IL-18结合蛋白在创伤性颅脑损伤大鼠认知功能障碍中的作用及其机制

目的探究IL-18结合蛋白(IL-18BP)在创伤性脑损伤(TBI)大鼠认知功能障碍中的作用及其机制。方法120只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI组、TBI+IL-18BP组(经尾静脉注射IL-18BP 1.5 mg/kg)与TBI+IL-18BP+ADU-S100组(经尾静脉注射IL-18BP1.5 mg/kg,经腹腔注射ADU-S10020 mg/kg),每组30只。应用自由落体法建立TBI模型,造模后30 d行水迷宫实验检测大鼠认知功能,ELISA法检测大鼠血清IL-18、IL-18BP浓度,免疫荧光染色检测海马区星形胶质细胞GFAP、IL-18和cleaved-caspase-3荧光强度,Western blotting检测大鼠海马区干扰素基因刺激蛋白(STING)、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、TBK1、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、IRF3蛋白相对表达量。结果与假手术组比较,TBI组、TBI+IL-18BP组和TBI+IL-18BP+ADU-S100组大鼠逃逸潜伏期明显延长,穿越平台次数减少,目标象限活动时间百分比降低(P<0.0001),血清IL-18、IL-18BP浓度升高,海马区IL-18和cleaved-caspase-3荧光强度明显增强,STING、p-TBK1、p-IRF3表达明显上调(P<0.05);与TBI组比较,TBI+IL-18BP组大鼠逃逸潜伏期缩短,穿越平台次数增多,目标象限活动时间百分比增高(P<0.0001),血清IL-18浓度降低,IL-18BP浓度升高,海马区IL-18和cleaved-caspase-3荧光强度明显减弱,STING、p-TBK1、p-IRF3表达明显下调(P<0.05);与TBI+IL-18BP组比较,TBI+IL-18BP+ADU-S100组大鼠逃逸潜伏期延长,穿越平台次数减少,目标象限活动时间百分比降低(P<0.0001),血清IL-18浓度升高,IL-18BP浓度降低,海马区IL-18和cleaved-caspase-3荧光强度增强,STING、p-TBK1、p-IRF3表达明显上调(P<0.05)。结论IL-18BP可改善TBI大鼠的认知功能,其机制可能与抑制星形胶质细胞凋亡及抑制STING/TBK1/IRF3信号通路激活有关。

IL-18BP对创伤性颅脑损伤大鼠焦虑样行为的改善作用及其机制

目的探讨IL-18结合蛋白(IL-18BP)对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠焦虑样行为的影响及其机制。方法采用随机数字表法将72只清洁级雄性SD大鼠分为3组各24只:假手术组(Sham组)、TBI组、TBI+IL-18BP组。Sham组仅开骨窗后缝合;TBI组应用自由落体法建立TBI模型;TBI+IL-18BP组大鼠建立TBI模型后经鼠尾静脉注射IL-18BP(1.5 mg/kg)。采用旷场实验和高架十字迷宫实验检测大鼠的焦虑样行为,采用免疫荧光染色技术检测大鼠杏仁核区各神经细胞的数量、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)和IL-18阳性星形胶质细胞百分比。采用ELISA法检测大鼠血清和脑脊液中IL-18的浓度。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠杏仁核区焦亡相关蛋白:NLRP3、活化的Caspase-1、消皮素D的N端(N-GSDMD)的表达水平。结果与Sham组相比,TBI组、TBI+IL-18BP组30 d旷场实验中央区进入次数和活动时间减少,高架十字迷宫开放臂进入次数百分比和滞留时间百分比减少,血清和脑脊液中的IL-18浓度增加,杏仁核区星形胶质细胞激活增多,NLRP3与IL-18阳性的星形胶质细胞百分比上调,杏仁核区焦亡相关蛋白表达上调(P均<0.05)。与TBI组相比,TBI+IL-18BP组30 d中央区进入次数与活动时间增多,开放臂进入次数百分比和滞留时间百分比增加,血清和脑脊液中的IL-18的浓度降低,杏仁核区星形胶质细胞激活减少,NLRP3与IL-18阳性的星形胶质细胞百分比下调,杏仁核区焦亡相关蛋白表达下调(P均<0.05)。结论IL-18BP能在一定程度上减轻TBI大鼠的焦虑样行为,可能与抑制星形胶质细胞NLRP3炎性小体相关的细胞焦亡密切相关。

