代谢综合征与下丘脑功能改变

下丘脑对瘦素/胰岛素敏感性降低导致的能量平衡调节异常和下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱参与了代谢综合征的发生发展,下丘脑功能改变是代谢综合征重要的中枢病理生理学机制。代谢综合征下丘脑功能改变与局部炎性细胞因子表达增加有关,IKK/NF-κB激活可能是下丘脑功能改变的关键分子机制。

青春期前邻苯二甲酸二丁酯持续暴露对大鼠睾丸发育的影响

目的:研究青春期前邻苯二甲酸二丁酯(DBP)持续暴露对睾丸发育的影响。方法:21日龄断乳青春期前雄性SD大鼠随机分为对照组(n=24)和实验组(n=54),每日分别用玉米油或DBP玉米油溶液灌胃,DBP暴露剂量分别为50mg/(kg.d)(低剂量组,n=18)、200mg/(kg.d)(中剂量组,n=18)和600mg/(kg.d)(高剂量组,n=18),各组动物持续暴露14、21、28d后(即PND35,PND42和PND49)断颈处死。记录大鼠体重变化,检测睾丸重量和体积、附属性器官重量及附睾精子,化学发光免疫分析法检测血清睾酮含量,苏木精-伊红染色观察睾丸组织形态学变化,测量生精小管平均直径及进行睾丸活检评分。结果:低剂量组PND35少量生精小管生精细胞排列紊乱,PND42和PND49睾丸、附属性器官发育及生精功能正常;中剂量组PND35和PND42生精细胞排列紊乱、数目减少,PND49生精小管内可见各级生精细胞及精子,睾丸未见萎缩,附属性器官发育正常;高剂量组大鼠体重增长减缓,血清睾酮水平低下,睾丸生精小管变性萎缩,生精上皮发育阻滞,生精细胞大量凋亡坏死,青春期大鼠睾丸萎缩,无精子,附睾、前列腺和精囊等附属性器官发育迟缓。结论:青春期前DBP持续暴露可损害睾丸组织发育和正常生精功能形成,其毒性效应具有剂量依赖性,高剂量DBP持续暴露引起的睾丸毒性在青春期前发育过程中不可修复,而低中剂量暴露引起的睾丸毒性在PND49之前可完全或部分逆转性恢复。

高等灵长类动物青春期启动的调控信号

下丘脑促性腺激素释放激素释放增加是高等灵长类动物青春期垂体-性腺轴激活的必需条件,中枢内神经递质和调质是调控青春期启动的重要信号,来自遗传基因和机体代谢的信号则可能参与青春期启动的时间调控。

核转录因子-κB激活在代谢综合征和2型糖尿病中的作用

代谢综合征是内脏肥胖、高血脂、高血压和胰岛素抵抗等因素综合作用的结果。越来越多的研究结果表明，核转录因子（NF）-κB是参与代谢综合征和相关联的2型糖尿病病理生理学机制的关键分子，可能成为干预治疗代谢综合征的新靶点。

NG108-15细胞系作为小鼠神经内分泌细胞模型的适合性

目的探讨NG108-15细胞系作为小鼠神经内分泌细胞模型的适合性。方法培养NG108-15细胞,大鼠及小鼠的下丘脑原代,观察其7 d后细胞生长情况,利用大鼠和小鼠的多个与神经内分泌有关的基因序列设计了两组不同的引物对该细胞系的总RNA进行基因扩增分析,试图分析该细胞系在基因表达水平的差异,以确定该杂合细胞在神经内分泌相关研究中的适合性。结果 7 d后三类细胞均有神经元的突触分化,但NG108-15细胞体积较大,成分散生长。大鼠和小鼠的原代培养细胞,则体积较小,细胞成簇生长,细胞间有明显的突触联系。荧光定量PCR显示,β-actin的扩增在两组细胞内扩增正常且无差异,说明两组细胞的起始模板量相等。但剩余的所有基因却只能在大鼠原代细胞中正常扩增,而在NG108-15细胞却扩增失败。所有基因均能在NG108-15细胞和小鼠原代细胞中进行扩增,且扩增效率无明显差异。所有来自小鼠的引物序列扩增正常,而来自大鼠的引物序列则除了内参基因β-actin扩增正常外,其他均扩增失败或扩增效率低下。结论在神经内分泌失调的研究中,该杂交瘤细胞更适合与小鼠动物的研究结果相对应。

汕头大学医学院教师成长中心建立的经验与思考

2009年,汕头大学医学院率先在国内成立了教师成长中心。中心的宗旨是"帮助教师提升教育质量,促进汕头大学医学院宗旨和目标的实现"。我们以帮助教师成长为目标,构建和实施全面的教师成长项目,为汕医教育质量的提升提供了有力保障。文章将分享汕医教师成长中心建立过程中的经验与思考,期望为我国的医学教师发展提供借鉴。

