滋阴清热功效助力生地黄抗抑郁作用探究

目的:基于阴虚内热证抑郁模型评价滋阴清热功效在生地黄抗抑郁中的作用及生地黄和梓醇抗抑郁的机制。方法:选用甲状腺素致阴虚内热证模型,并以阳虚、气虚、血虚作为对照,结合对常规抗抑郁药效测试指标、反映抑郁症的一些重要生物分子与滋阴清热功效指标的关联分析,综合评定滋阴清热功效在生地黄抗抑郁中的作用及生地黄和梓醇抗抑郁机制。结果:生地黄逆转了阴虚内热证模型小鼠的阴虚内热总得分,饮食量和体质量,血浆环磷酸鸟苷水平,冷热板中热区比例,肝脏、胸腺系数异常降低,肛温,饮水量,三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素、环磷酸腺苷、Ca^(2+)-ATP酶、Na^(+)-ATP酶水平,冷热板跨区次数和跨区距离的异常升高(P<0.05,P<0.01)。生地黄和梓醇显著逆转了雌雄阴虚内热证模型小鼠的抑郁行为且没有性别差异,包括逆转了FST不动时间升高和SPT中糖水偏爱度降低(P<0.05,P<0.01),但生地黄对阳虚和气虚小鼠的抑郁行为无改善。生地黄和梓醇还显著逆转了阴虚内热证抑郁模型小鼠海马COX-2/NLRP3信号通路的异常上调(P<0.05,P<0.01)和海马齿状轮回区尼氏小体数量锐减和神经核阳性表达降低。此外,生地黄的滋阴清热药效和其对阴虚内热证抑郁模型小鼠的抗抑郁作用、海马COX-2/NLRP3信号通路蛋白的下调呈极高度正相关(r>0.8),生地黄和梓醇抗抑郁作用与其对海马COX-2/NLRP3通路的下调呈极高度正相关(r>0.8)。结论:滋阴清热功效助力生地黄的抗抑郁作用,生地黄改善阴虚内热型抑郁症的科学内涵可能涉及生地黄中的主要活性成分梓醇下调COX-2/NLRP3信号通路抑制神经元损伤。

白芍药汁炙黄药子的炮制减毒工艺及其机制研究

该研究首次探究白芍药汁炙黄药子的炮制减毒工艺,并进一步探索其减毒机制。采用3因素3水平正交试验法制备白芍药汁炙黄药子炮制品9个,以高效液相测定黄药子炮制前后主要肝毒性成分黄独素B含量下降为依据进行减毒工艺的初步筛选,在此基础上,选取黄药子生品及代表性的炮制品以2 g·kg^(-1)(相当于临床等效剂量)灌胃给予小鼠21 d,末次给药24 h后,取血清和肝组织,结合反映肝功能的血清生化指标及肝脏组织病理进一步筛选验证工艺,然后借助试剂盒法检测肝组织脂质过氧化及抗氧化指标,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝脏醌氧化还原酶(NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶(glutamate-cysteine ligase,GCLM)蛋白表达进一步探究炮制减毒机制。结果表明白芍药汁炙黄药子各炮制品均能不同程度降低黄独素B的含量并改善黄药子诱导的肝损伤,其中A_(2)B_(2)C_(3)炮制工艺能使黄药子生品诱导的过高的谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平分别降低50.2%和42.4%(P<0.01,P<0.01),白芍药汁炙黄药子炮制品能不同程度逆转黄药子生品诱导的小鼠肝脏NQO1和GCLM的蛋白表达水平的降低(P<0.05或P<0.01),并能不同程度逆转小鼠肝脏丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平的升高以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)、谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)水平的降低(P<0.05或P<0.01)。综上,该研究表明白芍药汁炙黄药子的最佳炮制减毒工艺为A_(2)B_(2)C_(3)组合,即“10%的白芍药汁闷润黄药子饮片,在130℃炮制11 min”,并且减毒机制涉及增强肝脏NQO1和GCLM抗氧化蛋白表达及相关抗氧化酶水平。

生地黄抗抑郁性别差异研究

该文首次基于复合中医阴虚内热证型的经典抑郁症模型评价生地黄抗抑郁作用的性别差异特点及其机制。采用目前相对更公认也是应用最广的甲状腺素致阴虚内热模型复合经典抑郁症模型(慢性不可预见性温和应激模型)综合建立阴虚内热证型抑郁症模型,并利用雌、雄小鼠同时给药,结合对雌、雄动物滋阴清热指标、常规抗抑郁药效测试指标、反映抑郁症发病和防治机制的一些重要生物分子的检测分析及抗抑郁药效与滋阴清热功效和生物机制的关联分析,综合评定生地黄对于阴虚内热证型抑郁症的抗抑郁作用性别差异特点及其机制。生地黄对雌、雄模型小鼠都表现出抗抑郁作用且其抗抑郁效果表现出性别差异性,其中对雌性的抗抑郁效果优于雄性;生地黄对雌性海马神经元损伤、神经核阳性区域、突触后致密区蛋白95和突触素的蛋白表达升高效果优于雄性。此外,给药生地黄还显著逆转雌、雄模型小鼠海马核因子(NF)-κB/环氧合酶2(COX2)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)通路蛋白表达的异常上调。生地黄对于雌性阴虚内热证型抑郁症模型小鼠的抗抑郁效果优于雄性,其抗抑郁性别差异机制可能涉及改善神经元损伤并增强神经可塑性;生地黄对于阴虚内热证型抑郁症的抗抑郁机制可能与下调NF-κB/COX2/NLRP3通路以减少神经元损伤并增强神经可塑性有关。