Caspase-1选择性抑制剂VX-765在大鼠急性肾损伤相关性肺损伤中的作用

目的评价caspase-1选择性抑制剂VX-765在大鼠急性肾损伤(AKI)相关性肺损伤中的作用。方法SPF级SD雄性大鼠72只,9~10周龄,体重350~400 g。采用随机数字表法分为四组:假手术组(S组)、AKI组(A组)、DMSO+AKI组(D组)和VX-765+AKI组(V组),每组18只。S组暴露双肾45 min;A组采用切除右肾、夹闭左肾肾蒂45 min的方法建立AKI模型;D组建立AKI模型前经鼠尾静脉注射2%DMSO 0.5 ml/kg;V组建立AKI模型前经鼠尾静脉注射10%VX-7650.5 ml/kg。AKI模型建立24 h后取主动脉血样,采用酶偶联速率法与肌氨酸氧化酶法检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)浓度,ELISA法检测血清IL-1β和IL-18浓度。随后处死大鼠取左肾组织和左肺组织。采用免疫荧光法检测肾组织caspase-1/DAPI双阳性细胞百分比,Western blot法检测肾组织cleaved GSDMD蛋白及肺组织ZO-1蛋白含量,Paller评分法评估HE染色后的肾小管损伤情况,烘干法检测肺部干湿比重,计算肺含水率,ELISA法检测肺伊文斯蓝评估肺血管通透性,肺损伤评分评估MASSON染色后的肺组织损伤程度。结果与S组比较,A组、D组、V组血清BUN、Scr、IL-1β和IL-18浓度明显升高,肾组织caspase-1/DAPI双阳性细胞百分比明显升高,肾组织caspase-1和cleaved GSDMD蛋白含量明显升高,肾损伤Paller评分明显升高,肺组织ZO-1蛋白含量明显降低,肺含水率、肺血管通透性、肺损伤评分明显升高(P<0.05)。与A组比较,V组血清BUN、Scr、IL-1β和IL-18浓度明显降低,肾组织caspase-1/DAPI双阳性细胞百分比明显降低,肾组织caspase-1和cleaved GSDMD蛋白含量明显降低,肾损伤Paller评分明显降低,肺组织ZO-1蛋白含量明显升高,肺含水率、肺血管通透性、肺损伤评分明显降低(P<0.05)。A组、D组各指标差异无统计学意义。结论Caspase-1选择性抑制剂VX-765可以降低血清中BUN、Scr、IL-1β和IL-18浓度,减少肾组织细胞焦亡,改善肺水肿及肺血管通透性,减轻AKI相关性肺损伤。

超声引导下22G套管针辅助新生儿颈内静脉穿刺术

目的探讨超声引导下22G套管针辅助新生儿颈内静脉穿刺置管的可行性。方法选择沧州市中心医院2016年7月至2017年9月在全身麻醉下手术需要中心静脉置管的新生儿60例,随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组在彩超引导下采用22G套管针进行穿刺置管,对照组在彩超引导下采用原穿刺针进行穿刺置管。结果观察组一次穿刺成功率、置导丝成功率、置管成功率均高于对照组,穿刺时间明显短于对照组,并发症明显低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P <0. 05)。结论超声引导下22G套管针进行新生儿颈内静脉穿刺术能够极大地提高穿刺置管成功率,为临床麻醉及围术期管理提供支持。

针刺内关穴治疗剖宫产术中卡前列素氨丁三醇不良反应效果观察

目的观察针刺内关穴对剖宫产术中使用卡前列素氨丁三醇所引起的不良反应的防治作用。方法选择2016年11月—2017年7月在沧州市中心医院择期行剖宫产手术,术中因宫缩乏力而使用卡前列素氨丁三醇宫体注射治疗的产妇90例,ASAⅠ~Ⅱ级,年龄25~40岁,体质量55~80 kg,常规采用椎管内麻醉。采用随机数字表法将90例产妇分为3组各30例:所有产妇在胎盘娩出后常规宫体注射缩宫素10 IU,经产科医生判断仍旧宫缩乏力的宫体注射卡前列素氨丁三醇250μg,在肌注卡前列素氨丁三醇的同时A组静脉给予生理盐水2 mL,B组静脉给予昂丹司琼4 mg,C组针刺右侧内关穴。记录3组产妇宫体注射卡前列素氨丁三醇时(t0)、注射后5 min(t1)、注射后15 min(t2)及手术结束时(t3)的BP、HR、Sp(O2),记录3组产妇恶心、呕吐、胸闷、颜面潮红等不良反应发生情况。结果与t0时刻比较,t1、t2时刻A组、B组的SBP、DBP、HR明显升高(P均<0.05),C组各时刻SBP、DBP、HR比较差异均无统计学意义(P均>0.05);与A组相比,B组、C组恶心呕吐发生率明显降低(P均<0.05),恶心呕吐的程度也明显减轻(P均<0.05),C组胸闷、颜面潮红发生率明显低于A组、B组(P均<0.05)。结论针刺内关穴用于防治剖宫产术中卡前列素氨丁三醇所致的不良反应安全、方便、有效。

