泡球蚴组织体外培养的生长发育观察

目的观察体外培养泡球蚴的生长发育特性。方法在肝癌细胞系条件下体外培养泡球蚴,用光学显微镜定期观察其数量、大小及形态变化,并绘制囊泡生长曲线。用电子显微镜观察囊泡形态结构。结果体外培养后泡球蚴增多,至22 d其数量相当于开始培养第3～4天的6～7倍;囊泡具有出芽生殖能力。起初均为小囊泡,随时间增加,囊泡的直径也增加,在第22天时约30％为大的囊泡,70％为小的囊泡。发现介于原头蚴与囊泡之间的形态。结论肝癌细胞系体外培养的泡球蚴,生长发育较好且数量增加,可获得纯度较高的分泌或排泄抗原,该方法可为泡球蚴生物学及相关实验研究提供充分实验材料。

2型糖尿病听力损害患者与AGEs及APN的相关性研究

目的研究2型糖尿病听力损害患者与晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)及脂联素(adiponectin,APN)的浓度之间的相互作用关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清AGEs和APN的含量。实验组为糖尿病患者104例,其中糖尿病伴有听力损害者49例(A组),糖尿病不伴有听力损害患者55例(B组);对照组为47例健康者(C组)。结果 3组受检者体重指数(BMI)、总胆固醇(TC)水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2小时血糖(2hPG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三脂(TG)、AGEs、APN水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与C组相比,A组及B组FPG、HbA1c、2hPG、LDL-C、TG、AGEs水平均明显升高,HDL-C、APN均明显降低(P<0.05);与B组相比,A组AGEs水平升高,APN水平降低(P<0.05);在糖尿病听力损害患者中,AGEs与FPG、2hPG、LDL-C、HbA1c、糖尿病病程、听力平均值均呈正相关(P<0.05)。APN与BMI、FPG、2hPG、HbA1c、糖尿病病程、听力平均值均呈负相关,与HDL-C呈正相关(P<0.05)。结论血清AGEs、APN与2型糖尿病听力损害的发生及发展具有相关性。临床上AGEs、APN可作为早期评估糖尿病听力损害及预测其预后的参考指标。

点免疫金渗滤法筛选胶体金标记抗人IgG的研究

目的:应用点免疫金渗滤法筛选适宜胶体金标记的抗人IgG(以下简称二抗),并运用多个评价指标进行比较和分析。方法:选择三个不同公司的二抗用胶体金标记,根据棋盘滴定法确定最佳标记条件;运用点免疫金渗滤法对三种二抗的胶体金标记后检测效能进行比较,采用包虫病人和健康对照血清,用包虫病特异性抗原检测包虫病患者血清中的特异性抗体,评价最优的二抗,并与酶联免疫吸附测定法进行比较。结果:A、B、C三种二抗标记的最佳标记条件为:p H均为8.5,加入量分别为38.4、24、19.2μg/ml,综合评价二抗B检测效能最优。将其与酶联免疫吸附测定法检测效能进行比较,两种方法检测结果的Kappa=0.895(P<0.05),吻合度较强。结论:应用点免疫金渗滤法,以及本文提出的评价指标,能够筛选出最佳二抗,对检测试剂盒中二抗的选择具有重要的参考价值。

雌酮人工抗原的制备与鉴定

目的制备雌酮人工抗原。方法采用碳化二亚胺法将雌酮半抗原与载体蛋白牛血清清蛋白连接制备免疫耦联物,用紫外分光光度法测定耦联率,并测定兔抗体血清效价。结果测得耦联率比为12:1,血清抗体效价为6.4×103。结论该方法简便、结果准确可靠,可应用于雌酮免疫原合成。

甾体激素人工抗原合成概况

目的介绍运用免疫学方法分析甾体激素时,人工抗原合成的设计及合成方法、合成的影响因素、与载体蛋白偶联方法及最佳结合比的研究概况。方法查阅国内外文献资料,整理、归纳甾体激素化合物人工抗原合成的研究情况。结果与结论甾体激素合成是小分子药物免疫学检测的基础,将直接影响抗体的特异性和亲和性,对建立甾体激素化合物灵敏、简便、快速的、超微量的免疫检测法非常关键。

