全检测技术》微生物检验实验教学的探索与实践

《食品安全检测技术》是我国新增食品质量与安全专业的核心课程,其主要特点是涉及学科众多,内容广泛,是一门综合性和实践操作性很强的学科,整个课程学习以实验教学贯穿始终。为适应高等教育发展的要求,培养更多高素质的食品卫士,在参照相近学科专业教学模式的基础上,对该门课程中微生物学部分的实验教学进行了探索和尝试。通过这些教学改革与尝试,使学生对专业知识的掌握更加牢固,取得了非常好的教学效果。

武汉市6起食物中毒副溶血弧菌分子特征研究

目的:了解武汉地区6起食物中毒病原菌副溶血弧菌分子特征。方法:对6起食物中毒共16株分离株进行药敏分析,运用PCR技术进行耐热性溶血毒素基因(tdh)和耐热性溶血毒素相关溶血素基因(trh)检测,并进行肠道细菌重复基因间共同序列PCR(ER IC-PCR)分析。结果:16株副溶血弧菌对第三代头孢和喹诺酮类较敏感,tdh阳性,trh阴性,ER IC-PCR结果显示每起食物中毒菌株亲缘关系非常紧密,有3起属于同一个群,另外2起属于一个群。结论:武汉地区流行的主要副溶血弧菌分子特征为tdh阳性,trh阴性,ER IC-PCR技术是分析副溶血弧菌引起食物中毒菌株非常有效的工具。

脉冲电泳技术(PFGE)及其在食用菌中的应用

脉冲电泳技术（ＰＦＧＥ）及其在食用菌中的应用齐小保吕作舟（华中农业大学应用真菌室武汉４３００７０）脉冲电泳技术是新近出现适用于丝状真菌的一门新技术，它广泛应用于基础理论研究和应用研究。１脉冲电泳的原理ＤＮＡ分子的常规凝胶（如琼脂糖、聚丙烯酰氨）电泳分...

自主驱动 探究为先——创新性实验教学的探索与实践

创新性实验教学摒弃了以验证性为主题,依附于理论教学的传统教学模式,对于学生创新能力的培养具有重大意义。本文结合创新性实验项目教学的实践和探索,将以学生为主体与探究式学习有机结合,提出在创新性实验教学改革中应该做到:以学生为中心,突出创新实验的自主性;强化教师的指导作用,引导学生进行探究学习;以自主为基础,促进学生自主探索和教师科学指导的有机统一。

5种鲜切藕片胀袋微生物的分离与鉴定

为解决真空包装鲜切藕片的胀袋问题,本实验对鲜切藕片胀袋主要微生物的种类进行研究,分离出5种优势微生物,并利用VITEK 2 Compact全自动快速微生物鉴定智能分析系统进行鉴定。得到2株细菌,分别为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、蜡样芽孢杆菌(Bacilllus cereus Frankland&Frankland);3株酵母菌,分别为季也蒙假丝酵母(Candida guilliermondii)、无名假丝酵母(Candida famate)和葡萄牙假丝酵母(Candida iusitaniae)。

生鲜肉中肠炎沙门菌分子生物学特征分析

目的了解生鲜肉类中肠炎沙门菌耐药性及基因变异情况。方法药敏试验采用K-B法,用碱裂解法提取细菌的质粒DNA,采用肠杆菌重复基因间隔重复共有序列(ERIC-PCR)技术对10株肠炎沙门菌进行基因分析,运用NTSYS-PC2.0软件进行同源性比较,聚类分析。结果药敏呈现出多重耐药;基因谱系与聚类分析可将菌株分为3大类,扩增片段长度为250bp～2000bp,在85%的同源度上可分为A、B、C等3个型,其中A型2株,B型6株,C型2株。结论生鲜肉中肠炎沙门菌耐药情况比较普遍,10株肠炎沙门菌基因变异较小,ERIC-PCR技术是分析、鉴定肠炎沙门菌,追溯食物中肠炎沙门菌的有用和可行的工具。

食品质量与安全本科专业实践教学的思考和探索

从认知教学、案例教学、实验教学、优生导师制培养和社会实践等方面,阐述了食品质量与安全本科专业的实践教学改革。实践教学效果明显,学生的学习热情提高,分析问题的能力增强,动手能力得到提升,科研产出增多和融入社会的能力加强。