STING-Caspase-1信号通路对创伤性颅脑损伤大鼠认知功能障碍的作用

目的探讨干扰素基因刺激蛋白(STING)-半胱天冬酶(Caspase-1)信号通路在颅脑创伤致大鼠认知功能障碍中的作用。方法将48只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,假手术组(S组)、模型组(M组)、STING抑制剂C-176组(C组)和STING激动剂ADU-s100组(A组)各12只。通过重物自由落体撞击硬脑膜法建立创伤性颅脑损伤(TBI)模型。M组、C组和A组大鼠建立TBI模型后,C组和A组分别经腹腔注射C-17610 mg/kg和ADU-s10010 mg/kg。S组只行骨瓣开窗术。建模后第7日行Morris水迷宫测试评估大鼠认知功能,然后处死大鼠取其海马组织,采用免疫荧光法测定STING/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、活化Caspase-1/Neuron表达情况。结果与S组比较,M组、C组和A组大鼠Morris水迷宫测试的潜伏期延长,穿越平台次数减少,目标象限停留时间缩短,STING/GFAP、活化Caspase-1/Neuron阳性率上调(P均<0.05)。与C组比较,M组、A组大鼠潜伏期延长,穿越平台次数减少,目标象限停留时间缩短,STING/GFAP、活化Caspase-1/Neuron阳性率上调(P均<0.05)。与A组比较,M组大鼠潜伏期缩短,穿越平台次数增加,目标象限停留时间延长,STING/GFAP、活化Caspase-1/Neuron阳性率G下调(P均<0.05)。结论STING-Caspase-1信号通路可能参与了TBI中认知功能障碍的病理生理过程。

肺康复锻炼应用于慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的效果及对肺功能和生活质量的影响

异常气体、有害颗粒的吸入,进而引起肺部组织产生炎症是导致慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）发生的主要原因,其对肺部组织的破坏性较为严重,降低肺功能,影响全身系统,导致患者运动耐力和生活质量降低。笔者将肺康复锻炼应用于COPD稳定期患者的治疗中,能显著改善患者的肺功能,提升运动耐力及生活质量,现报道如下。

不同频次肺康复运动训练对稳定期COPD病人肺通气功能、运动耐力及预后的影响

目的:探讨不同频次肺康复运动训练对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人肺通气功能、运动耐力及预后的影响。方法:选取2020年4月—2021年9月收治的100例稳定期COPD病人作为研究对象,采用抽签法分为常规组和高频组各50例,两组病人均采用常规治疗及8周肺康复运动训练,常规组频次为每周2次,高频组每周5次。比较两组病人肺通气功能、运动耐力、预后。结果:两组病人干预8周末第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV_(1)/FVC)均较干预前升高,高频组高于常规组;两组病人改良式医学委员会呼吸困难量表(mMRC)评分、慢性阻塞性肺疾病评估测试(CAT)评分较干预前降低,高频组低于常规组(P<0.05)。常规组病人干预前、干预8周末最高分钟通气量、最高运动负荷量水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组病人干预8周末无氧阈(AT)时分钟通气量、最高氧脉搏(VO_(2)max/HR)、AT时VO_(2)/HR水平较干预前升高,高频组高于常规组(P<0.05)。高频组干预前、干预8周末最高分钟通气量、最高运动负荷量水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。高频组病人干预8周末最高分钟通气量、最高运动负荷量水平高于常规组(P<0.05)。两组病人干预8周末圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评分中呼吸症状、活动能力、疾病影响评分水平较干预前降低,高频组低于常规组(P<0.05)。结论:高频次肺康复运动训练可调控稳定期COPD病人肺通气功能,调节运动耐力,改善预后。

