重视IgG指数和Reiber图对寡克隆区带的补充及其在神经免疫疾病诊治中的作用

临床医生常常高度关注寡克隆带在多发性硬化(MS)中的诊断意义,但寡克隆区带(OCB)在亚洲人群的灵敏度远低于西方国家,仅关注OCB不足以满足日益增长的神经免疫疾病的诊断需求。临床医生可以使用多维度的生物标志物补充OCB的不足。IgG指数是鞘内合成免疫球蛋白G(IgG)的定量指标,成本较低且易于获取。但IgG指数因其基于脑脊液血浆浓度商之间是线性关系的假设,在血脑屏障(BBB)受损时,阴性率高,诊断价值降低。Reiber图是基于大样本研究提出的浓度商双曲线,建立在非线性关系之上,虽然国内鲜有报道,但是在国外评价颇高。在缺乏OCB阳性的情况下,通过IgG指数和Reiber图评估患者BBB的完整性和鞘内合成,无论对MS诊断的时间多发性确定还是其他神经免疫疾病的诊断和治疗方案都具有指导的意义。

基于谱元法的Rayleigh波频散特征计算与模态叠加耦合机理研究

为了提升Rayleigh波勘探成层结构力学参数的精细化水平,基于谱元法,构建了弹性层状半无限结构的Rayleigh波频散方程。针对半无限土基和“上软下硬”这2种规则成层结构,运用谱元法与快速矢量传递法对比计算了Rayleigh波多阶模态的频散曲线。结果表明:谱元法与解析法计算结果之间的相对误差在0.05%以下,具有较高的计算精度。在此基础上,进一步针对“上硬下软”的典型路面结构、含“软夹层”和含“硬夹层”的复杂成层结构,结合谱元法,推导了表面位移的计算方法,通过分解Rayleigh波各模态相速度对表面位移能量的贡献,建立了一种基于谱元法确定复杂成层结构中Rayleigh波多模态叠加耦合机理的半解析方法,此方法确定的Rayleigh各阶模态叠加耦合频散特征与速度-应力有限差分方法仿真结果之间具有很好的吻合度,表明基于谱元法计算Rayleigh波频散曲线并以此揭示成层结构中Rayleigh波模态叠加耦合机理是合理、可行的。

结核性脑膜炎的伪装者:自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星型细胞病

自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星型细胞病(autoimmune glial fibrillary acidic protein astrocytopathy,A-GFAP-A)作为一种新发现的自身免疫性中枢神经系统炎症性疾病,可以导致脑膜脑脊髓炎、运动障碍、视力模糊、癫痫等临床表现。该疾病与结核性脑膜炎(tuberculosis meningitis,TBM)在临床症状、影像学和脑脊液检查方面有许多相似之处,已有多例国内外的误诊案例报道。A-GFAP-A诊治的延误可引起严重的后果,作者在分析多个误诊案例的基础上提出了若干鉴别诊断的建议:分析患者的血液特征、炎症指标,以及脑脊液中腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)水平、淋巴细胞数量和蛋白质含量的变化并结合GFAP-IgG抗体检测和A-GFAP-A特有的影像学征象进行鉴别,以期降低A-GFAP-A在临床中的误诊率。

神经系统自身免疫性疾病发病机制与治疗研究进展

神经系统自身免疫性疾病是以自体免疫细胞、免疫分子等攻击神经系统为主要病理机制的自身免疫性疾病，可发生在中枢神经系统、周围神经系统及神经．肌肉接头处，导致神经元或轴索损伤、髓鞘脱失、神经-肌肉接头破坏等病理改变。在中枢神经系统以多发性硬化（MS）、视神经脊髓炎（NMO）为代表，在周围神经系统以急性炎性脱髓鞘性多发性神经病（AIDP）如格林-巴利综合征（GBS）为代表，

介绍一种改进的、简便的凝胶迁移滞留试验法

目的 :改进凝胶迁移滞留试验 (EMSA)方法 ,运用该法检测新蛋白。方法 :抽提与定量核蛋白、DNA探针标记与纯化 ,探针与蛋白质的结合、电泳及放射自显影。结果 :采用本法简便、节约、灵敏度高、图像清晰、有可比性及重复性 ,成功运用于NF-κB及POT蛋白的检测。结论 :此法在本实验组运用过 ,可靠 ,值得应用与推广。