大学生创新性实验探析

实践性教学是高等院校特别是理工科专业的重要教学环节,在培养大学生创新意识、创新精神和创新能力方面具有不可替代的作用。通过参加高等院校食堂安全卫生调查及对策研究的大学生创新实验,深切地感受到创新性实验的完成与教师的悉心指导、团队的合作密切相关,并在创新能力、动手能力、交际能力等方面得到提高,对影响食品安全的危险性分析有了更进一步的认识。

谈如何开展大学生创新性实验教学项目的研究 “高等院校大学生食堂食品安全与卫生的调查及对策研究”

通过大学生创新性实验教学项目"高等院校大学生食堂食品安全与卫生的调查及对策研究"的研究,从学校的重视与宣传、教师的选题与特点、学生的兴趣与创新以及教师的适时演示与指导4个方面详细地阐述了如何开展大学生创新性实验教学项目以培养提高大学生的创新意识和科研能力的方法。

臭氧和负离子对镰刀菌M4抑制作用及其机理的初步研究

为了探究臭氧和负离子对莲藕采后主要腐败菌-镰刀菌M4的生长及细胞壁、细胞膜的影响,本试验对处于稳定期的镰刀菌M4分别进行不同条件的臭氧和负离子处理,通过测定抑菌率、细胞壁和细胞膜通透性初步研究臭氧和负离子对镰刀菌M4的抑制作用及其机理。结果显示,臭氧、负离子对镰刀菌M4均有较强的抑制作用,抑菌率与处理时间成正相关;臭氧和负离子之间具有协同作用;臭氧+负离子处理对镰刀菌M4的细胞壁和细胞膜均有显著的破坏作用,破坏程度随处理时间的延长而增加;处理前期主要是电解质的渗出,处理2 h及以上时核酸和蛋白质等大分子物质开始渗出。

大学生创新性实验的教学实践与探索——以高校食堂食品安全与卫生评价为例

以"高等院校食堂食品安全与卫生的评价"为实例,阐明了此次创新性实验的要点和体会,并分析了教师和学校在创新性实验中所起的独特作用。通过以学生主体参与,教师辅助指导,以创新性实验为载体,激发了学生的学习兴趣、动手能力和创新精神,极大地提升了学生的实践技能,团结协作协同创新能力和分析解决问题的能力。

快餐式“串串香”食品微生物检测分析

为了解快餐式"串串香"的微生物污染状况,随机抽取大型餐厅、小型摊点各5大类共70份"串串香"食品,按照国家标准检测样品菌落总数、大肠菌群、丝状真菌和酵母菌,并用Filmplate测试片法检测同一样品的沙门菌.结果表明:在检测的70份样品中,菌落总数合格率为74.3%.在2类经营场所中水产品类、蔬菜类及蛋类样品的合格率均低于80%,且小型摊点出售的水产品类样品菌落总数合格率仅有50%;小型摊点样品大肠菌群超标率达10%.丝状真菌及酵母菌检测结果表明:在大型餐厅和小型摊点2类经营场所中蔬菜类"串串香"食品丝状真菌及酵母菌污染率分别为37.5%和50%,豆制品类的合格率也仅为75%和66.7%;且小型摊点售卖的5类食品均存在不同程度的丝状真菌污染.说明快餐式"串串香"食品微生物污染严重,对消费者健康存在潜在的危险,尤其是小型摊点的"串串香"食品卫生状况较大型经营餐厅更为突出,应加强监督与指导.

比较传统老面中戊糖片球菌的代谢活性与亲缘关系

本研究主要目的探究传统老面中戊糖片球菌的分子特性。8株戊糖片球菌分离自中国中北部不同老面,比较它们发酵葡萄糖产酸的能力,利用脱脂乳分离培养基探究戊糖片球菌产蛋白酶的能力,使用沉淀蛋白法提取胞外分泌蛋白并进行蛋白凝胶电泳分析胞外分泌蛋白,使用Folin-酚法比较不同戊糖片球菌蛋白酶活力。结果表明8株戊糖片球菌均有代谢葡萄糖产酸的能力,其中P.P005能力最佳,经过发酵p H值降低0.41;8株戊糖片球菌均可产生明显水解圈,均具有产蛋白酶的能力;胞外蛋白结果显示P.P002菌株和P.P008菌株分泌蛋白浓度最大,最高酶活力在1057.27~1242.56U/m L之间,在各自最适条件下,产蛋白酶活力从大到小依次是P.P002、P.P001、P.P005、P.P006、P.P003、P.P008、P.P007、P.P004;ERIC-PCR分析亲缘关系分析显示所有的菌株的相似度都在86%以上。本研究为探究传统老面中戊糖片球菌发挥的作用奠定了分子研究的基础。