汉黄芩素调节Notch信号通路对脑缺血/再灌注模型小鼠神经细胞凋亡的影响

目的探讨汉黄芩素(Wogonin,WOG)通过调节Notch信号通路对脑缺血/再灌注模型(Ischemia/reperfusion,I/R)小鼠神经细胞凋亡的影响。方法采用改良线栓堵塞法建立I/R小鼠模型,建模成功后将小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、汉黄芩素低、中、高剂量组(WOG-L组、WOG-M组、WOG-H组),汉黄芩素高剂量+Notch信号通路抑制剂组[(WOG+3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)组],每组各15只;采用神经功能缺损评分评价小鼠神经功能损伤,苏木素-伊红(Hematoxylin and eosin,HE)染色法、原位末端标记法(TDT mediated dutp nick end labeling,Tunel)观察小鼠脑组织海马CA1区病理情况及神经细胞凋亡情况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法计算小鼠脑梗死体积,酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测海马组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin 6,IL-6)水平,Western blot法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)及Notch信号通路相关蛋白(受体Notch1、配体蛋白Jagged1、下游转录因子Hes1)表达水平。结果与Sham组比较,I/R组小鼠脑组织细胞损伤严重,神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3,Notch1,Jagged1,Hes1蛋白表达水平显著升高(P>0.05);与I/R组比较,WOG-L组、WOG-M组、WOG-H组小鼠脑组织细胞损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3蛋白表达水平显著降低,Notch1,Jagged1,Hes1表达水平显著升高(P<0.05);与WOG-H组比较,WOG+DAPT组DAPT可部分逆转汉黄芩素对I/R组小鼠神经细胞的保护作用(P<0.05)。结论汉黄芩素可以减少脑缺血/再灌注小鼠神经细胞的凋亡,改善神经功能损伤,其作用机制可能与激活Notch信号通路有关。

超声引导喉上神经阻滞联合静脉麻醉用于纤维支气管镜诊疗术患儿的改良效果

目的评价超声引导喉上神经阻滞联合静脉麻醉用于纤维支气管镜诊疗术患儿的改良效果。方法选择本院纤维支气管镜诊疗术患儿40例,年龄3~6岁,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,性别不限,BMI 18~24 kg/m^(2),采用随机数字表法分为2组(n=20):超声引导喉上神经阻滞+静脉麻醉组(A组)和表面麻醉+静脉麻醉组(B组)。采用右美托咪定与艾司氯胺酮镇静后,A组行超声引导双侧喉上神经阻滞,双侧各注射1%利多卡因0.5 ml;B组行1%利多卡因鼻腔、咽腔部表面麻醉。操作完成后,静脉泵注丙泊酚5 mg·kg^(-1)·h^(-1)维持至诊疗完成。术中若出现剧烈呛咳或体动,静脉追加丙泊酚1 mg/kg。于入室时(T_(0))、麻醉镇静后即刻(T_(1))、支气管镜进入声门即刻(T_(2))、诊疗术开始后5 min(T_(3))及检查完成(T4)时记录MAP、HR和SpO_(2)。记录术中低氧血症、HR<60次/min、MAP<50 mmHg的发生情况,记录丙泊酚追加剂量。于T_(0)与T4时采集静脉血样,采用化学发光法测定血浆皮质醇浓度。记录术者满意度评分。记录A组患儿术后2 h内喉上神经阻滞相关并发症的发生情况。结果与B组比较,A组T_(2)、T_(3)时HR降低,SpO_(2)升高,术中丙泊酚追加剂量和低氧血症发生率降低,术者满意度评分升高,T4时血浆皮质醇浓度降低(P<0.05)。2组术中均未见HR<60次/min、MAP<50 mmHg的情况发生。A组术后未见喉上神经阻滞相关并发症发生。结论超声引导喉上神经阻滞联合静脉麻醉用于纤维支气管镜诊疗术患儿安全性较高,相比常规麻醉可提高镇痛效果,更有利于抑制术中应激反应。

