中药材种子种苗市场现状及对策探讨

通过分析中药材种子种苗质量在中药材GAP生产中的地位和中药材种子种苗市场的现状,提出了我国中药材种子种苗质量优化的对策和展望。

大黄游离蒽醌含量与产地及生长年限的相关性研究

目的:考察掌叶大黄、唐古特大黄游离蒽醌含量与产地、生长年限的相关性。方法:从四川松潘、若尔盖以及甘肃礼县、玛曲县采集47批大黄样品,采用HPLC法测定大黄药材的游离蒽醌含量。结果:不同产地大黄游离蒽醌含量差异较大,栽培5年的大黄与野生品种游离蒽醌总量相近,而栽培3年的大黄药材游离蒽醌总量难以达到药典标准。结论:大黄药材以栽培4年后采收为宜。

姜黄炮制前后质量变化的比较研究

目的研究姜黄炮制前后质量的变化。方法通过姜黄炮制前后有效成分、重金属及有害元素、指纹图谱的变化进行研究。结果姜黄炮制后浸出物的含量变化不大,姜黄素和挥发油的含量明显降低,重金属及有害元素变化不显著,姜黄指纹图谱共标出指纹峰11个,姜黄片则标示出7个。结论姜黄炮制后有效成分含量有明显的变化,重金属及有害元素含量有一定差异,但不显著,姜黄经炮制后HPLC指纹图谱指纹峰减少,印证了姜黄炮制后有效成分有损失的结论。

大黄种子内源抑制物质活性研究

目的对大黄种子内源抑制物进行初步研究。方法用甲醇和蒸馏水分别制备大黄种子的浸提液,并测定白菜种子的发芽率和根长来测定其抑制活性。结果大黄种子含有一定的内源抑制物质,对发芽率无明显抑制作用,但对胚根的生长却具有明显的抑制作用,并且水浸提液对胚根的抑制作用大于醇浸提液。结论大黄播种前用水浸泡种子,可降低其抑制物质对胚根的抑制作用,提高出苗率。

不同产地火麻仁的蛋白电泳分析

目的:鉴定不同产地火麻仁,并探讨火麻仁的遗传多样性。方法:利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对不同外观性状的火麻仁进行蛋白电泳聚类分析。结果:火麻仁蛋白电泳图谱表现出可观察到的谱带18条,其中7条较明显的谱带为共有谱带,另外11条谱带具有多态性,反映了火麻仁的遗传多样性。结论:火麻仁蛋白稳定且具有丰富的遗传多样性,实验结果可为准确鉴定药用火麻仁提供辅助依据。

大黄ISSR-PCR反应体系的建立与优化

采用正交设计和单因素试验相结合的方法对影响大黄ISSR-PCR反应体系的重要因素(Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物、DNA模板)进行优化,通过统计软件分析和直观分析获得最佳的反应体系:DNA模板30 ng,2.5μL 10×Taq Buffer,dNTPs 0.4 mmol/L、引物0.25μmol/L、Mg2+2.5mmol/L、Taq DNA聚合酶1.25 U。

半夏种质资源的高效毛细管电泳(HPCE)分析

目的:对半夏蛋白的组成情况进行初步的探讨和分析,了解半夏种质资源的差异。方法:利用毛细管电泳提供的蛋白信息,采用SPSS主成分分析法对半夏的蛋白组分进行分析,通过聚类分析结果了解半夏种质资源之间的关系。结果:根据高效毛细管电泳的信息,通过主成分分析和聚类分析,对半夏种子资源进行分类比较,结果表明半夏蛋白的组成与其地域分布有一定的关系。结论:不同来源的半夏种质资源之间存在一定的亲缘关系,可为半夏优良品种的筛选奠定基础。