大鼠重症急性胰腺炎胰腺蛋白组学的初步研究

目的观察牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的胰腺组织在不同时间点蛋白组学的变化。方法 36只SD大鼠分为假手术组、SAP组,分别于24 h、48 h、72 h 3个时间点处死大鼠,每时间点6只。动物经胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱发SAP,对照组以生理盐水代替5%牛黄胆酸钠行假手术。通过双向电泳分离、硝酸银染色和图谱分析模型组与对照组蛋白点的差异。结果牛磺胆酸钠诱导出SAP典型组织病理学改变,伴随有胰外肺、肾、胃肠器官的损伤。通过图像分析软件分析胰腺组织蛋白组学变化:24 h时SAP组与假手术组有46个差异点,其中9个点蛋白上调,37个点下调;48 h时SAP组与假手术组有97个差异点,其中43个点蛋白上调,54个点下调;72 h时间点SAP组与假手术组有80个差异点,其中10个点蛋白上调,70个点下调。结论牛磺胆酸钠诱导的大鼠SAP模型胰腺组织在不同时间点蛋白组学的变化存在差异。

L-精氨酸制备大鼠急性轻症胰腺炎模型的研究

目的建立一种操作简单、病变典型、稳定性好的大鼠急性轻症胰腺炎模型。方法大鼠腹腔内分次剂量L-精氨酸注射（3×1g／kg）。注射后6、12、24、48、72h观察血清淀粉酶水平、胰腺病理学改变厦胰腺组织湿／干质量比值的变化。空白对照组以生理盐水代替，6h时处死。结果注射L-精氨酸6h后大鼠即出现典型的急性轻症胰腺炎病理改变，24h达高峰，48h出现少量胰腺细胞坏死，72h病变减轻；胰腺组织湿／干质量比值变化、病理评分呈时相性变化。血清淀粉酶6h时显著增高，24h达高峰，为对照组的3—4倍，72h接近正常水平。结论分次剂量L-精氨酸腹腔内注射诱导的大鼠胰腺炎症改变符合急性轻症胰腺炎病理学的改变，是值得推广的动物模型．

自身免疫性胶质纤维酸蛋白星形细胞病

免疫反应是指机体对于异己成分或者变异的自体成分做出的防御反应。针对机体自身成分的特异性免疫反应常导致靶器官的损伤，引发自身免疫性疾病的产生。中枢神经系统自身免疫性炎症性疾病（autoimmune-inflammatorydiseases，AID）是发生在中枢神经系统的一组自身免疫性疾病综合征，包括了视神经脊髓炎谱系疾病（neuromyelitisopticaspectrumdisorders，NMOSD）、多发性硬化（multiplesclerosis，MS）、Balo硬化等疾病。由于NMOSD、MS和Balo硬化均与抗体引起的星形细胞免疫异常有关，被认为是抗体依赖性星形细胞疾病。

水通道蛋白-4抗体阳性患者血清抗Hu、Yo抗体的检测

目的观察抗Hu抗体和抗Yo抗体在水通道蛋白-4(AQP4)抗体阳性患者中的出现情况。方法检测收集80例AQP4抗体阳性患者,以间接免疫荧光方法检血清抗Hu抗体、Yo抗体,并回顾性分析抗Hu抗体、抗Yo抗体阳性患者的临床资料及诊断。AQP4抗体检测:先以转染AQP4基因的人胚肾293细胞结合血清中的AQP4抗体,之后采用免疫荧光方法检测;抗Hu抗体、抗Yo抗体检测:先以猴小脑冰冻切片结合血清中的抗体,之后采用免疫荧光法检测。结果 80例患者中,均未检测到抗Hu抗体,仅1例NMO患者血清抗Yo抗体阳性。结论抗Hu抗体和抗Yo抗体在无肿瘤的AQP4抗体阳性患者中少见。