老年患者髋关节周围骨折手术麻醉的优化策略:艾司氯胺酮联合髂筋膜间隙-蛛网膜下腔阻滞

目的评价艾司氯胺酮联合髂筋膜间隙-蛛网膜下腔阻滞对老年患者髋关节周围骨折手术麻醉的优化效果。方法选择老年髋关节周围骨折行手术治疗的患者62例,年龄60~85岁,BMI 18.5~30.0 kg/m^(2),ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,性别不限。采用随机数字表法将患者分为2组(n=31):髂筋膜间隙-蛛网膜下腔阻滞组(FS组)和艾司氯胺酮联合髂筋膜间隙-蛛网膜下腔阻滞组(ES组)。FS组患者在蛛网膜下腔麻醉操作前30 min术侧行超声引导下髂筋膜间隙阻滞;ES组患者在髂筋膜间隙-蛛网膜下腔阻滞的基础上,于切皮前5 min静脉注射艾司氯胺酮0.25 mg/kg。术后镇痛采用PCIA,若疼痛数字评分>4分,静脉注射曲马多1 mg/kg进行补救镇痛。记录术后48 h内镇痛泵按压次数、补救镇痛次数和曲马多消耗量;记录术后不良反应(呼吸抑制、恶心、呕吐、头晕、嗜睡、皮肤瘙痒、幻觉、噩梦)的发生情况。结果与FS组比较,ES组患者术后曲马多消耗量降低,镇痛泵按压次数和补救镇痛次数减少(P<0.05);2组患者术后不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论艾司氯胺酮联合髂筋膜间隙-蛛网膜下腔阻滞用于老年患者髋关节周围骨折手术可提高术后镇痛效果,优化临床管理策略。

超声引导单次髂筋膜间隙阻滞联合艾司氯胺酮对髋部骨折手术老年患者术后谵妄的影响

目的评价超声引导单次髂筋膜间隙阻滞联合艾司氯胺酮对髋部骨折手术老年患者术后谵妄(POD)的影响。方法择期蛛网膜下腔麻醉下行髋部骨折手术患者62例,年龄60~85岁,BMI 18~30 kg/m^(2),ASA分级Ⅱ或Ⅲ级,性别不限。采用随机数字表法将患者分为2组(n=31):单次髂筋膜间隙阻滞组(FICB组)和单次髂筋膜间隙阻滞联合艾司氯胺酮组(FICB+E组)。于蛛网膜下腔麻醉前30 min行超声引导髂筋膜间隙阻滞;FICB+E组于切皮前5 min静脉注射艾司氯胺酮0.3 mg/kg,随后以0.25 mg·kg^(-1)·h^(-1)的速率静脉泵注至手术结束前30 min。术后采用PCIA,并采用曲马多进行补救镇痛。记录术后48 h内镇痛泵按压次数、补救镇痛次数和曲马多用量;于切皮时、手术开始后30 min、手术结束前30 min、手术结束时、离开PACU时采用Ramsay镇静评分评估镇静程度;采用意识模糊评估法(CAM)评估术后7 d内POD的发生情况;于入室、术后3 d、术后7 d时采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、S100β和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)浓度;记录药物相关不良反应发生情况。结果与FICB组比较,FICB+E组术后3 d内POD发生率降低,曲马多用量、镇痛泵按压次数、补救镇痛次数减少,各时点Ramsay镇静评分升高,术后血清TNF-α、IL-6、S100β和GFAP浓度降低(P<0.05),术后7 d总POD发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论超声引导单次髂筋膜间隙阻滞联合艾司氯胺酮可为老年髋部骨折患者围术期提供更完善的镇痛和镇静,降低术后早期(3 d内)POD的发生风险。

