机械挤压对大鼠血管内皮细胞一氧化氮合酶表达的调节作用

目的 :探讨机械挤压大鼠腿部致微循环改变与一氧化氮合酶 (NOS)表达之间的关系。方法 :采用间歇性气囊挤压袋 (IPC)挤压大鼠腿部。将 2 5只雄性SD大鼠随机分为 4个IPC实验组和 3个模拟组 ,4个IPC组分别挤压 0 .5、1、 5h和挤压 1h再等待 4h,3个模拟实验组处理方法与IPC组相同但不挤压。应用RT PCR、WestenrBlot和免疫组化方法检测了IPC作用前后 ,挤压部位的肌肉———胫前肌 (AT)和未挤压部位的肌肉———提睾肌 (CM)中内皮细胞型一氧化氮合酶 (eNOS)的表达。结果 :在IPC作用的不同时间段上 ,eNOSmRNA和蛋白在AT和CM中均有显著上升 ,在IPC作用 1h ,然后再等待 4h的实验组中 ,eNOSmRNA和蛋白又恢复至正常对照水平。结论 :IPC产生的机械压力增加了血管内皮细胞的剪切力 ,刺激该细胞NOS合成增加 ,进而增加了NO产物的释放量 ,使血管扩张 ,改善了局部微循环。

间歇性气囊挤压大鼠腿部对挤压部位和远端骨骼肌一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的 :为了进一步了解间歇性气囊挤压法 ( Intermittent pneumatic compression,IPC)挤压大鼠腿部与一氧化氮 ( NO)的关系。方法 :检测了大鼠骨骼肌中 3种一氧化氮合酶 ( NOS)同工酶 :神经型 NOS( n NOS) ;诱导型 NOS( i NOS)和内皮细胞型 NOS( e NOS) m RNA在 IPC作用后的表达变化。 2 5只 SD大鼠被随机分为 3个模拟实验组和 4个 IPC实验组。每只鼠取右侧胫前肌( AT)和提睾肌 ( CM)作为正常对照。 IPC组挤压 0 .5 ,1,和 5 h,及挤压 5 h加等待 4h,模拟实验组除不挤压外 ,其他操作均与实验组相同 ,然后分离左侧 AT和 CM作为处理后样品。所有样品应用 RT-PCR进行 NOS m RNA测定。以样品中看家基因 2 ,3 -二羟基丙醛 -3 -磷酸脱氢酶 ( GAPHD) c DNA为内参 ,与 NOS c DNA共同扩增。 PCR产物电泳条带密度用 NIH图像分析软件定量 ,并以与正常对照的对比值作为变化比率。结果 :在 IPC作用 0 .5、1和 5 h后 ,e NOSm RNA显著上升 ,在 AT中分别达到正常对照的 1.2 ,1.8和2 .6倍 ;在 CM中分别达到 1.2 ,1.8和 2 .7倍 ,而其他 NOS,除 5 h IPC组的 n NOS外 ,总体表现下调。在 IPC作用 1h加等待 4h组中 ,e NOS m RNA回复至正常对照水平。结论 :该结果证实了 IPC产生的机械压力至少部分增加了血管壁的剪切压 ,使内皮细?