重庆地区儿童耐药结核病患者耐药情况及临床特征分析

目的本研究旨在分析重庆地区耐药结核病(DR-TB)患儿的耐药谱、耐药位点及临床特征。方法以2014年1月至2022年12月重庆医科大学附属儿童医院收集的296株结核分枝杆菌(MTB)菌株及其对应患儿为研究对象。采用比例法药物敏感性试验(DST)检测耐药性,用全基因组测序(WGS)检测耐药位点。回顾性分析DR-TB患儿的临床特征。结果经比例法DST检测,17.2%(51/296)菌株为DR-TB,WGS未发现新的耐药位点。敏感组240例,耐药组51例。耐药组女性、复治、重症结核病、肺结核合并肺外结核、使用二线药物、治疗失败或死亡比例均高于敏感组,但卡介苗接种率低于敏感组,差异均有统计学意义(P<0.05)。共288例患儿完成胸部CT检查,与敏感组相比,耐药组累及双侧肺部比例更高,累及肺叶数量也更多,更容易累及右下叶,坏死比例也更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与敏感组相比,耐药组患儿抗酸染色涂片≥1次阳性的比例更高,T-SPOT.TB阳性率更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重庆地区儿童DR-TB比例较高,耐药位点与成人相近。女性、复治、未接种卡介苗可能与DR-TB相关,DR-TB患儿肺野受累更广,更易出现肺坏死、扩散至肺外器官并进展为重症,且治疗失败或死亡比例较高。DR-TB患儿整体病原检测阳性率更高,但免疫学检查阳性率偏低,可能存在免疫功能抑制。

儿科本科学生对专业兼职班主任满意度的调查与分析

目的调查重庆医科大学儿科学院本科学生对专业兼职班主任的满意度及其影响因素,为提高医学本科生培养质量、优化医学本科生学业辅导提供参考。方法2023年8月,以重庆医科大学儿科学院儿科专业在校学生1211人为研究对象,对其专业兼职班主任工作满意度进行问卷调查,内容包括专业兼职班主任的学业指导、人文关怀、其他方面指导及本科生的收获和建议。对调查数据进行定量分析与质性分析。结果儿科本科生对专业兼职班主任的总体满意度较高,其中对“学业指导”和“人文关怀”的满意率均为91.00%,对“其他方面”的满意率为86.00%。在“收获”方面,52.86%的学生获得学业规划方面的指导,其余学生在考研、了解医学行业、平衡生活工作等方面获得指导;在“建议”方面,30.74%的学生在具体指导、线下指导及教师需要积极主动联系学生等方面提出建议。结论学院应该加强对专业兼职班主任的遴选和指导方法的培训,提升其综合能力,优化儿科本科生培养模式。

线上线下融合BOPPPS模式在小儿传染病学中的探索与实践

小儿传染病学是儿科系本科核心课程之一,在“互联网+教育”的助推下,为解决目前教学大纲不合理、教学课程内容散,学生的参与度低、课堂沉睡,思政元素缺乏或生搬硬套及成绩评定方式单一等痛点问题,研究通过重构教学大纲,将BOPPPS有效教学设计应用于课堂,并结合以案例为导向的教学法(case-based learning,CBL)、以团队为导向的教学(team-based learning,TBL)等教学法,提高学生参与度,唤醒课堂;结合专业特色及学情分析,进行润物无声的有效思政;打造多维度、多元化成绩评定体系,教师在关注学生学习获得感的同时,对学生平时的努力给予肯定,并反应在最终成绩中。这些务实的创新改革措施,最终赢得学生对本课程教学模式的认可,有利于学生的深度培养与优质成长。

儿童抗结核药物耐药比例法、微孔板法、全基因组测序检测对比研究

目的 探索微孔板法药物敏感性试验(DST)和全基因组测序(WGS)检测4种常用抗结核药物耐药性在儿科临床应用价值。方法 复苏培养阳性的结核分枝杆菌(MTB)保存菌株61株,分别行比例法、微孔板法和WGS检测异烟肼、利福平、乙胺丁醇和链霉素的耐药性。使用一致性检验检测微孔板法和WGS与比例法的一致性。结果 61株MTB菌株经比例法检测出48株(78.7%)全敏感菌株,13株(21.3%)对至少1种药物耐药,对4种药物共同耐药的3株(4.9%)。以比例法DST为金标准,微孔板法检测异烟肼耐药的敏感度、特异度和Kappa值分别为100.0%、92.0%和0.81,利福平分别为85.7%、98.2%和0.84,乙胺丁醇分别为0.0%、100.0%和0.00,链霉素分别为80.0%、98.0%和0.81;WGS检测异烟肼耐药的敏感度、特异度和Kappa值分别为90.9%、94.0%和0.79,利福平分别为100%、98.2%和0.92,乙胺丁醇分别为60.0%、94.6%和0.50,链霉素分别为80.0%、98.0%和0.81。结论 微孔板法和WGS对异烟肼、利福平和链霉素耐药检测均有较高的敏感度与特异度,与比例法结果高度一致,均可应用于临床。而对乙胺丁醇耐药性检测的一致性较差,建议使用比例法结合WGS结果来综合评判MTB乙胺丁醇的耐药性。