中药材商品溯源编码初探

目的:结合中药材商品的市场情况,制定中药材商品溯源编码为实践,为中药材商品来源追溯及质量控制提供依据,促进中药产业的发展。方法:以中药材商品分类标准为基础和依据,对《中华人民共和国药典》、部颁标准及全国各个地区的地方标准所收载的中药材品种进行了统计,再结合中药材市场的实际销售情况,编制中药材商品的溯源编码。结果与结论:对前期研究中制定出的中药材商品分类标准草案进行了进一步的研究和完善,首次确定了中药材商品溯源编码的规则及可行性,编制了800余种中药材、两千余个等级规格的中药材商品溯源编码。

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定麦冬种植土壤中25种植物生长调节剂

建立了超高效液相色谱-串联质谱快速测定麦冬种植土壤中25种生长调节剂的方法。样品经粉碎后,加乙腈提取,离心后过滤,采用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪,在多反应监测(MRM)模式下,采用基质标准曲线外标法定量分析。多效唑等25种生长调节剂在相应浓度下线性关系良好,相关系数(r^(2))均大于0.995,方法定量限为2.0~10.0μg/kg。分别在10、20、100μg/kg 3个浓度水平下进行回收试验,回收率为61.4%~116.3%,相对标准偏差(RSD,n=6)均小于10%。本方法具有简单、快速、准确、灵敏等优点,适用于根茎类药材种植土壤中25种生长调节剂的检测。

高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法测定竹叶花椒中2种主要成分的含量

目的建立测定竹叶花椒中羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素含量的高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil 100-5 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(40∶60,V/V),检测波长为270 nm,流速为1mL/min,进样量为10μL,测定羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素的总含量;采用紫外-可见分光光度法,以羟基-α-山椒素为对照品,于270 nm波长处测定酰胺类物质的总量。结果高效液相色谱法中,羟基-α-山椒素和羟基-β-山椒素进样量分别在0.07911~3.95550μg和0.0095~0.4736μg范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为97.28%和98.90%,RSD分别为1.79%和1.56%(n=6);紫外-可见分光光度法中,羟基-α-山椒素质量浓度在0.7910~7.9100μg/mL范围内与吸光度线性关系良好,平均加样回收率为95.84%,RSD为0.78%(n=6)。结论所建立的含量测定方法准确、可靠,可用于竹叶花椒药材质量的控制。

基于ITS2序列的竹叶花椒及其近缘种药材鉴别

目的:通过分析竹叶花椒及其近缘种药材的核糖体DNA内转录间隔区2(ITS2)条形码序列,探讨DNA条形码技术鉴别竹叶花椒及其近缘种药材的可行性。方法:对样品进行DNA提取、扩增、测序,并从GenBank数据库下载ITS2序列,共获得竹叶花椒及其近缘种药材ITS2序列43条,基于Basic Local Alignment Search Tool(BLAST)法、临接法(NJ)、Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离和ITS2序列二级结构进行鉴定分析。结果:BLAST结果与性状鉴定结果一致;竹叶花椒种内平均K2P遗传距离小于其与花椒、青花椒、野花椒的种间平均K2P遗传距离;NJ系统聚类树和ITS2二级结构可直观地区分竹叶花椒及其近缘种。结论:应用ITS2条形码可以有效地鉴别竹叶花椒及其近缘种药材。

超高效液相色谱-串联质谱法检测半夏不同炮制品中农药残留

基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,建立了半夏炮制品中79种禁用及常用农药多残留的检测方法,并采用该方法对采集的217批样品(包括法半夏、姜半夏和清半夏)进行测定。半夏样品经乙腈提取后,以PSA净化,采用UPLC-MS/MS在多反应监测模式(MRM)下进行检测。检测结果通过统计软件进行分析,比较半夏不同炮制品间的差异。结果表明:在1~100μg/L范围内,79种农药的质量浓度与其相应的峰面积间呈现良好的线性关系,决定系数(R2)均大于0.99。在3个添加水平(5×LOD、10×LOD和20×LOD)下,添加回收率在70%~120%内的农药数量占总数的81.0%,相对标准偏差均小于15%(n=6)。79种农药的定量限为0.0001~0.1 mg/kg。217批半夏样品中检出农药27种。统计分析发现,多菌灵和克百威的检出结果在法半夏与姜半夏、法半夏与清半夏间存在显著性差异。本研究所建立的农药多残留测定方法指标针对性较强,操作简单,方法灵敏度高,准确性好。