巢式PCR在鉴别多房棘球绦虫及细粒棘球绦虫基因亚型中的应用

目的探索巢式PCR在鉴别多房棘球绦虫及细粒棘球绦虫基因亚型中的应用价值。方法将水泡带绦虫、犬弓首蛔虫、多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫羊株和骆驼株等样本的DNA用巢式PCR扩增。结果巢式PCR可以扩增出多房棘球绦虫和水泡带绦虫,而对细粒棘球绦虫羊株和骆驼株及其他寄生虫均不能扩增出。结论在鉴别细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫方面,巢式PCR有一定的诊断意义,但不能用于鉴别细粒棘球绦虫基因亚型。

单核细胞源性巨噬细胞MAC387对肝泡型包虫病患者肝脏炎症与纤维化的作用

目的通过检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织(CLT组)与远端对照肝组织(DLT组)。通过HE染色和天狼星红染色分别评估患者肝组织病理学炎症改变及胶原沉积,并对CLT组进行炎症分级评分和纤维化分期评分;用免疫组织化学实验分别检测CLT组和DLT组MAC387的阳性表达,并将AE患者分为MAC387高水平组和MAC387低水平组,分析临床主要肝功能生化指标的相关性及手术前后各指标的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组肝组织MAC387mRNA的表达。结果与DLT组相比,CLT组肝脏中MAC387显著增加(P<0.001)。此外,与炎症分级评分和纤维化分期评分较低的患者相比,炎症分级评分和纤维化分期评分较高的患者肝脏中MAC387浸润更多(P<0.001),且MAC387高水平组与ALT、AST呈正相关(ALT:r=0.523,P=0.013;AST:r=0.503,P=0.017),与GGT、ALP、Alb无显著相关性(均P>0.05),MAC387低水平组与ALT、AST、GGT、ALP、Alb均无相关性(均P>0.05)。术后第9天,MAC387低水平组的GGT水平高于MAC387高水平组,且差异有统计学意义(P<0.05)。CLT组MAC387mRNA表达显著高于DLT组(P<0.05)。结论MAC387在肝泡型包虫病患者肝组织中高表达,并且在炎症分级评分和纤维化分期评分较高患者中浸润增加,提示可能在加重AE的肝脏炎症和纤维化中发挥作用。

孕马尿中雌酮硫酸钠单克隆抗体的研制

目的建立雌酮硫酸钠(ESS)单克隆抗体的制备方法。方法以ESS为抗原免疫Balb/c小鼠,筛选小鼠免疫方法,并通过方阵滴定法确定间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法;再以杂交瘤抗体技术获得抗ESS单克隆抗体细胞株。结果 ESS抗原5次以初次免疫200μg,加强免疫100μg的免疫剂量多点注射小鼠背部皮下免疫为小鼠最佳免疫方法;确定10μg·L-1为抗原包被浓度,1∶2 000的一抗血清稀释倍数;细胞融合率达90.2%,ELISA法筛选阳性率为4.4%,并筛选得到两株特异性较好的细胞株2C8和8A7。结论该研究筛选建立了ESS小鼠免疫方法及灵敏度高、特异性好的间接ELISA筛选体系,可用于ESS单克隆抗体的制备及检测,且建立了ESS单克隆抗体制备方法。