222例儿童结核性脑膜炎的临床特征及其预后影响因素分析

目的探讨分析儿童结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的临床特征及其预后影响因素。方法参照TBM诊断标准纳入2015年1月至2019年1月重庆医科大学附属儿童医院收治的222例TBM患儿,通过单因素和多因素logistic回归分析,评估患儿临床各种指标及因素对预后转归(治疗后6个月)的影响。结果222例患儿中,129例(58.11%)患儿预后良好,93例预后差,其中7例死亡。男童117例(52.70%),中位年龄6岁,其中<5岁者107例(48.20%);108例(4865%)有与结核病患者的密切接触史;110例(49.55%)确诊时长>21 d;137例(61.71%)患儿存在营养不良;205例(92.34%)结核病灶累及2个及以上部位或脏器,并以并发肺结核最常见[200例(90.09%)];病情分期(按照GCS评分)为Ⅱ期和Ⅲ期的患儿有144例(64.87%)。多因素logistic回归分析显示,脑脊液葡萄糖及氯化物含量高是患者预后良好的保护因素[OR(95%CI)=0.444(0.257~0.769);OR(95%CI)=0.914(0.854~0.980)],两者含量越高预后不良的发生率越低;而意识改变、性格改变、脑积液和梗阻性脑积液的高发生率则是患者发生不良预后的危险因素[OR(95%CI)=6.969(2283~21.277);OR(95%CI)=2.531(1.105~5.796);OR(95%CI)=3.429(1.546~7.604);OR(95%CI)=10.233(1.059~98.886)]。结论TBM患儿预后差的发生率和死亡率均较高,积极寻找结核病密切接触史和其他脏器结核感染证据有助于TBM的早期诊断,改善患儿营养不良、降低脑积液的发生率则有助于改善TBM患儿的预后转归。

RSV感染裸鼠模型建立及病理特征分析

目的建立呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）感染裸鼠模型,在排除T细胞干扰的情况下,观察RSV的复制情况、气道炎症细胞浸润、肺组织损伤及气道高反应性（AHR）,为进一步探讨固有免疫在RSV中的致病作用奠定基础。方法6~8周雌性T细胞缺陷裸鼠（Balb/c背景）及正常Balb/c小鼠分为对照组及RSV组,分别滴鼻接种细胞培养上清或RSV A2病毒液,空斑实验检测病毒滴度;灌取支气管肺泡灌洗液并行炎症细胞计数及分类计数;部分小鼠取左肺,HE染色后行组织病理评分;肺功能检测用全身体积描技法;细胞因子检测用ELISA法。结果裸鼠中病毒清除较Balb/c小鼠延迟;RSV在裸鼠及Balb/c小鼠中均引起明显的炎症细胞浸润、肺组织病理损伤及AHR,且至少可持续60 d;RSV感染裸鼠及Balb/c小鼠后,细胞因子呈双相变化,急性期以干扰素升高为主,慢性期以Th2类细胞因子升高为主。结论固有免疫可不依赖于T细胞,独立介导RSV相关急慢性期气道炎症及AHR,提示RSV疫苗或药物的开发应充分考虑固有免疫的作用。

呼吸道合胞病毒感染断乳期小鼠后再感染的细胞因子变化及致病机制

目的研究呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染断乳期小鼠后再感染的致病机制及免疫应答特点。方法3周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为PBS对照组、成年期首次感染组、再感染组。首次和再次感染后检测各组小鼠体质量,感染后第7天处死小鼠,行支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及分类计数;病理切片HE染色后行肺组织炎症病理评分;ELISA法检测BALF中细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-17A)的变化。结果 RSV感染后小鼠体质量明显降低,感染后第7天再感染组体质量下降较成年期首次感染组明显;再感染组BALF中的细胞总数、嗜酸性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞均显著高于PBS对照组及成年期首次感染组;成年期首次感染组及再感染组肺组织炎症病理评分明显高于PBS对照组,而再感染组明显高于成年期首次感染组;成年期首次感染组BALF中的IFN-γ较PBS对照组明显增加,而IL-4、IL-5、IL-17A较PBS对照组无明显变化;再感染组BALF中的IL-4、IL-5、IL-17A较PBS对照组显著增加,而IFN-γ无明显变化。结论 RSV再感染后病情较初次感染进一步加重,提示RSV反复感染可能导致支气管哮喘的发生。