一氧化碳后处理对氧糖剥夺/复氧复糖诱发大鼠神经元焦亡的影响:与mPTP/ROS信号通路的关系

目的评价一氧化碳(CO)对氧糖剥夺/复氧复糖诱发大鼠神经元焦亡的影响及其与线粒体通透性转换孔/活性氧(mPTP/ROS)信号通路的关系。方法体外培养大鼠原代海马神经元,接种于6孔板或96孔板,采用随机数字表法分为5组(n=24):对照组(C组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、CO后处理组(CO组)、mPTP特异性开放剂苍术苷+CO后处理组(ACO组)、ROS特异性诱导剂抗霉素A+CO后处理组(KCO组)。采用无糖培养基低氧(1%O2)孵育16h再正常培养24h的方法制备氧糖剥夺/复氧复糖损伤模型。CO组于低氧处理结束即刻在2%CO-5%CO2混合气体中37℃培养3h,随后正常培养21h。ACO组和KCO组于低氧处理结束分别加入苍术苷20μmol/L和抗霉素A50μmol/L,其余处理同CO组。各组处理结束后,采用免疫荧光双染cleavedcaspase-1-AlexaFluor568/DAPI法确定神经元焦亡率。采用四甲基偶氮唑法确定神经元存活率,采用钙黄绿素法测定mPTP开放程度,采用二氯荧光黄双乙酸盐法测定ROS含量,采用Westernblot法检测IL-1β、IL-18的表达。结果与C组比较,其余各组海马神经元焦亡率、ROS含量和mPTP开放程度升高,存活率降低,IL-1β和IL-18表达上调(P<0.05);与OGD/R组比较,CO组、ACO组和KCO组海马神经元焦亡率、ROS含量和mPTP开放程度降低,存活率升高,IL-1β和IL-18表达下调(P<0.05);与CO组比较,ACO组和KCO组海马神经元焦亡率和ROS含量升高,存活率降低,IL-1β和IL-18表达上调,ACO组mPTP开放程度升高(P<0.05)。结论CO后处理可抑制氧糖剥夺/复氧复糖诱发大鼠神经元焦亡,机制与抑制mPTP/ROS信号通路有关。

CORM-3在减轻失血性休克复苏大鼠认知功能障碍及皮质神经细胞焦亡中的作用

目的探讨CORM-3在减轻失血性休克复苏大鼠认知功能障碍及皮质神经细胞焦亡中的作用。方法168只清洁级健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组、失血性休克复苏组、CORM-3组和iCORM-3组,每组42只。后3组大鼠建立失血性休克复苏模型,CORM-3组在复苏结束后立即向股静脉注射CORM-3(4mg/kg),iCORM-3组立即向股静脉注射iCORM-3(4mg/kg)。假手术组和失血性休克复苏组只注射含DMSO的等量生理盐水。失血性休克复苏模型的制备方法为:通过股动脉放血将平均动脉压降至25~35mmHg并维持60min,随后将收集的血液在15min内回输体内达到初始血压水平作为复苏,必要时输注生理盐水。于复苏结束后12h处死大鼠取皮质,采用气相分析法测定皮质区一氧化碳(CO)含量,Western blotting法检测皮质区细胞核内核转录相关因子2(Nrf2)、BTB-CNC异体同源体1(Bach1)及细胞质内血红素氧合酶-1(HO-1)、白介素(IL)-1β和IL-18的表达,通过免疫荧光染色法测定活化caspase-1-Cy3/神经元特异性核蛋白(NeuN)-FITC/DAPI阳性细胞数,计算皮质神经元焦亡率。最后于复苏后30d行旷场实验评价大鼠认知功能。结果与假手术组比较,失血性休克复苏组、CORM-3组和iCORM-3组在复苏后12h时皮质区CO含量增加,皮质神经元焦亡率升高,Nrf2/Bach1比率上调,HO-1、IL-1β和IL-18表达上调,跨格次数和直立次数减少,中央停留时间延长,差异均有统计学意义(P<0.05)。与失血性休克复苏组和iCORM-3组比较,CORM-3组在复苏后12h时皮质区CO含量增加,皮质神经元焦亡率降低,Nrf2/Bach1比率上调,HO-1表达增加,IL-1β和IL-18表达下降,跨格次数和直立次数增加,中央停留时间缩短,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CORM-3可降低失血性休克复苏大鼠皮质神经细胞焦亡率,缓解认知功能障碍,其机制可能与上调Nrf2/Bach1比例后增加HO-1表达有关。