包虫囊液干预的肝细胞Foxp3与IFITM3表达变化及其与干扰素刺激蛋白相关性分析

目的观察包虫囊液干预的肝细胞核转录因子Foxp3、干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)表达变化并分析其与干扰素刺激蛋白IFITM1、IFITM2、IFIT3、ISG15的相关性。方法从包虫病羊肝脏包囊中抽取囊液,将人肝癌细胞HepG2分为高浓度组、中浓度组、低浓度组及对照组,分别加入1∶10、1∶100和1∶1000浓度比例的囊液及不加囊液,采用Western blotting法及荧光定量PCR法检测各组干预后及低浓度组在干预后0、12、24、36、48、60、72 h细胞中的Foxp3、IFITM3及相关干扰素刺激蛋白IFITM1、IFITM2、IFIT3、ISG15蛋白及mRNA表达,采用Spearman分析Foxp3、IFITM3与IFITM1、IFITM2、IFIT3、ISG15的相关性。结果不同囊液浓度干预下,IFITM1、IFITM2、IFITM3、Foxp3、ISG15蛋白及mRNA表达随着干预囊液浓度降低逐渐升高,IFIT3蛋白表达中浓度组>低浓度组、高浓度组(P均<0.05),IFIT3 mRNA高、中、低浓度组差异无统计学意义。低囊液浓度干预下各时点IFITM1、IFITM2、IFIT3蛋白表达随囊液干预时间延长而降低,IFITM3、ISG15蛋白表达随囊液干预时间延长先升高后降低,Foxp3蛋白表达随囊液干预时间延长而升高;IFITM2、IFIT3、ISG15 mRNA表达随囊液干预时间延长而降低,IFITM3、IFITM1 mRNA表达随囊液干预时间延长先升高后降低,Foxp3 mRNA表达随囊液干预时间延长而升高。Spearman相关分析结果显示,不同囊液浓度干预下Foxp3表达与IFITM3表达呈正相关(P=0.004);Foxp3 mRNA、IFITM3蛋白及mRNA表达与IFITM1、IFITM2、ISG15 mRNA表达均呈正相关(P均<0.05),与IFIT3 mRNA表达无相关性;Foxp3蛋白表达与IFITM1、ISG15蛋白表达呈正相关(P均<0.05),与IFITM2和IFIT3蛋白表达无相关性。低囊液浓度干预下各时点Foxp3表达与IFITM3表达呈负相关(P均<0.05);Foxp3表达与IFITM1、IFITM2、IFIT3、ISG15表达呈负相关;IFITM3表达与IFITM1、IFITM2、IFIT3、ISG15表达呈正相关(P均<0.05)。结论在低浓度包虫囊液干预下,HepG2细胞IFITM1、IFITM2、IFITM3、Foxp3及ISG15表达升高,且Foxp3表达与IFITM3表达呈正相关;随着囊液干预时间的延长,HepG2细胞IFITM1、IFITM2、IFITM3、IFIT3、ISG15表达降低、Foxp3的表达升高,且Foxp3表达与IFITM3表达呈负相关。

包虫囊液对干扰素信号TRIF/IFITM3通路的影响

目的 探索包虫囊液干预人源肝细胞(L02)过程中TRIF/IFITM3通路相关蛋白的变化。方法 从感染细粒棘球蚴病的羊肝中获取囊液,用不同比例囊液浓度(1∶10、1∶100和1∶1000)干预肝细胞并设置阴性对照组(未加囊液干预)。采用囊液浓度(1∶1000)干预肝细胞后分别在0、24、48和72 h收集细胞。实时荧光定量PCR检测TRIF/IFITM3通路相关mRNA的表达,Western blot检测TRIF、IRF3、IFITM3、Foxp3的蛋白表达变化。免疫荧光检测IFITM3、Foxp3的表达和定位。Spearman分析TRIF、IFITM3及Foxp3的相关性。结果 Western blot显示囊液浓度(1∶1000)促进TRIF、IRF3、IFITM3蛋白表达,TRIF的相对表达量分别是(0.45±0.09)、(0.54±0.05)、(1.08±0.24)、(1.75±0.31);IFITM3的相对表达量分别是(1.02±0.41)、(1.00±0.16)、(1.24±0.12)、(1.84±0.20)。囊液浓度(1∶1000)刺激肝细胞0、24、48和72 h后,Western blot显示TRIF、IRF3、IFITM3蛋白表达量逐渐下降,而Foxp3表达量增高。TRIF的相对表达量分别是(1.00±0.31)、(1.08±0.19)、(0.90±0.13)、(0.57±0.05);IFITM3的相对表达量分别是(0.80±0.26)、(0.94±0.09)、(0.82±0.19)、(0.54±0.18)。Foxp3的相对表达量分别是(0.70±0.11)、(0.80±0.02)、(0.83±0.03)、(1.08±0.04)。免疫荧光显示,在泡球蚴感染60 d时,小鼠肝脏IFITM3和Foxp3发生共定位。Spearman分析TRIF与IFITM3存在正相关性(r=0.704,P<0.01),TRIF与Foxp3存在负相关性(r=-0.859,P<0.01),IFITM3与Foxp3存在负相关性(r=-0.686,P<0.01)。结论 较低浓度的包虫囊液刺激TRIF/IFITM3通路相关分子表达,进而激活天然免疫的抗病原体功能;随着囊液干预时间增加TRIF/IFITM3受抑制,而Foxp3高表达,促进包虫在宿主体内慢性寄生。