TNF-α对下丘脑神经元的影响研究进展

介绍了肿瘤坏死因子TNF-α的发现、结构及其作用的信号通路,并从神经元的发育、生存、离子平衡和神经递质释放等方面综述了近年来TNF-α对下丘脑的影响研究进展。

青春期单纯性肥胖雄性大鼠模型的实验研究

目的：以高脂饲料配方建立青春期单纯性肥胖雄性大鼠模型。方法：21d龄雄性清洁级SD大鼠随机分为对照组（n=28只，喂普通饲料）和实验组（n=45只，喂高脂饲料）。观察比较3-6周末（即鼠龄函9周）大鼠的体质量、Lee＇s指数、体长和附睾周围脂肪重量。结果：喂养后第3-6周末实验组体质量、Lee’s指数和附睾周围脂肪重量均高于对照组（P〈0．01）；第3周末实验组体质量已明显超过对照组（超重23．0％），随着大鼠周龄的增加，肥胖程度也在逐渐加重，至第6周末时体质量进一步超过对照组（超重26．6％）；实验组肥胖鼠29只，非肥胖鼠16只。结论：以高脂饲料喂养的青春期大鼠可致单纯性肥胖。

Sh-RNAi对NG108-15细胞膜受体基因TNF-R1的干扰

目的NG108-15细胞膜肿瘤坏死因子(TNF)受体(TNF-R)1在受到基因干扰后,阿黑皮素原(POMC)、神经肽(NP)Y和刺鼠相关肽(AGRP)神经内分泌基因受到干扰的情况。方法采用sh-RNAi基因干扰技术干扰TNF-R1的基因表达,并利用RT-PCR技术检测TNF-R1、POMC、NPY和AGRP基因的表达情况。结果针对TNF-R1受体的膜外半胱氨酸富集区1(CRD1)所设计的sh-1干扰序列,对TNF-R1受体的基因表达具有明显的下调作用,并进而对POMC、NPY和AGRP等神经内分泌基因产生程度不同的下调影响。结论可通过sh-RNAi干扰技术来治疗TNF-α诱发的下丘脑神经内分泌性疾病。

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯和邻苯二甲酸二丁酯联合染毒对青春期大鼠精子生成的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)联合染毒对青春期大鼠精子生成的影响。方法:6周龄SD大鼠(56只)随机分为染毒[375、750和1 500 mg/(kg.d)]组[予等质量DEHP和DBP混合物(溶解于玉米油中)灌胃]和对照组(予等量玉米油),每组14只。两组2、4周末断头各处死7只,并观察生精功能和附睾组织学改变。结果:染毒2周,750、1 500 mg/(kg.d)组睾丸内精子头数目、每日精子生成量和附睾精子总数及精子畸形率与对照组比有统计学意义(P<0.05);染毒4周,1 500 mg/(kg.d)组睾丸内精子头数目、每日精子生成量和附睾精子总数及精子畸形率与对照组比有统计学意义(P<0.05)。染毒2、4周,染毒组附睾管厚度与对照组比有统计学意义(P<0.01)。结论:DEHP和DBP联合染毒对青春期大鼠有明显的生殖毒性作用,可严重影响精子生成数量和质量,且对附睾有一定的毒害作用。

活性氧簇在NG108-15细胞分化过程中的差异表达

目的:研究活性氧簇(ROS)在NG108-15细胞分化过程中的表达,验证以NG108-15细胞株替代原代培养的下丘脑神经元进行氧化应激相关研究的可行性。方法:实验细胞分为NG108-15未分化组和NG108-15分化组,以原代培养的SD雄性乳鼠下丘脑神经元为对照组;用DHE荧光染色和流式细胞术检测各组ROS表达和生成。结果:NG108-15未分化组ROS表达明显高于对照组(P<0.05),但NG108-15分化组与对照组比无统计学意义。结论:NG108-15细胞经诱导分化后,神经元ROS的基础表达与原代培养的下丘脑神经元相似,可替代原代培养的下丘脑神经元进行氧化应激相关研究。