引入循证医学概念,提高医学教育质量

循证医学不但给临床医生提供了科学的思维方法,从而对疾病的诊治更准确、更有效、更安全,而且也有利于促进教育观念的更新。医学教育中引入并实践循证医学,实质是让学生参与提出问题、分析问题、解决问题过程,主动投入医学实践,激发学习兴趣,避免填鸭式的被动接受知识的模式,培养临床思维能力,改革旧的医学教育模式。

核因子-кB与炎症性肠病

通过转录因子调节新膜免疫系统的各种细胞因子的基因表达来治疗炎症性疾病显得越来越重要,对于炎症性肠病(IBD)的治疗也不例外。本文就核因子kappaB(nuclear factor,NF-кB)与炎症性肠病的关系作了综述。

水通道蛋白-4在大鼠消化器官的表达与分布

目的探讨水通道蛋白-4在SD大鼠消化器官的表达与分布。方法动物麻醉处死后取胃、空肠、回肠、结肠、直肠、胰腺和肝脏等器官,常规进行脱水、固定、石蜡包埋、切片(4μm)后以链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(SABC)检测水通道蛋白-4蛋白在上述组织中的表达。结果AQP4在正常SD大鼠消化道中的表达和分布具有选择性:食管和胃的上部基本不表达AQP4。从胃的中下部始见表达AQP4,集中于深部粘膜的基底部腺体。胃腺表达AQP4的细胞类型为壁细胞。十二指肠、空肠和回肠富含AQP4,但少于胃部,AQP4在十二指肠、空肠和回肠出现的位置主要粘膜深部的腺隐窝。近端结肠的局部腺隐窝可见少量AQP4表达,远端结肠和直肠组未见AQP4表达。胰脏和肝胆亦可见微量AQP4表达。结论SD大鼠下段胃和小肠是AQP4主要表达的部位,近端结肠、肝胆和胰腺只微量表达AQP4。研究消化系统的疾病与AQP4的关系可能有助于我们进一步认识疾病的发病机制。

大鼠Crohn病模型制备的改进

目的 :用三硝基苯磺酸 (TNBS)和乙醇建立Crohn病 (CD)的二种大鼠模型 ,并比较不同乙醇用量对模型的影响。方法 :肠道灌注含TNBS 30mg的溶液 (5 %TNBS0 .6mL +无水乙醇 0 .3mL) ,建立大鼠CD模型 (称为TNBS/E1实验组 ) ,分别于 1,3,7,14 ,2 1,2 8d处死 ,观察各时点结肠大体形态和组织学改变 ,设肠道灌注生理盐水 (0 .9mL)、5 %TNBS(0 .6mL) +5 0 %乙醇 (0 .3mL)两个对照组 (分别称为盐水对照组及TNBS/E2 对照组 ) ,分别于 1、14d处死。结果 :TNBS/E1实验组大鼠致炎后第 1周主要表现为肠壁高度水肿、出血、糜烂、溃疡形成及大量中性粒细胞浸润的急性炎症 ;第 2周后有类似于铺路石样征 ,甚至节段性炎症 ,光镜发现在粘膜下出现淋巴细胞聚集 ,裂隙溃疡、肉芽肿形成 ;2 1d后溃疡开始愈后 ,炎症慢性化 ,大体形态开始恢复正常 ,但光镜下仍有明显炎症反应。TNBS/E2 对照组大鼠的个体差异很大 ,在第 14天时大部分肠壁形态基本恢复正常 ,光镜下炎症表现差别较大。结论 :5 %TNBS0 .6mL +无水乙醇 0 .3mL灌肠造成的模型与人类CD近似 ,炎症持续时间较长 ,是一种研究CD发病机制和评估药物疗效的工具。

浅谈本科生传统临床见习带教的利弊及其改革

新纪元下的医学科学发展,需要对传统的临床医学教学进行许多的改进。临床见习带教是医学理论通向临床实践的桥梁,它的改革对临床医生的培养具有很重要的意义。本文从一名从事内科临床带教教师的角度,浅谈了传统带教的优点与不足,并讲述了科学带教的经验及观点:不放弃好的传统带教方法,但必须把握现代临床医学的发展趋势,把新的科学的教学手段融合到临床教学中,激发学生自主思考与科学思维,发挥主观能动性,提高临床见习的质量。