p38抑制剂在RSV感染后激素治疗不敏感中的作用

目的探讨p38抑制剂在RSV感染后激素不敏感中的作用。方法 RSV滴鼻建立RSV感染动物模型,分别腹腔注射地塞米松、地塞米松+MAPK(p38、ERK、JNK)抑制剂处理,处理7 d后肺泡灌洗液细胞计数及分类计数,ELISA检测肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-6水平,肺功能仪检测气道高反应。结果地塞米松不能抑制RSV感染引起的气道炎症细胞浸润及气道高反应,地塞米松增加肺泡灌洗液中性粒细胞数量及IL-6水平而不能抑制IFN-γ的水平。予以MAPK抑制剂处理后均不能改变地塞米松对RSV感染后气道炎症及AHR的作用,但p38抑制剂能降低地塞米松对中性粒细胞的募集及IL-6的增高。结论 p38抑制剂不能逆转RSV感染后激素的抗炎作用,但能影响激素对中性粒细胞的作用。

地塞米松促进RSV感染早期Ⅰ型干扰素分泌但不能抑制炎症反应

目的探讨糖皮质激素在RSV感染早期对干扰素信号通路的影响。方法RSV滴鼻建立RSV感染动物模型,腹腔注射地塞米松处理1 d和3 d后,肺泡灌洗液细胞计数及分类计数,ELISA检测肺泡灌洗液中IL-6、IL-8(KC)、IFN-γ、IFN-α、MMP-12水平以及肺匀浆中IFN-α水平,肺功能仪检测气道高反应。结果地塞米松不能抑制RSV感染引起的气道炎症和气道高反应,不能抑制炎症因子IL-6及KC的产生;地塞米松不影响肺匀浆中IFN-α水平但增加肺泡灌洗液中IFN-α水平,而对IFN-γ的水平无影响,且地塞米松抑制肺泡灌洗液中MMP-12的水平。结论地塞米松增加RSV感染早期IFN-α分泌水平,但不能抑制炎症反应。

2019新型冠状病毒感染潜在抗病毒治疗药物

2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)感染是一种新发、突发传染性疾病,传染性强[1],2019-nCoV与严重急性呼吸综合征相关冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征相关冠状病毒(MERS-CoV)近缘,均可引起重症肺炎、呼吸衰竭和多器官功能障碍。由该病毒感染引起的疾病被称为2019冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19),目前针对2019-nCoV尚无特异抗病毒药物。基因组研究表明,2019-nCoV与SARS-CoV、MERS-CoV分别有79%和50%的基因序列相似性[2],推测SARS-CoV、MERS-CoV中的抗病毒治疗经验及证据对于2019-nCoV有一定借鉴意义。为更好地协助一线临床医师开展救治工作,本文针对2019-nCoV的防控方案及既往SARS-CoV、MERS-CoV的诊疗方案、专家共识和指南,对目前6种可供选择的抗病毒药物(干扰素α、利巴韦林、洛匹那韦/利托那韦、瑞德西韦、阿比多尔及氯喹/羟氯喹)研究进行综述,其中瑞德西韦在我国正展开Ⅲ期临床试验,另外5种已在国内上市的药物针对2019-nCoV的抗病毒疗效尚未明确。

混合式教学模式在儿科学实习生临床带教中的应用思考

临床实习是医学生从理论学习过渡到实践的重要阶段,是培养未来合格医学人才的重要环节。临床实践带教中,合适的教学模式有助于提高学生的学习主动性和积极性,培养学生的临床思维,提高学习效果。本文从儿科学临床实习生带教实践出发,分析讲授式教学法、以案例为基础的教学法、基于问题的学习法及混合式教学法的优缺点,认为新时代单一的教学模式无法适应教学的发展,混合式教学模式的应用更能满足儿科临床带教的要求,以期不断提高实习生培训的质量。