武汉市2002～2003年大肠埃希菌O157∶H7监测情况

目的 了解武汉市大肠埃希菌O15 7∶H 7在腹泻病人中的检出情况和宿主动物带菌及毒力基因情况。方法根据广覆盖的原则 ,选择 8家大型综合医院作为O15 7∶H7监测点 ,监测腹泻病人的带菌情况 ;其中 2家医院的肾病内科监测可疑肾衰病人 ,选择 3家养殖场 ,采集猪、奶牛、鸡的粪便标本 ,采集生猪肉、奶制品等 ,用mEC培养基进行病原菌分离培养 ,用“金卡”作初筛 ,用聚合酶链反应 (PCR)进行毒力基因分析。结果 8家监测点共监测腹泻病人 85 8例 ,肾病内科肾衰病人 6例 ,未检出大肠埃希菌O15 7∶H7或O15 7∶H-;3个宿主动物监测点共采集奶牛、猪、鸡的粪便标本 3 18份 ,检出大肠埃希菌O15 7∶H-8株 ,带菌率为 2 .5 2 % ,其中猪的带菌率最高为 5 .88% ,奶牛为 1.96% ,鸡未检出 ;食品类生猪肉中检出 1株O15 7∶H-,检出率为 1.0 0 % ;对 9株菌株进行O抗原PCR和H抗原PCR鉴定 ,O抗原均为阳性 ,H抗原为阴性 ;单克隆血清抗体 6株阳性 ;并进行毒力基因鉴定 ,均为阴性。结论 武汉市到目前为止尚未发现O15 7∶H7病人 ,猪和奶牛是主要宿主 ,其带菌率没有明显差异 ,生猪带菌率有明显的上升 ,且从生猪肉中检出 1株O15 7∶H-,尚未检出带病毒基因的菌株 ;而武汉市居民以食用猪肉为主 ,值得密切关注。

中央空调冷却塔水中嗜肺军团菌的调查

目的了解医院、宾馆空调冷却塔水中军团菌污染情况。方法于2001年8月采集W市2家宾馆和4家医院的中央空调冷却塔水样,过滤空调冷却塔水的滤膜经盐酸处理后其处理液接种于GVPC平板,烛缸培养后选取可疑菌落进行生化试验、血清学试验并以PCR方法鉴定。结果W市2家医院及1家星级宾馆的中央空调冷却塔水中分离到5株军团菌,3株为嗜肺军团菌血清1型(Lp1),2株为嗜肺军团菌血清5型(Lp5)。结论应加强对医院、宾馆空调冷却塔水中军团菌的监测。

湖北省首次分离出肠出血性大肠埃希菌O157∶H7

目的 :为了解肠出血性大肠埃希菌O15 7∶H7(EHECO15 7∶H 7)在我省的动物宿主种类和菌型特征 ,制定相应流行病防治对策。方法 :采用传统方法 ,在 6～ 10月份肠道传染病高发季节 ,对武汉市 3大养殖场、屠宰场的肉猪、奶牛及武汉 7大城区的农贸商场的水产品进行调查采样 ,共采集 811份样品 ,进行EHECO15 7∶H7检测。结果 :341份猪粪样品中检出 1株EHECO15 7∶H7,阳性率为 0 .2 9% ;2 5 5份奶牛粪便样品中检出 7株EHECO15 7∶H7,阳性率为2 .75 % ;其他类标本中未检出。分离的这 8株阳性菌株与传统的EHECO15 7∶H7存在许多不同之处 ,它们均发酵山梨醇 ,大部分菌株不分解棉子糖 ,也存在不分解卫茅醇的菌株 ,而 β -葡萄糖醛酸酶试验均为阳性。在致病因子上 ,检测现有的几种毒力基因均为阴性。结论 :在我省首次检出 8株EHECO15 7∶H7,说明其普遍存在于动物体内 ,对环境、食品构成较大威胁。

便隐血“速而准”酶联免疫法与邻甲苯胺法对比分析

对８６例病人大便以及６种动物血、ＶｉｔＣ、铁剂分别采用“速而准”酶联免疫法与邻甲苯胺法的隐血试验，进行特异性、灵敏度、抗干扰对比分析，结果显示“速而准”特异性强、灵敏度高，不受食物、药物的限制及干扰。