抑制AMPK蛋白激酶在脑出血后小鼠的神经保护作用及机制研究

目的研究脑出血后抑制AMPK蛋白激酶的神经保护作用及机制。方法108只10~12周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为药物干预组、对照组、假手术组,每组各36只。药物干预组建模,对照组、假手术组不建模。药物干预组在造模后立即腹腔注射Compound C(20 mg/kg),对照组于同等时间给予等量0.9%氯化钠溶液腹腔注射,假手术组不给予任何药物,麻醉后打开颅腔,找到脑出血部位却不予止血处理,然后缝合颅腔。统计分析3组海马CAI区、大脑皮质的TUNEL阳性细胞数、细胞色素C阳性细胞数。结果假手术组小鼠海马CAI区、大脑皮质TUNEL阳性细胞数、细胞色素C阳性细胞数均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);药物干预组小鼠海马CAI区、大脑皮质TUNEL阳性细胞数、细胞色素C阳性细胞数均低于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脑出血后抑制AMPK蛋白激酶的神经保护作用显著,可有效保护脑出血后神经细胞功能、减轻因AMPK蛋白激酶诱发的神经细胞凋亡效应,对脑出血后神经细胞凋亡起到抑制作用。

抑制AMPK介导上调Bim在大鼠蛛网膜下腔出血后早期皮层神经元凋亡中的影响

观察抑制AMPK介导上调Bim对大鼠SAH后早期皮层神经元凋亡的影响。方法 选择108只SPF级雄性大鼠,同一条件饲养1周后建立SAH模型,将大鼠随机分为假手术组、药物干预组、盐水对照组。进行AMPK mRNA、p-AMPK组织细胞定位,检测造模后不同时间点额底皮质相关蛋白表达情况。结果 SAH造模后AMPKα mRNA表达与盐水对照组、假手术组差异显著(P<0.05);SAH组p-AMPK、Bim、caspase-3蛋白在造模后不同时段呈高表达,组间比较P<0.05;与假手术组神经行为学评分相比,SAH组大鼠明显较低,经过Compound C干预,大鼠神经行为评分提升。结论 AMPK通路在大鼠SAH早期脑损伤所致皮层神经元凋亡中有参与作用,抑制AMPK介导上调Bim,可对神经元起到保护作用。

胶质瘤中HuR通过上调PTBP1表达激活Akt通路对胶质瘤细胞的作用研究

目的探讨人类抗原R(HuR)在胶质瘤中的作用及其可能的作用机制。方法收集胶质瘤组织和正常对照组织各21例。体外培养正常胶质细胞株SVGp12和人胶质母细胞瘤来源的细胞株U251,qRT-PCR检测组织和细胞中HuR和多嘧啶结合蛋白1(PTBP1)mRNA表达;Western Blot检测组织和细胞中HuR、PTBP1、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和蛋白激酶B(Akt)蛋白表达;RNA结合蛋白免疫沉淀实验检测HuR对PTBP1的调控作用;CCK-8检测细胞活力;Ed U实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与正常对照组相比,胶质瘤组HuR mRNA和蛋白表达、PTBP1的mRNA和蛋白表达显著升高(均P<0.05)。与SVGp12组相比,U251组细胞中HuR mRNA和蛋白表达、PTBP1 mRNA和蛋白表达显著升高(均P<0.05)。HuR通过结合PTBP1 mRNA调节PTBP1的表达。空白组和si-NC+oe-NC组细胞中各指标差异无统计学意义(均P>0.05)。与si-NC+oe-NC组相比,si-HuR组+oe-NC组细胞中HuR、PTBP1 mRNA和蛋白表达均显著降低(均P<0.05),48 h和72 h的细胞活力以及细胞增殖能力显著降低(均P<0.05),细胞凋亡显著升高(P<0.05),p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.05);与si-HuR+oe-NC组相比,si-HuR+oe-PTBP1组细胞中HuR mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(均P>0.05),PTBP1 mRNA和蛋白表达显著升高(均P<0.05),48 h和72 h的细胞活力以及细胞增殖能力显著升高(均P<0.05),细胞凋亡显著降低(P<0.05),p-Akt/Akt蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论HuR可能通过上调PTBP1表达激活Akt通路促进胶质瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。