泡球蚴感染小鼠肝脏自噬相关蛋白的表达及其与纤维化关系的研究

目的 通过观察泡球蚴感染不同阶段小鼠肝脏纤维化情况与自噬相关蛋白表达情况,分析在泡球蚴感染中自噬与肝纤维化的关系。方法 取雌性BALB/c小鼠45只,随机分为模型组(30只)与对照组(15只)。模型组小鼠感染泡球蚴,并分别于感染8、30、60、90、180 d处死,通过HE染色观察小鼠肝脏的组织病理学变化,Masson染色观察小鼠肝脏胶原纤维变化,免疫组化法检测肝脏中Atg5、LC3与α-SMA蛋白的表达情况,qRT-PCR检测肝脏中Atg5、LC3、α-SMA mRNA表达水平。结果 模型组小鼠感染泡球蚴8~90 d, Atg5、LC3、α-SMA蛋白及其mRNA表达逐渐增加,其中感染30~90 d时与对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05);感染180d时Atg5、LC3表达量较之前减低,而α-SMA表达量继续增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 泡球蚴感染早、中期小鼠肝脏自噬相关蛋白高表达,可能促进肝星状细胞活化。

新疆和布克赛尔蒙古自治县棘球蚴病感染现况及相关危险因素分析

目的 调查新疆和布克赛尔蒙古自治县（简称和丰县）棘球蚴病感染流行现状并进行相关危险因素分析.方法 2013年,在和丰县5个乡（牧场）,采用整群随机抽样方法,抽取532人进行一般情况调查、B超肝脏扫描及血清学抗体检查;剖检38只犬;另入户收集126份犬粪样本.采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测粪抗原,同时对犬主人进行问卷调查.采用SAS JMP软件进行数据统计分析,并进行多因素Logistic回归分析.结果 人群棘球蚴病检出率为4.70％（25/532）,其中细粒和多房棘球蚴病检出率分别为4.32％（23/532）和0.38％（2/532）.血清总阳性率为25.46％（125/491）,其中41 ～ 65岁人群阳性率（30.70％,66/215）高于0～17岁人群（8.33％,5/60,P＜0.05）;女性阳性率（30.19％,93/308）高于男性（17.48％,32/183,P＜0.05）;蒙古族阳性率（29.08％,107/368）高于汉族（13.79％,4/29,P＜0.05）;牧民阳性率（32.77％,58/177）高于学生（4.17％,2/48,P＜0.05）;那仁和布克牧场阳性率（36.96％,61/165）高于巴音敖瓦乡（7.69％,6/78,P＜ 0.05）.剖检的38只犬中,有16只感染棘球绦虫.犬粪抗原阳性率为39.68％（50/126）,其中那仁和布克牧场阳性率（48.78％,20/41）与查和特乡（20.00％,4/20）比较有增高趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）.问卷调查显示,126只犬总体平均驱虫率只有49.20％（62/126）.多因素Logistic回归分析显示,性别、地区、职业是人群棘球蚴病的影响因素.结论 新疆和丰县人群棘球蚴病检出率和血清阳性率较高;性别、地区、职业可能是人群棘球蚴病主要的危险因素.

Smad4在肝泡状棘球蚴病小鼠中的表达及其意义

目的探讨细胞质信息传递介质Smad4在小鼠肝泡状棘球蚴病灶周围的表达及其意义。方法16只小鼠按随机数字表法分为受试组（人工接种肝泡状棘球蚴）和对照组（注射生理盐水），每组8只。应用免疫组织化学方法检测小鼠肝脏中Smad4蛋白的表达。采用X^2检验对结果进行分析，观察泡状棘球蚴对Smad4蛋白表达的影响。结果Smad4蛋白主要表达于细胞核中，部分表达于细胞质中。小鼠感染泡状棘球蚴后6个月，受试组肝组织Smad4表达明显高于对照组（X^2=19．869，P〈0．05）。受试组肝细胞Smad4蛋白呈阳性表达的数量略多于对照组，且强度比对照组高（X^2=58．310，P〈0．05）。结论病灶周围肝组织和肝细胞中Smad4表达增多，其改变可能在纤维化过程中及免疫逃避中发挥效应。