不同直径半夏药材的质量差异比较研究

目的:考察不同直径半夏药材的质量差异,为其资源的合理利用提供参考。方法:以来自国内四大药材市场、2家公司的65批商品半夏为样品,采用游标卡尺测定其直径后,用分药筛将其筛分为不同直径范围(0.5 cm≤d≤0.8 cm、0.8 cm0.05)。73批半夏对口药材的直径主要分布在0.6~1.8 cm之间,平均重量占比为95.54%。若以2015年版《中国药典》(一部)规定的直径标准(1~1.5 cm),73批半夏对口药材中仅8批符合要求,合格率为10.96%;若适当扩大直径范围为0.7~1.5 cm,有54批符合要求,合格率为73.97%;当直径范围扩大为0.7~1.6 cm时,有68批符合要求,合格率达93.15%。结论:不同直径的半夏药材之间质量无明显差异。结合各产地半夏的直径分布情况,可将相关标准中规定的直径大小由"1~1.5 cm"扩大为"0.7~1.6 cm",避免资源浪费。

3种形态全缘兔耳草不同药用部位中6种成分测定

目的测定3种形态全缘兔耳草Lagotis integra W.W.Smith全草、地上部位、地下部位中6种成分的含量。方法采用HPLC法,大车前苷、鞭打绣球苷B、10-O-反式-对甲氧基肉桂酰基-梓醇及10-O-[(E)-3,4-二甲氧基肉桂酰基]-梓醇的含量测定采用沃特世X-bridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.4%甲酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长325 nm,梓醇、桃叶珊瑚苷的含量测定采用沃特世Atlantis T3 C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.2%磷酸(2∶98);体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长210 nm。结果6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率95.5%~101.9%,RSD 0.82%~1.94%。不同形态、药用部位中各成分含量及总量存在差异。结论该方法稳定可靠,可有效控制全缘兔耳草质量,并为该资源开发利用提供依据。

藏成药“十三味榜嘎散”显微鉴别研究

目的:探讨2020年版《中国药典》一部成方制剂项下十三味榜嘎散标准中显微鉴别项的相关问题,为下一版《中国药典》的修订提出参考。方法:对十三味榜嘎散及组成药材进行显微鉴别研究。结果:部分药材显微特征存在交叉,或与规定不符,或检验困难。结论:建议使用其它显微特征或鉴别方法对十三味榜嘎散的投料药材进行规范。

藏药兔耳草的生药学研究

目的:调研藏药兔耳草的使用基原,对比研究其常用基原植物及药材的性状、显微特征。方法:对藏药兔耳草主产区及藏医院、藏药企业、市场开展实地调研,并收集常用且基原准确的兔耳草原植物及药材,采用体式显微镜、光学显微镜等仪器,结合植物分类学、性状鉴别法及显微鉴别法进行观察和比较。结果:藏药兔耳草为玄参科兔耳草属多种植物,常用基原植物有5种,分别是短管兔耳草、全缘兔耳草、圆穗兔耳草、革叶兔耳草及短穗兔耳草,其中全缘兔耳草、圆穗兔耳草及短管兔耳草使用频率较高。各基原植物的主要区别在于花序的形态、花萼后方开裂程度、花冠筒伸直或弯曲、茎直立或匍匐;药材性状的主要区别在于根茎大小、断面特征、匍匐茎的有无、叶的形态及花序;显微特征的主要区别在于叶柄横切面的栅栏组织细胞数目、根表皮细胞层数。结论:临床使用的兔耳草药材基原混乱,部分基原标准未收录;5种兔耳草在基原、性状、显微上均存在一定差异,通过此研究结果可有效鉴别。

