杂交枫香胚性愈伤组织遗传转化体系研究

【目的】杂交枫香是我国重要的用材和观赏树种资源,但其遗传转化体系尚未建立。建立杂交枫香遗传转化体系为杂交枫香性状改良和基因功能研究提供了方法。【方法】本研究基于杂交枫香高效的体细胞胚胎发生技术,用根癌农杆菌介导的遗传转化法对其胚性愈伤组织进行遗传转化,对潮霉素选择压、菌液浓度、侵染时间、共培养时间、以及共培养温度等影响因素采用正交试验等设计进行了研究。【结果】潮霉素对胚性愈伤组织的最小致死质量浓度为10 mg/L;获得最多Gus阳性斑点数的组合的菌液OD600为0.8,共培养时间为3 d,侵染时间为10 min,共培养温度为25℃;获得最多转基因阳性愈伤组织的组合的菌液OD600为0.2,共培养时间为2 d,侵染时间为10 min,共培养温度为23℃;且通过极差分析,最优处理组合的共培养时间为2 d,菌液OD600为0.2,侵染时间为20 min,共培养温度为23℃。【结论】经分子鉴定,共获得210个转基因阳性愈伤组织,初步建立了农杆菌介导的杂交枫香遗传转化体系,为阔叶树种愈伤组织的遗传转化提供了更多的可行性依据。

油松胚性愈伤组织成熟培养的影响因素

以油松的胚性愈伤组织为材料,利用单因素试验设计探究ABA质量浓度、PEG质量浓度、植物凝胶质量浓度、糖的种类和其质量浓度对油松体细胞胚成熟率的影响;在此基础上采用正交试验筛选出最佳培养条件。单因素试验结果表明,成熟培养基中ABA质量浓度14~18 mg·L^-1、PEG质量浓度50~100 g·L^-1、植物凝胶质量浓度2.5~5.0 g·L^-1、麦芽糖和蔗糖质量浓度组合(15+25)g·L^-1时,体细胞胚的成熟效率较高;正交试验结果表明,成熟培养基中ABA质量浓度16 mg·L^-1、PEG质量浓度75 g·L^-1、植物凝胶质量浓度5 g·L^-1、麦芽糖和蔗糖质量浓度(10+30)g·L^-1时,油松体细胞胚的成熟效率提高了0.8倍。

华北落叶松全分布区天然群体的球果变异分析研究

华北落叶松是华北地区重要的生态和造林树种,对其球果表型的研究,对指导良种生产和生态适应性研究具有重要意义。本研究对采自华北落叶松全分布区13个天然群体的7800个球果的12个表型数据进行分析。结果表明,华北落叶松球果表型存在广泛的遗传变异,群体内(45.3%)变异大于群体间(12.38%)的变异。球果质量的变异系数最大,在整个群体中变异幅度高,可育种鳞率的变异系数最小。球果的质量与经度表现出极显著的负相关性,球果长、总种鳞数和高径比与经度呈现显著负相关,质量与纬度也有显著的负相关。主成分分析表明,前4个主成分对总变量累计贡献率为84.7%。通过欧氏距离聚类分析,可将13个群体划分为3个类群。相关性分析表明,基于表型的欧氏距离和地理距离不存在显著的相关性,r值较小。本研究对华北落叶松优良遗传资源收集和利用具有一定的指导意义,为今后的良种生产实践提供了理论支持。