MCP-1介导单核细胞浸润在泡型包虫病肝纤维化中的作用

目的探讨肝泡型包虫病患者肝组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平与单核细胞来源巨噬细胞浸润程度、炎症及纤维化的相关性。方法采用苏木素-伊红(H&E)染色和Masson染色评估病理炎症改变和纤维化程度,采用免疫组织化学方法检测肝组织中CD68^(+)巨噬细胞和MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞浸润情况及MCP-1表达情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝脏组织中MCP-1的基因表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中MCP-1水平,并分析MCP-1与MAC387^(+)单核细胞来源巨噬细胞浸润的相关性,以及与肝组织炎症和纤维化的关系。结果H&E染色显示,与灶旁肝脏组织相比近端病灶组织肝小叶结构被破坏,病变周围可见炎症细胞浸润。Masson染色显示近端病灶组织门静脉区域纤维结缔组织增生,肝小叶纤维化,而灶旁肝脏组织未见明显病理改变。免疫组织化学检测显示,与灶旁肝脏组织相比近端病灶组织中CD68^(+)巨噬细胞和MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞均显著增加(均P<0.01),灶旁肝脏组织中MCP-1表达较少,而近端病灶组织MCP-1高表达(P<0.01)。相关性分析显示,肝脏组织中MCP-1的表达与MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞表达水平呈显著正相关(R=0.814,P<0.01),与肝脏炎症的严重程度呈正相关(R=0.813,P<0.01),与纤维化评分呈正相关(R=0.719,P<0.01)。qRT-PCR检测显示,近端病灶组织中MCP-1mRNA表达水平显著高于灶旁肝脏组织(P<0.05)。ELISA检测显示,与健康体检者相比肝泡型包虫病患者外周血中MCP-1水平显著升高(P<0.01)。结论MCP-1与肝泡型包虫病导致的肝脏炎症和纤维化程度呈正相关,与MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞数量呈正相关,提示MCP-1可能介导肝组织中单核细胞的浸润。因此推测MCP-1在肝泡型包虫病肝纤维化中具有重要作用。

包虫病特异性抗体检测试剂盒临床应用效果评价

目的评价包虫病特异性抗体检测试剂盒(简称包虫病试剂盒)的临床应用效果,为试剂盒制作工艺进一步优化提供技术支持。方法通过回顾性调查方法,选择2012 - 2016年新疆医科大学第一附属医院经手术、病理学(金标准),以及包虫病试剂盒等方法检查确诊的包虫病患者1 481例和非包虫病患者1 055例作为调查对象,对临床病历资料进行分析,对包虫病试剂盒诊断效能进行评价,并应用逐步判别分析方法,构建判别分析函数式,建立包虫病诊断模型。同时分析包虫病试剂盒中4个抗原的检测效能。结果共调查2 536例患者[男1 275例,女1 261例,年龄(41.62±18.43)岁],30~59岁年龄组(1 489例)占比最高。包虫病患者患病器官主要为肝脏。包虫病试剂盒的敏感性为94.80%(1 404/1 481),特异性为71.00%(749/1 055),一致性为84.90%(2 153/2 536),约登指数为0.66,Kappa值为0.68。应用逐步判别分析方法,构建的判别分析函数式为Y=0.777X1 + 0.258X2 + 0.241X3 - 1.575,逐步判别分析模型诊断一致性与现行诊断标准比较,差异无统计学意义(85.73%比84.90%,χ^2=0.694,P > 0.05)。包虫病试剂盒对泡型和囊型包虫病的鉴别诊断一致性为76.07%(1 068/1 404)。包虫囊液抗原(EgCF)同包虫病试剂盒的检测效能比较,差异无统计学意义(P均> 0.05)。结论包虫病试剂盒诊断及鉴别诊断效能较高,适用于各级医院对包虫病的临床试验辅助诊断以及现场流行病学调查。EgCF可以作为包虫病单抗原试纸条的抗原,应用于包虫病流行病学调查等工作中。