基于皂苷类成分研究鉴别川牛膝及其伪品

目的:改良现行川牛膝质量标准方法的TLC鉴别并新增HPLC-ELSD法,以弥补川牛膝类药材鉴定方法的不足。方法:以川牛膝伪品麻牛膝所含特征性皂苷类成分为线索,依据泡沫实验、TLC鉴别及HPLC-ELSD法建立川牛膝及其伪品的鉴别方法,并对所收集的11批川牛膝、21批麻牛膝及7批杂牛膝样品进行鉴别。结果:泡沫实验中麻牛膝所产生的泡沫最多,其次为杂牛膝,川牛膝最少。TLC鉴别中所有批次的川牛膝均不显与牛膝皂苷Ⅰ、牛膝皂苷Ⅱ对照品相同的黄绿色荧光斑点,且未有与川牛膝对照药材不一致的黄绿色斑点。麻牛膝及杂牛膝与川牛膝结果相反,且杂牛膝的黄绿色斑点弱于麻牛膝。HPLC-ELSD法所建立的麻牛膝指纹图谱与所有批次麻牛膝相似度高,与川牛膝相似度极低,与杂牛膝的相似度不高,且麻牛膝与杂牛膝均存在与牛膝皂苷Ⅰ、牛膝皂苷Ⅱ对照品相同的峰。结论:HPLC-ELSD法使用相似度评价分析并结合是否检出牛膝皂苷Ⅰ、牛膝皂苷Ⅱ峰可作为鉴别川牛膝类药材的一种新的有效鉴别方法,泡沫实验及TLC鉴别可作为其辅助鉴别手段。

HPLC法同时测定千金止带丸(水丸)中靛蓝和靛玉红的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定千金止带丸（水丸）中靛蓝和靛玉红含量的方法。方法：采用HPLC定量分析，色谱柱为Welch Materials Ultimate C18柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇∶水（70∶30）；流速1ml/min，检测波长546nm。结果：靛蓝、靛玉红分别在61.49～922.35ug （r=0.9999）和8.56～128.40ug （r=1.0000）范围内与峰面积呈良好的线性关系；平均加样回收率靛蓝为99.65%（RSD=1.92%），靛玉红为99.16%（RSD=0.76%）。结论：该方法简便、结果可靠、重现性好、专属性强，可用于同时测定千金止带丸（水丸）中靛蓝和靛玉红的含量。

泽泻饮片中重金属及有害元素污染评价

目的建立泽泻饮片中重金属及有害元素残留量的测定方法,并对污染水平进行评价。方法采用微波消解处理,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定泽泻饮片的铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)的含量。采用单项污染指数法和内梅罗综合污染指数法对其污染情况进行评价。结果泽泻饮片中5种重金属及有害元素的线性关系良好(r>0.999),回收率为85%~105%。根据《中国药典》(2020年版)药材及饮片(植物类)重金属及有害元素的限量指导值,泽泻饮片中5种重金属及有害元素平均单项污染指数由大小顺序为Cu>Cd>As>Pb>Hg,内梅罗综合污染程度为警戒级。结论泽泻饮片中存在Cu污染,基本不存在Cd、Pb、As和Hg污染,不同炮制方法对泽泻饮片的污染影响不大。

藏药加哇与其近似品种的性状及显微鉴别研究

目的:对比研究藏药加哇及其三种近似种的性状与显微特征。方法:采用体式显微镜、光学显微镜等仪器,运用性状鉴别法及显微鉴别法进行观察和比较。结果:加哇(迷果芹)与三种近似品种性状在形状、根头部、表面及气味上存在明显区别。迷果芹的性状为长纺锤形,根头部有致密的环状横纹,表面有明显的浅黄棕色横长皮孔痕,嚼之有明显的胡萝卜味;横切面显微在木栓层、韧皮部及形成层存在明显区别,迷果芹木栓层较薄,形成层明显,韧皮部裂隙较少且无油室及油管;粉末显微特征中,迷果芹具有油室碎片而无油管,可与宽萼岩风相区别,与其余两种无明显区别。结论:迷果芹及三种近似种在性状及显微上均存在一定差异,通过此研究结果可有效鉴别。