两株白色不产孢烟曲霉形态学及毒力研究

目的将先后发现的两株白色不产孢的烟曲霉A1j与A2j进行对比,观察其在形态学和毒力方面是否有差异。方法通过真菌基因组DNA的保守序列ITS和β-tub的测序对A2j进行菌种鉴定;采用小培养方法在显微镜下比较A1j、A2j及标准株Af293的菌丝形态;观察A1j和A2j在不同培养时间和不同培养基上生长的菌落形态;在小鼠模型上测试其毒力变化。结果通过ITS和β-tub的测序A2j被鉴定为烟曲霉;小培养发现A1j和A2j与标准菌株Af293不同,两者均为不产孢的烟曲霉,且两者生长速度明显不同;培养不同的时间和不同的培养基均不能诱导A1j和A2j产色和产孢,但是50℃下,A1j被限制生长,而A2j却能生长;在免疫抑制的小鼠模型中,与标准菌株Af293相比,A1j的毒力下降,但A2j小鼠的死亡数量、死亡速度与Af293相当,表明A2j的毒力并没有降低。结论新发现的白色不产孢烟曲霉A2j与A1j在生长速度、耐热性和毒力方面均不同。

肺炎克雷伯杆菌荚膜多糖经EGFR途径诱导支气管上皮细胞分泌细胞因子

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在肺炎克雷伯杆菌(KP)荚膜多糖(CPS)诱导人正常支气管上皮BEAS-2B细胞分泌炎性细胞因子中的作用。方法:体外培养KP并提取CPS,用不同浓度的CPS刺激BEAS-2B细胞,通过ELISA检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)的水平,并于刺激后不同时点通过Western blot检测EGFR的磷酸化水平;EGFR抑制剂AG1478预处理BEAS-2B细胞后,Western blot检测ERK磷酸化水平,间接免疫荧光染色检测p65的核转位,并观察细胞上清中TNF-α和IL-8的变化情况;最后经ERK抑制剂PD98059和NF-κB抑制剂PDTC分别预处理后用CPS刺激细胞,ELISA检测细胞上清中TNF-α和IL-8的水平。结果:10 mg/L CPS刺激BEAS-2B细胞12 h能够显著诱导其分泌TNF-α和IL-8;Western blot和间接免疫荧光染色检测结果显示,CPS刺激可显著诱导BEAS-2B细胞中EGFR和ERK的磷酸化及p65的核转位。经EGFR抑制剂AG1478预处理细胞后,ERK的磷酸化水平显著降低,NF-κB的核转位减少;而在EGFR、ERK及NF-κB抑制剂预处理的细胞的上清中,TNF-α和IL-8分泌水平均明显降低(P<0.05)。结论:肺炎克雷伯杆菌荚膜多糖能够通过EGFR激活ERK和NF-κB信号通路,进而诱导人正常支气管上皮细胞分泌炎性细胞因子TNF-α和IL-8,提示EGFR可能是KP感染引起炎症反应的关键因子。

“专升本”院校之思想观念转变

随着中国经济的高速发展,国家对高等教育的投入逐年上升。近年来,一大批高职高专以及地方院校刮起了一股高校“升格热”以及“改名热”。升格或者改名后的高校虽然可以迎来新的发展机遇,但同时也面临着严峻的挑战,如思想观念的转变等。

根瘤农杆菌T-DNA插入介导的烟曲霉耐药突变菌的分子机制

目的探讨一株根瘤农杆菌T-DNA插入介导的烟曲霉突变菌(M7)耐药性产生的分子机制。方法通过基因组重测序鉴定M7中T-DNA的插入位置并分析SNP位点,然后在烟曲霉A1160背景上将相应的突变基因进行敲除并验证。敲除成功后,比较分析敲除菌和野生型菌株的表型。结果通过基因组重测序发现M7中T-DNA的插入位点位于基因Afu5g08910中,但其敲除菌(ΔM7)并未发现有耐药性产生。SNP分析以及验证实验发现,M7中Cyp51A第54位氨基酸由Gly突变成Arg是M7产生耐药性的根本原因。结论M7突变株耐药性产生的原因并非Afu5g08910基因突变,而是Cyp51A位点突变所致。

烟曲霉突变体库的构建及伊曲康唑耐药菌的筛选

目的构建烟曲霉突变体库并筛选耐药突变子,初步探讨烟曲霉的耐药机制。方法利用根瘤农杆菌T-DNA介导的插入突变构建烟曲霉突变体库,用伊曲康唑对突变体库进行筛选,挑取烟曲霉耐药突变株。结果利用根瘤农杆菌T-DNA插入突变,本研究获得了1805株突变子,诊断PCR显示突变子基因组DNA上均含有潮霉素标记,说明T-DNA均插入到了宿主的基因组上。通过筛选,本研究成功获得了16株烟曲霉伊曲康唑耐药菌,其中有两株对两性霉素B表现为不同程度的耐药性。结论通过构建烟曲霉突变体库以及耐药突变子筛选获得了16株烟曲霉耐药菌,为进一步研究烟曲霉的耐药机制奠定了基础。

信息技术在《医学检验仪器与技术》课程教学中的应用研究——以高效色谱分析仪为例

随着科技进步和信息技术的发展,《医学检验仪器与技术》课程的教学改革成为必然要求。本文剖析了该课程传统教学存在的局限性以及信息技术在该课程教学中的必要性。以高效液相色谱仪教学内容为实证,从教学的教材、目标、重难点、策略与方法、实施、特色与效果、反思与持续改进进行分别阐述和解析,以期为信息化教学在新医科背景下的运用与发展提供参考依据。