基于NLRP3炎症小体活化探讨羚角钩藤汤治疗热性惊厥的作用机制

目的:探讨羚角钩藤汤对发育期大鼠热性惊厥的治疗作用及其机制。方法:SPF大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、羚角钩藤汤8.24、16.47、32.94 g/kg组,各组灌胃给予相应药液或蒸馏水,1次/d,连续21 d。给药1 h后,将大鼠置于(45±0.5)℃恒温水浴箱进行热水浴,隔日一次,连续10次,惊厥发作后,立即取出,记录惊厥潜伏时间、惊厥发作持续时间以及惊厥级别。末次给药后第2 d,取脑组织,检查脑组织病理改变;酶联免疫吸附法检测脑组织三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,ATP)、谷氨酸(Glutamic Acid,Glu)及γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)的含量;取外周血采用ELISA法检测血清NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IL-18含量;取海马以免疫印迹法(Western blot)测定NLRP3、IL-1β、IL-18及凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组脑组织CA1锥体细胞数目减少,排列紊乱;大鼠惊厥潜伏时间明显缩短、惊厥持续时间明显延长(P<0.01);脑组织ATP、Glu含量显著增高,GABA含量显著降低(P<0.01);血清NLRP3、IL-1β及IL-18含量显著增高(P<0.01);海马组织NLRP3、ASC、IL-1β及IL-18蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,羚角钩藤汤8.24、16.47、32.94 g/kg组海马CA1区神经元细胞病理损伤程度有所减轻;羚角钩藤汤32.94 g/kg组惊厥潜伏时间明显延长,且惊厥持续时间明显缩短;各剂量组IV+V级发生率呈剂量依赖性明显降低(P<0.05或P<0.01);各剂量组大鼠脑组织ATP、Glu含量明显降低,GABA含量明显增高(P<0.05或P<0.01);各剂量组血清NLRP3、IL-1β及IL-18含量均明显降低(P<0.05或P<0.01);各剂量组海马NLRP3、ASC、IL-1β及IL-18蛋白表达均显著下调(P<0.01或P<0.05)。结论:羚角钩藤汤可显著抑制热性惊厥所致大鼠脑损伤,其作用机制可能与调控NLRP3/IL-1β/IL-18通路,进而修复兴奋性神经递质与抑制性神经递质的失衡有关。