肿瘤坏死因子-α抑制剂己酮可可碱对糖尿病大鼠阴茎海绵体RhoA/Rho激酶信号通路的影响

目的:研究糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中RhoA/Rho激酶信号通路改变以及肿瘤坏死因子(TNF)吨抑制剂己酮可可碱(PTX)对该信号通路和阴茎勃起功能的影响。方法:SD大鼠分为对照组、糖尿病组和糖尿病药物干预组;高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素注射诱导糖尿病;腹腔埋置微渗透泵持续慢性给药;在体记录阴茎海绵体窦内压(ICP):ELISA检测血清TNF-α浓度;Western blot检测海绵体组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)以及RhoA/Rho激酶信号通路分子的蛋白表达水平。结果:与糖尿病组比,糖尿病药物干预组血清TNF-α浓度明显下降(P<0.01),阴茎海绵体组织中RhoA、ROCK1和p-MYPT1表达下调(P<0.05),eNOS和nNOS表达增加(P<0.05),阴茎ICP指数显著升高(P<0.05)。结论:TNF-α促进阴茎海绵体组织RhoA/Rho激酶信号通路的激活与表达上调,参与糖尿病性勃起功能障碍的发病机制:PTX对糖尿病大鼠的勃起功能有保护作用。

雄性大鼠交配实验模型的建立

目的详细阐述雄性大鼠交配实验模型的制作方法及应用前景。方法雌鼠去势后分别在实验前48h和4h皮下注射苯甲酸雌二醇20μg和黄体酮500μg以诱导雌鼠发情,用发情的雌鼠和雄鼠进行交配,从而对雄性进行相关研究。结果所有雌鼠发情状态良好,均能与雄鼠进行交配。结论此方法简单、方便,适合对雄性性行为进行相关研究。

邻苯二甲酸酯类对青春期大鼠生殖系统发育及睾丸组织铜、锌及铜/锌比值的影响

目的探讨邻苯二甲酸酯类对青春期大鼠生殖系统发育及睾丸中铜、锌含量及铜/锌比值的影响。方法6周龄SD大鼠84只,随机分为4组(A、B、C、D组),每组21只,每天称重,灌胃给于等质量DEHP和DBP的混合物,剂量分别为0(对照组)、375、750、1500mg/kg体重.d^(-1)。各组分别于染毒第1、2、4周末断头法处死7只大鼠,取睾丸和其它脏器,计算器官系数的变化。取约1mm^3福尔马林固定的睾丸组织,经硝酸消化,用原子吸收分光光度计测睾丸组织中铜、锌的含量,并计算铜/锌比值的变化。结果染毒1周,D组平均每日体重增加量显著低于对照组(P<0.05),C组和D组睾丸系数和精囊系数明显低于对照组(P<0.05),而前列腺系数则在各剂量组均明显低于对照组(P<0.01)。睾丸中锌的含量在C组与对照组比较,差别显著(P<0.05),在D组与对照组比较,差异有高度统计学意义(P<0.01),铜/锌比值在D组与对照组比较,差别明显(P<0.05)。染毒2周,D组睾丸系数、附睾系数、前列腺系数和精囊系数与对照组比较,明显降低(P<0.05),睾丸中铜的含量升高(P<0.05),锌的含量和铜/锌比值降低(P<0.05)。染毒4周,睾丸系数在D组与对照组相比差别明显(P<0.05),附睾系数、前列腺系数和精囊系数在C组明显降低(P<0.05),D组与对照组比较,差别有高度统计学意义(P<0.01),D组睾丸中锌的含量明显降低(P<0.05),铜,锌比值升高(P<0.05)。结论邻苯二甲酸酯类影响青春期大鼠生殖系统的发育,改变睾丸中铜、锌的含量及铜/锌的比值。

TNF-α对大鼠下丘脑原代细胞不同神经递质受体的影响分析

本研究利用PCR基因芯片,通过荧光定量PCR检测分析肿瘤坏死因子TNF-α对离体培养的大鼠下丘脑原代细胞不同神经递质受体的影响,以研究TNF-α对神经内分泌系统的影响。研究结果,发现后叶加压素1A受体(Avpr1a)、γ-氨基丁酸受体1 (Gabrr1)、离子型谷氨酸受体1 (Grin1)、5-羟色胺受体4 (Htr4)和转位蛋白(Tspo) 5个基因的表达有显著提高。另外肾上腺素能β2受体(Adrb2)、胆囊收缩素B受体(Cckbr)、毒蕈碱亚型胆碱能受体5 (Chrm5)、烟碱亚型胆碱能受体6 (Chrna6)、γ-氨基丁酸受体5,6 (Gabra5, Gabra6)、代谢型谷氨酸受体8 (Grm8)、5-羟色胺受体2c,3a (Htr2c, Htr3a)、生长抑素受体1 (Sstr1)和速激肽受体1(Tacr1) 11个基因的表达有明显下降。其中最为明显的是对离子型谷氨酸受体1 (Grin1)和速激肽受体1(Tacr1)的影响,分别是提高了3.12和降低了2.76。由此可见,TNF-α可以通过特定的信号传导途径调节下丘脑细胞中多种神经递质受体的转录表达水平,以改变神经元细胞对相应递质分子的应答水平和兴奋性,从而影响下丘脑组织内多种内分泌激素的释放量,并最终影响大鼠的神经内分泌功能。