人胶质纤维酸性蛋白自身抗体检测方法的建立

目的:建立一种检测人血清和脑脊液中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体的方法。方法:以大鼠小脑和海马基质作为初筛方法。建立过表达胶质纤维酸性蛋白的HEK-293T细胞模型。间接免疫荧光检测来自520例患者配对的血清与脑脊液样本。结果:大鼠小脑、海马基质检测结果显示,共有22份脑脊液样本和2份血清样本中有IgG结合于软脑膜、脑膜下,呈线性荧光模式。IgG亦结合于脑实质各层胶质细胞,终突包绕在微血管的周围,尤其在小脑分子层表现为Bergmann状放射状。荧光双标技术显示IgG结合位置与GFAP表达的位置完全一致。表达GFAPα,ε的HEK-293T细胞模型检测结果显示22例初筛阳性的脑脊液标本中,21例(95.4%)可被转染细胞检测出GFAPα或ε抗体阳性,其中16例(76.2%)GFAP-α和GFAP-ε抗体双阳性,5例(23.8%)纯GFAP-ε抗体阳性。2例初筛阳性的血清样本均为GFAP-α和GFAP-ε抗体双阳性。结论:基于脑组织和转染细胞的方法能成功检测患者GFAP抗体,有助于GFAP星形细胞病的诊治。

脂质体介导的p65反义寡核苷酸减轻急性出血坏死性胰腺炎大鼠的炎症损伤(英文)

目的观察脂质体介导的p65反义寡核苷酸(ASODN)预处理对大鼠急性出血坏死性胰腺炎(ANP)的抗炎作用。方法通过胰胆管的注射法诱导大鼠出血坏死性胰腺炎。其中72只大鼠分成假手术组,胰腺炎组、脂质体组、ASODN组(20OD/mL)、ASODN+脂质体组、随机ODN组,观察各组大鼠术后6h及12h胰腺病理、血清淀粉酶、胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)及NF κB活性的变化。结果同假手术组相比,各处理组的血清淀粉酶活性、MDA、MPO水平、胰腺组织NF κB活性明显升高(P<0. 01)。各处理组间的血清淀粉酶的差别无统计学意义。同胰腺炎组相比,脂质体组和随机ODN组的胰腺病理评分、MDA、MPO、胰腺组织NF κB活性的差别无统计学意义(P>0. 05),而ASODN组、ASODN+脂质体组的胰腺病理评分,MPO、MDA、胰腺组织NF κB活性下降(P<0. 05),其中ASODN+脂质体组下降更为明显。结论脂质体介导的p65反义寡核苷酸能减轻ANP大鼠的炎症发展,NF κB参与了AP的发病机制,其p65ASODN对AP可能具有治疗效应。

IL-1Ra,IL-1Ra基因多态性与溃疡性结肠炎

IL - 1Ra,IL - 1Ra基因多态性与溃疡性结肠炎 (U C)的相关性研究是从遗传基因角度探讨了 UC的发病。通过对该方面深入研究可望进一步认识到 U C发病机制 。

水通道蛋白-4抗体的检测

视神经脊髓炎（neuromyelitis optica,NMO）是一种中枢神经系统的炎症性脱髓鞘性综合征,主要的临床特点包括严重的视力损害和脊髓损害,目前被认为与体液免疫紊乱有关。NMO体液免疫机制的进展促使了血清中特异性抗体的发现。

L-精氨酸诱导大鼠急性坏死性胰腺炎模型的建立

目的建立一种简便、典型的大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。方法大鼠腹腔内分两次注射大剂量0.574mmol.L-1(10%)L-精氨酸,注射后3、12、24和36h观察胰腺病理变化、血清淀粉酶和丙二醛水平。结果胰腺病理评分、血清淀粉酶、丙二醛水平在3h开始升高,随后维持在较高的水平。结论腹腔内注射大剂量10%的L-精氨酸能诱导典型的大鼠ANP模型,是值得推广的造模方法。