慢病毒介导短发夹RNA干扰技术建立小鼠肺组织TRIF沉默模型

目的通过慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立小鼠肺组织β干扰素Toll/白细胞介素1受体结构域衔接蛋白(TRIF)沉默模型。方法构建TRIF的siRNA干扰质粒及慢病毒载体。将18只Balb/c小鼠随机分为空白组、实验组、对照组,每组6只。分别将含TRIF-shRNA、对照慢病毒载体的病毒液经鼻滴入转染实验组、对照组小鼠的肺组织。第8天处死小鼠取肺组织检测绿色荧光蛋白表达情况,取肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、心脏组织检测TRIF mRNA和蛋白的表达水平。结果实验组肺组织中可见明显绿色荧光蛋白表达,且肺组织中的TRIF mRNA和及蛋白表达水平均低于空白组及对照组(均P<0.05)。3组肝脏、脾脏、肾脏、心脏组织中的TRIF mRNA表达水平差异无统计学意义(均P>0.05)。结论使用滴鼻方法可有效建立肺组织局部TRIF沉默小鼠模型。

融入抗疫精神的小儿传染病专业课程思政建设

小儿传染病学属于儿科学专业核心课程之一,充分挖掘思政育人元素并将其有效融入小儿传染病教学实践中,有利于引导学生坚定职业信念,提升专业兴趣和人文素养,激发学生内在的驱动力,以期达到专业教育与思政教育的双赢。

呼吸道合胞病毒感染后期OVA刺激对小鼠气道炎症及AHR的影响

目的研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染后期过敏原刺激对小鼠气道炎症及AHR的影响。方法 6~8周龄雌性Balb/c小鼠随机分为Mock组、RSV组、OVA组及R+O组。检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类计数;苏木精-伊红(HE)染色观察肺部病理损伤;全身体积描述记法检测小鼠气道反应性;ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、CXCL10、CCL5、CCL20的水平。结果 R+O组小鼠BALF中炎症细胞总数、巨噬细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞分类计数较其他3组均显著增高(P<0.05);R+O组小鼠肺组织病理评分及AHR较其他3组亦显著增高(P<0.05);BALF中各处理组IL-4、IL-5较Mock组明显增高(P<0.05),但处理组之间无显著性差异;R+O组CXCL10水平较其他3组显著升高(P<0.05)。结论 RSV感染后期接受OVA刺激可致CXCL10表达增加,进而促使巨噬细胞、中性粒细胞及嗜酸性粒细胞募集,加重小鼠气道炎症及AHR。

翻转课堂在成本会计教学中的应用研究

成本会计教学主要分为理论和实践两部分,具有很强的实践性。在目前的中职成本会计教学中,由于受到多种因素的影响,课堂教学的现状并不乐观。采用翻转课堂的教学模式能够有效地提升课堂教学的效率。本文首先分析了在成本会计教学中应用翻转课堂的优越性,然后分析了成本会计教学的特点和现状,最后针对如何在中职成本会计教学中应用翻转课堂教学模式提出了几点策略。

2009—2023年中国16个省份急性呼吸道感染病例中人呼吸道合胞病毒的流行特征分析

目的了解2009—2023年我国16个省份急性呼吸道感染(ARI)病例中人呼吸道合胞病毒(HRSV)的流行特征。方法研究资料来源于2009—2023年我国16个省份ARI病例监测数据,共有28 278例ARI病例纳入研究。监测病例的临床标本进行了HRSV核酸筛查,并分析不同年龄组、不同地区和不同月份病例的HRSV检出率差异。结果 2009年1月至2023年9月,共纳入28 278例ARI病例。病例年龄范围为<1月龄~112岁,年龄M(Q1,Q3)为3岁(1岁,9岁)。28 278例ARI病例中有3 062例HRSV核酸阳性,总检出率为10.83%。2009—2019年HRSV检出率为9.33%,病毒主要以冬春季流行为主。在新型冠状病毒感染(COVID-19)流行期间,HRSV检出率在6.32%~18.67%之间波动;2022年底至2023年初未出现HRSV传统的冬季流行高峰,在2023年4—5月出现了HRSV反季节流行。87.95%(2 693/3 062)HRSV阳性病例为 5岁以下的儿童,不同年龄组中HRSV检出率的差异具有统计学意义(P<0.001),呈现出随着年龄增加HRSV检出率降低的趋势(P<0.001),其中以<6月龄组患儿的HRSV检出率最高(25.69%)。和2009—2019年相比,2020—2023年期间不同年龄组的HRSV检出率从高到低的排序发生变化,HRSV阳性病例的年龄M(Q1,Q3)从1岁(6月龄,3岁)增加至2岁(11月龄,3岁)。结论通过连续15年的HRSV监测分析发现,5岁以下的儿童,尤其是<6月龄婴幼儿是HRSV感染的主要高发人群。COVID-19流行期间,我国HRSV流行水平和流行模式发生了变化。