CORM-3对创伤性颅脑损伤大鼠输血相关性急性肺损伤的影响

目的评价一氧化碳释放分子-3(CORM-3)对大鼠创伤性颅脑损伤后输血相关性急性肺损伤的影响。方法清洁级健康雄性成年SD大鼠72只,体重300~350 g,采用随机数字表法分为4组(n=18):假手术组(S组)、创伤性颅脑损伤组(T组)、创伤性颅脑创伤+10 ml/kg血浆输注组(TP组)和创伤性颅脑创伤+10 ml/kg血浆输注+CORM-3组(TPC组)。采用自由落体法建立大鼠颅脑损伤模型,TP组和TPC组大鼠分别在创伤性颅脑损伤后经股静脉输注血浆10 ml/kg。血浆输注完毕24 h后处死大鼠,取肺组织,确定肺组织湿重/干重(W/D)比值,通过HE染色结果计算肺损伤评分,肺部超声检查进行声像图量化评分,通过TUNEL染色法计算细胞凋亡率,Western blot法检测肺组织活化caspase-3、Bid、Bim和Puma的表达。结果与S组比较,其余3组大鼠肺组织W/D比值、肺损伤评分、声像图量化评分和细胞凋亡率升高,肺组织活化caspase-3、Bid、Bim和Puma表达上调(P<0.05);与T组比较,TP组大鼠肺组织W/D比值、肺损伤评分、声像图量化评分和细胞凋亡率升高,肺组织活化caspase-3、Bid、Bim和Puma表达上调(P<0.05);与TP组比较,TPC组大鼠肺组织W/D比值、肺损伤评分、声像图量化评分和细胞凋亡率下降,肺组织活化caspase-3、Bid和Bim和Puma表达下调(P<0.05)。结论CORM-3可减轻创伤性颅脑损伤大鼠输血相关性急性肺损伤,其机制可能与抑制肺组织细胞凋亡相关。

外源性CO对失血性休克复苏大鼠急性肾损伤时细胞凋亡的影响

目的评价外源性CO对失血性休克复苏(HSR)大鼠急性肾损伤时细胞凋亡的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠48只,9~10周龄,体重350~400 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、HSR组(H组)、HSR+CORM-3组(HC组)和HSR+iCORM-3组(HiC组)。失血性休克通过股静脉放血至MAP为30~35 mmHg维持45 min,将收集的血液在15 min内回输体内达到初始血压水平作为复苏,必要时输注生理盐水,建立HSR模型;HC组和HiC组在HSR模型进行液体复苏时分别加入CORM-3和iCORM-34 mg/kg(CORM-3在超净台中静置24 h,充分释放CO后作为对照)进行处理;S组只进行股静脉、股动脉穿刺置管。于复苏后3 h时采集大鼠尾静脉血样,测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)浓度;于复苏后12 h时处死大鼠取肾脏组织,Western blot法测定Bcl-2、Bak及cleaved caspase-3的表达,TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡情况,观察病理学结果并行损伤评分。结果与S组比较,H组、HC组和HiC组血清BUN、Scr浓度、病理学损伤评分和肾脏细胞凋亡率升高,Bcl-2/Bak比值降低,cleaved caspase-3表达上调(P<0.05);与H组比较,HC组血清BUN、Scr浓度、病理学损伤评分和肾脏细胞凋亡率降低,Bcl-2/Bak比值升高,cleaved caspase-3表达下调(P<0.05);与HC组比较,HiC组血清BUN、Scr浓度、病理学损伤评分和肾脏细胞凋亡率升高,Bcl-2/Bak比值降低,cleaved caspase-3表达上调(P<0.05);H组和HiC组比较,上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性CO改善HSR大鼠急性肾损伤的机制可能与抑制细胞凋亡有关。

STING在失血性休克复苏大鼠急性肾损伤中的作用:与HIF-1α的关系

目的评价干扰素基因刺激蛋白(STING)在失血性休克复苏(HSR)大鼠急性肾损伤中的作用及其与缺氧诱导因子(HIF)-1α的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠36只,9~10周龄,体重350~400 g,按随机数字表法分为3组(n=12):假手术组(S组)、HSR组(H组)和HSR+C176组(HC组)。通过左侧股静脉放血回输法制备大鼠HSR模型。S组只行左侧股静、动脉穿刺置管术。H组和HC组在血液回输时经腹腔分别注射等量DMSO、C176(10 mg/kg)。于复苏后12 h时经主动脉采集血样,测定血清BUN和Scr浓度;随后处死大鼠取左肾,光镜下观察病理学结果并行肾损伤评分,TUNEL法检测肾细胞凋亡情况,免疫荧光染色法检测STING和HIF-1α的表达,Western blot法测定cleaved caspase-3、Bak和Bcl-2的表达,计算Bcl-2/Bak比值。结果与S组比较,H组和HC组血清BUN、Scr浓度和Paller评分升高,肾组织STING和HIF-1α表达上调,肾细胞凋亡率升高,肾组织cleaved caspase-3表达上调,H组Bcl-2/Bak比值降低,HC组Bcl-2/Bak比值升高(P<0.05);与H组比较,HC组血清BUN、Scr浓度和Paller评分降低,肾组织STING表达下调,HIF-1α表达上调,肾细胞调亡率降低,HC组肾组织cleaved caspase-3表达下调,Bcl-2/Bak比值升高(P<0.05)。结论STING参与了HSR大鼠急性肾损伤的过程,与上调HIF-1α表达有关。