病毒感染时IFITM3与TRIM22和Foxp3表达及关联基因的富集分析

目的病毒感染时对IFITM3、TRIM22和FOXP3及基因进行富集分析。方法利用STRING作出IFITM3、TRIM22和FOXP3及其关联的50个基因互作网络图;利用DAVID数据库和KOBAS数据库对其进行GO分析和KEGG分析。应用荧光定量PCR对3基因的mRNA相对表达量进行相关性分析。结果通过STRING数据库分析得到3基因互作网络图,关联性大小与图中代表基因节点的圆圈大小呈正比(P<0.05)。经基因功能富集分析表明基因相关的信号通路与基因有关联的可信度较高(P<0.05)。在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和甲型流感病毒感染患者的外周血白细胞(P<0.05)分别为(4.462±3.441)、(4.406±4.415)和(4.013±0.081)中的IFITM3的mRNA与健康对照组差异有统计学意义(t=2.987,P<0.01)。结论机体感染病毒后,IFITM3与TRIM22之间、FOXP3与TRIM22之间可能存在着一定的相互作用,并参与机体对病毒感染的应答进程。

泡球蚴感染中自噬相关蛋白对巨噬细胞极化的影响

目的通过对感染泡球蚴小鼠肝脏的自噬相关蛋白以及巨噬细胞不同分型的检测,探讨在泡球蚴感染过程中自噬对巨噬细胞极化的影响及可能机制。方法取雌性BALB/c小鼠16只,随机分为实验组与对照组。实验组建立泡球蚴感染小鼠模型,于感染90天处死,通过HE染色观察小鼠肝脏的病理学变化,利用免疫组化等技术检测肝脏中自噬相关蛋白的表达,利用免疫荧光激光共聚焦法进行肝脏组织巨噬细胞与自噬相关蛋白共定位,采用流式细胞术检测肝脏巨噬细胞M1、M2表达水平。结果感染90天时,实验组小鼠肝脏自噬相关蛋白LC3、p62表达均增高,相对表达量分别为2.08±0.3和1.85±0.2,与对照组比较差异均有统计学意义(F值分别为260.114和434.116,均P<0.01);实验组小鼠肝脏组织中自噬相关蛋白LC3、p62与巨噬细胞存在共定位表达,Pearson’s相关系数与对照组比较有统计学意义(F值分别为132.219和36.325,均P<0.01),Manders重叠系数与对照组比较有统计学意义(F值分别为205.410和140.665,均P<0.01);实验组小鼠肝脏巨噬细胞数增加至31.74±1.68,M1型巨噬细胞增加至66.46±1.82,M2型巨噬细胞减少至22.46±0.63,与对照组比较差异均有统计学意义(F值分别为309.358、194.001和759.194,均P<0.01)。结论泡球蚴感染小鼠肝脏自噬相关蛋白高表达,促进巨噬细胞以M1型极化,抑制M2型极化,以减轻炎症反应,帮助机体清除病原体。

