布氏杆菌和羊口疮血清抗体的检测与分析

布氏杆菌病(brucellosis)是由布氏杆菌(brucella)引起的一种人畜共患慢性传染病,主要侵害生殖系统,可引起流产、不育和各种组织的局部病症。羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(Orfvirus,OrfV)引起的主要感染绵羊和山羊的一种急性人兽共患传染病,该病的传染性强,发病率高。这两种传染病不仅给羊产业带来巨大的经济损失,且存在社会公共卫生安全隐患。本试验采用虎红平板凝集试验和间接ELISA方法对临床上采集的423份羊血清样本进行了布氏杆菌和羊口疮抗体的检测。结果:血清中的羊布氏杆菌抗体为阴性;羊口疮疫苗免疫羊血清样本阳性率为62.55%(152/243),未免疫羊血清样本阳性率为14.44%(26/180)。表明采样羊群不存在布氏杆菌感染,但存在羊口疮病毒感染。

鸭疫里默杆菌LAMP-LFD快速检测方法的建立与初步应用

根据鸭疫里默杆菌(Riemerella anatipestfer,RA)ompA基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物和1条带有异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的DNA探针,利用横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物。通过对反应条件包括温度、时间、内、外引物浓度比、Bst DNA 2.0聚合酶浓度、dNTPs浓度及Mg^(2+)浓度等优化后,建立了RA的LAMP-LFD检测方法。结果显示:在64℃下运用LAMP扩增核酸到结果判读只需33 min;LAMP-LFD可特异性检测鸭疫里默杆菌,巴氏杆菌核酸、大肠杆菌核酸、沙门菌核酸、葡萄球菌核酸、鸭瘟病毒均未检测出;LAMP-LFD对pMD19-T-ompA最低检测浓度为1.83×10^(0)copies/μL,其敏感度是PCR的1000倍。利用PCR和LAMP-LFD检测22份疑似RA临床样本,两者检出符合率为100%。研究建立的LAMP-LFD检测方法能快速、特异地检测RA,可作为早期诊断和检测RA的有效手段。