VX-765对急性快动眼睡眠剥夺幼鼠认知功能的影响

目的评价VX-765对急性快动眼睡眠剥夺幼鼠认知功能的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠36只,3~4周龄,体重52~101 g,按照随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、急性快动眼睡眠剥夺组(AREM组)和VX-765组(V组)。采用改良多平台水环境法建立大鼠急性快动眼睡眠剥夺模型。V组每天9:00尾静脉注射VX-765溶液10 mg/kg,连续4 d。C组和AREM组尾静脉注射等容量生理盐水。大鼠睡眠剥夺期间行Morris水迷宫及新物体识别实验,连续4 d。于第5天水迷宫和新物体识别实验结束后处死大鼠取海马,采用Western blot法测定IL-1β和IL-18的表达。结果与C组比较,AREM组和V组大鼠新物体识别实验潜伏期延长,新物体探究时间缩短,头部探究次数减少,新物体探索百分比和辨别指数降低,Morris水迷宫实验穿越平台次数减少,目标象限停留时间缩短,海马IL-1β和IL-18表达上调(P<0.05);与AREM组比较,V组大鼠新物体识别实验潜伏期缩短,新物体探究时间延长,头部探究次数增多,新物体探索百分比和辨别指数升高,Morris水迷宫实验穿越平台次数增多,目标象限停留时间延长,海马IL-1β和IL-18表达下调(P<0.05)。结论VX-765可改善急性快动眼睡眠剥夺幼鼠的认知功能,与抑制海马炎症有关。

STING信号通路在CORM-3减轻肝缺血再灌注大鼠肝细胞焦亡和凋亡中的作用

目的评价干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路在一氧化碳释放分子-3(CORM-3)减轻肝缺血再灌注大鼠肝细胞焦亡和凋亡中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠48只,9~11周龄,体重320~380 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、CORM-3组(C组)和STING激动剂ADU-S100组(A组)。IR组、C组和A组采用可逆性结扎肝左中叶肝动脉、门静脉及胆管分支45 min后恢复灌注的方法建立肝缺血再灌注损伤模型。C组于再灌注即刻股静脉注射CORM-34 mg/kg,S组、IR组和A组股静脉注射含二甲基亚砜的等容量生理盐水。股静脉注射后1.5 h,A组腹腔注射ADU-S10010 mg/kg,S组、IR组和C组腹腔注射等量生理盐水。再灌注3 h时,采用速率法检测血清ALT和AST浓度。再灌注12 h时处死,取肝组织,采用比色法检测一氧化碳(CO)含量,进行肝损伤评分,采用Western blot法检测IL-1β、IL-18、Bcl-2、Bax、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化IRF3(p-IRF3)、STING、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)和活化的caspase-1的表达,采用免疫荧光染色法确定肝细胞焦亡率和凋亡率。结果与S组比较,IR组血清ALT和AST浓度、肝损伤评分、CO含量、肝细胞焦亡率和凋亡率升高,IL-1β、IL-18、p-IRF3、STING、NLRP3、GSDMD和活化的caspase-1表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05);与IR组比较,C组血清ALT和AST浓度、肝损伤评分、肝细胞焦亡率和凋亡率降低,CO含量升高,IL-1β、IL-18、p-IRF3、STING、NLRP3、GSDMD和活化的caspase-1表达下调,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05);与C组比较,A组血清ALT和AST浓度、肝损伤评分、肝细胞焦亡率和凋亡率升高,CO含量降低,IL-1β、IL-18、p-IRF3、STING、NLRP3、GSDMD和活化的caspase-1表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论CORM-3减轻肝缺血再灌注大鼠肝细胞焦亡和凋亡的机制可能与抑制STING信号通路激活有关。

2020年中考语文图文转换试题解析策略及演练(上)

【考点透视】新版《语文课程标准》提出“积极从生活中学语文”以及“初步具备搜集和处理信息的能力”的学习要求。在此理念的指导下,侧重考查考生提取转换能力的“图文转换”题以其形象直观、材料丰富、紧贴生活的特点而越来越受中考命题者的青睐。