包虫囊液干预下宿主限制性因子IFITM3和Foxp3之间的关联研究

目的探究在包虫囊液干预过程中IFITM3与Foxp3之间的相互影响。方法小鼠细粒棘球蚴病造模后收集肝脏组织,通过HE染色、免疫组织化学方法检测肝脏组织中IFITM3和Foxp3的表达状况。采用Western blot和荧光定量PCR(Real-time PCR)测定未加囊液浓度(阴性组)、1∶10、1∶100和1∶1000共4组不同囊液浓度比例干预HEK293T细胞后IFITM3和Foxp3的蛋白表达量和mRNA相对表达量。用Spearman进行IFITM3和Foxp3相关性分析。结果HE染色后,可见CE肝脏组织的病灶;免疫组化结果显示随着细粒棘球蚴感染时间的延长,IFITM3在肝脏的表达量逐渐降低,Foxp3的表达量逐渐升高。在感染第2 d IFITM3的表达最高而Foxp3的表达量最低高,感染300 d IFITM3的表达量最低,Foxp3的表达量最高。Western blot显示,在4组囊液浓度比例干预下,IFITM3的灰度值分别是(1.421±0.162)、(0.798±0.091)、(0.936±0.118)、(1.269±0.101);Foxp3的灰度值分别是(0.614±0.034)、(0.761±0.020)、(0.919±0.019)、(1.115±0.177),说明IFITM3和Foxp3随着囊液干预浓度的降低表达量逐渐升高。Real-time PCR结果显示,在4组囊液浓度比例干预后IFITM3 mRNA相对表达水平分别是(1.00±0.322)、(0.605±0.321)、(0.736±0.113)、(2.384±0.049);Foxp3 mRNA相对表达水平分别是(1.000±0.153)、(1.321±0.316)、(1.675±0.376)、(3.848±1.645),说明随着囊液干预浓度的降低,IFITM3和Foxp3mRNA的相对表达量逐渐升高。Spearman相关分析结果显示,不同浓度囊液干预后,细胞中的IFITM3与Foxp3在mRNA相对表达和蛋白表达均成正相关。结论在细粒棘球蚴感染过程中,低浓度的囊液刺激会使IFITM3和Foxp3的表达量增高,并且IFITM3与Foxp3呈正相关性,说明宿主限制性因子IFITM3通过与核转录因子Foxp3存在关联,从而与获得性免疫发生联系。

新疆和布克赛尔蒙古自治县人群和羊群肝包虫病现场筛查报告

目的了解新疆和布克赛尔县人群和羊群肝包虫病感染情况，以评价包虫病防控措施。方法在和布克赛尔县采用现患筛查的抽查方法，以肝包虫病超声声像图特征作为诊断标准，现场筛查人群和羊群肝包虫病，并比较分析不同筛查点患病情况。结果超声声像图显示，人群肝包虫病检出率为4．4％（23／521），囊性包虫病检出率为4．0％（21／521），泡性包虫病检出率为0．8％（4／521），羊群感染率为3．8％（7／180）。5个筛查点中查十库勒乡人群和羊群感染率最高，人群检出率与其他各筛查点相比差异无统计学意义，羊群检出率与巴音傲瓦乡相比差异有统计学意义（x2=4．8259，P=O．0280），作为包虫病中间宿主绵羊的感染率高于人群。结论和布克赛尔县人群和羊群肝包虫病仍呈高流行趋势。

新疆巴音布鲁克奎克乌苏达板地区2014年绵羊肝囊型包虫病现患率调查

目的应用超声诊断普查方式了解新疆巴音布鲁克奎克乌苏达板地区绵羊感染肝囊型包虫病情况。方法2014年7月在巴音布鲁克奎克乌苏达板地区采用现患筛查方法，以肝包虫病超声声像图征象为诊断标准，现场调查绵羊肝囊型包虫患病情况。以羊齿龄分组，分别计算不同齿龄羊肝囊型包虫病感染率，并分析齿龄与感染率间的相关关系。结果巴音布鲁克奎克乌苏达板地区放牧绵羊肝囊型包虫病的总感染率为36．9％。其中非钙化型肝囊型包虫病的总感染率为7．3％；钙化型肝囊型包虫的总感染率为29．6％。按绵羊齿龄分组后，①非钙化型肝囊型包虫病感染率1-岁齿龄组为1．2％、2．岁齿龄组为1．4％、3～岁齿龄组为14．0％、4～岁齿龄组为10．0％、5-岁齿龄组为15．6％、〉6岁齿龄组为4．2％；②钙化型肝囊型包虫病感染率，各岁齿龄组分别为9．9％、16．2％、31．6％、47．8％、42．2％和41．7％，其中以1-岁齿龄组肝囊型包虫病感染率较低，〉3岁齿龄绵羊肝囊型包虫病感染率明显增加；③绵羊肝囊型包虫病感染率和齿龄间存在正相关关系（r=0．372，R2=0．107，F=44．176，P=0．000），即随齿龄增长，肝囊型包虫病的感染率增加。结论新疆巴音布鲁克奎克乌苏达板地区属肝囊型包虫病的高流行区。绵羊肝囊型包虫病感染从羊只幼龄开始出现，3～4岁齿龄时呈高发状态，幼龄羊应为预防绵羊肝囊型包虫病的重点。