学习高等教育法规之我见

我国高等教育立法在法律体系、高等学校的权利、管理体制等方而取得了初步成果。通过对高等教育法规的学习,对以后成为合格的高等教育者有一些个人见解。

BOPPPS联合多种教学方法在小儿传染病学见习课程中的应用

目的探讨基于BOPPPS的参与式互动教学设计在小儿传染病学临床见习课程中的应用效果。方法选取2018级儿科系本科217名学生作为实验组,2017级儿科系本科208名学生作为对照组,试验组采用BOPPPPS联合以案例为基础的学习(case-based learning,CBL)及以团队为基础的学习(team-based learning,TBL)的教学模式,对照组采用传统示教模式。通过对比两组学生的过程性评价及期末理论考试进行学习效果评价,并对试验组采用问卷调查进行教学反馈。采用SPSS 19.0进行t检验。结果试验组理论考试成绩[(75.04±9.12)分]优于对照组[(71.03±9.51)分],试验组过程性评价成绩[(81.03±6.13)分]优于对照组[(70.02±10.32)分],差异具有统计学意义(P<0.05)。教学满意度问卷调查结果显示,互动参与式教学在学习兴趣提升、学习能力提升、课堂满意度、课程接受度4个方面得到学生认可。结论在本课程的见习教学中进行务实的课堂改革,获得了学生的高度认可,有利于提高学生临床思维能力及综合素质培养,值得进一步应用和推广。

翻转微课在小儿传染病学教学中的设计应用

目的探讨翻转微课模式在小儿传染病学教学中的应用效果。方法以重庆医科大学2019级五年制儿科系199名学生为研究对象,分为14组。每组选择一个靶向课程重难点的微课主题,通过翻转课堂,制作原创微课视频,作品上传至超星平台供师生评价。结课后采用问卷调查教学效果,并对2019级与2018级五年制儿科学本科生的期末考试成绩及实习阶段出科考试成绩进行比较。采用SPSS 22.0统计学软件进行t检验、Wilcoxon秩和检验、卡方检验或Fisher精确检验。结果学生共完成14个翻转微课作品。98.47%(193/196)的学生认为这一模式有助于掌握教学重难点;93.88%(184/196)的人认为相比既往的读书报告、文献综述等,翻转微课作品原创性和作业质量更好;94.90%(186/196)的学生更愿意接受翻转微课模式。2019级学生期末考试成绩、实习阶段出科考核理论成绩及操作成绩分别为(79.32±7.53)分、(88.68±4.87)分、(84.93±7.56)分,均高于2018级的(76.06±12.01)分、(87.15±4.09)分、(82.08±9.10)分,差异有统计学意义(P<0.001)。结论翻转微课能有效解决小儿传染病学教学中的重难点问题,激发了学生自主学习的兴趣,有助于提高学习成绩,值得推广。

IL-17A通过促进IFN-γ产生或抑制病毒清除参与小鼠呼吸道合胞病毒感染后致病

目的探讨白细胞介素17A(IL-17A)在小鼠呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染中的作用。方法6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠及IL-17A敲除(IL-17A-/-)小鼠各自按随机数字表分为对照组和RSV组,分别滴鼻接种细胞培养上清或RSV A2病毒液。部分小鼠灌取支气管肺泡灌洗液(BALF)并行炎症细胞计数及分类计数;部分小鼠取左肺,HE染色后行组织病理评分;全身体积描记法检测小鼠肺功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IFN-γ水平;空斑试验检测RSV病毒滴度。为进一步证实IL-17A与IFN-γ的关系及其在RSV感染中的作用,部分IL-17A-/-小鼠经腹腔注射给予外源性重组IL-17A或重组IFN-γ,部分野生型小鼠经腹腔注射给予特异性IFN-γ单克隆抗体。结果RSV感染后,两种小鼠相比,野生型小鼠BALF中炎症细胞总数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数,气道高反应性,肺组织病理损伤程度、病理评分,IFN-γ水及肺组织中RSV病毒滴度均明显高于IL-17A-/-小鼠。RSV组IL-17A-/-小鼠补充外源性重组IL-17A或重组IFN-γ后,IFN-γ水平明显升高,BALF中炎症细胞计数、气道高反应性、肺组织病理损伤明显增加,外源性重组IL-17A处理后病毒清除显著减少,而外源性重组IFN-γ处理后病毒清除不受影响。RSV组野生型小鼠特异性中和IFN-γ后,BALF中炎症细胞计数、气道高反应性、肺组织病理损伤明显减轻,但病毒清除不受影响。结论IL-17A可能通过促进IFN-γ产生或抑制RSV病毒清除,参与RSV感染后致病。