生物人工肝用C3A细胞在零下非结冰时的保存

目的:探讨零下非结冰保存肝细胞的效果及其与细胞凋亡的关系.方法:UW液保存的C3A细胞悬液分为3组:-0.8℃组(零下非结冰组),0℃组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存24、48及72h后,采用流式细胞术分别测定细胞存活率及凋亡率,同时测定LDH、乳酸释放,细胞内ATP含量、尿素合成功能及白蛋白分泌功能,同时观察细胞形态.结果:零下非结冰组较0℃非结冰组及对照组明显提高了低温保存72h的C3A细胞的存活率(86.49%±2.80%vs81.50%±2.83%,77.83%±3.40%,均P<0.05),降低了细胞凋亡率(1.26%±0.84%vs5.34%±1.20%,9.16%±1.99%,均P<0.05);明显抑制了低温保存72h乳酸以及LDH释放(乳酸:10.38μg/106cells±1.40μg/106cellsvs12.02μg/106cells±1.64μg/106cells,17.41μg/106cells±2.40μg/106cells;LDH:80.10U/L±11.10U/Lvs120.04U/L±14.32U/L,148.98U/L±15.37U/L,均P<0.05);更好地维持了低温保存72hC3A细胞内ATP含量、尿素合成功能、及白蛋白分泌功能(均P<0.05).形态上,零下非结冰组保存细胞死亡比例少,细胞接触良好,未见对照组及0℃非结冰组细胞膜周围出现"毛刺"样改变及细胞内的"空泡样"改变.结论:在零下非结冰条件下保存肝细胞,建立一个"血库样"(readytouse)肝细胞库,可以有效促进生物人工肝的发展.

50岁以上健康体检人群血脂水平调查研究

目的了解50岁以上人群血脂水平及血脂异常发生率。方法选取2013年5月～2013年6月在解放军305医院进行体检的50岁以上人员1162例,其中男性668例,女性494例,年龄50～89岁。按年龄分为四组:A组(50～59岁)、B组(60～69岁)、C组(70～79岁)和D组(80～89岁)。采用全自动生化分析仪进行血脂4项测定,包括三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。比较不同年龄以及各组不同性别间血脂水平和异常发生率的差异。结果与男性血脂总体水平比较,女性TC平均水平升高(P<0.05),而血脂HDL-C、LDL-C和TG无统计学差异(P>0.05)。在A、B、C、D各组中,与男性比较,女性血脂检测指标均有升高(P均<0.05)。各组男性,随年龄增加,血脂异常发生率增加。结论在男性人群中,随年龄增长,血脂水平降低,血脂异常率升高。而女性随年龄增加血脂水平无明显变化,高TC血症和高LDL-C血症发生率逐渐增加。50岁以上人群,男性与女性血脂水平有明显差异,应引起足够重视。

血清淀粉样蛋白A、CEA、NSE、CYFRA21-1多项联合检测,对肺癌患者的临床诊断意义

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、CEA、NSE、CYFRA21-1联合检测对肺癌患者的临床诊断意义。方法搜集肺癌31例,良性肺病27例,健康体检者22例。采用免疫吸附法检测SAA、化学发光法检测CEA、电化学发光法检测NSE和CYFRA21-1。结果肺癌组、良性肺病组和健康对照组的SAA中位数分别为32.4 ng/ml、31.62 ng/ml、9.89 ng/ml。肺癌组和良性肺病组SAA水平均高于健康组,但肺癌组和良性肺病组间SAA水平无差异。肺癌组和良性肺病组比较,只有CEA和CYFRA21-1的ROC曲线下面积>0.7。不同病理类型、分期的肺癌患者SAA水平无差异,未发生远处转移的患者SAA更高。结论 SAA的临床诊断意义低于传统的肿瘤标志物,仅能区分肺癌患者是否发生远处转移。

氧化型低密度脂蛋白对胎盘生长因子及抑制剂的影响

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对胎盘生长因子1(PLGF-1)作用人脐静脉内皮细胞(ECV-304)释放炎性因子和内皮细胞黏附分子的影响,及PLGF-1拮抗剂2’-氨基-3’-甲氧黄酮(PD98059)对其抑制程度。方法应用不同浓度的PLGF-1(20、40、80μg/L)孵育ECV-304,分为对照组和PLGF-1干预组(20、40、80 μg/L)。再应用PD98059(100μmol/L)和PLGF 1(80 μg/L)刺激ECV 304,分为空白对照组、ox-LDL组、PLGF-1+ox-LDL组和PLGF-1+ox-LDL+PD98059(拮抗组)。应用ELISA法检测炎性因子和内皮细胞黏附分子的表达。结果 (1)PLGF-1诱导炎性因子和内皮细胞黏附分子的表达呈时间依赖关系,6 h达最理想的分泌量。随着PLGF-1浓度的加大呈上升趋势。(2)与空白对照组比较,ox-LDL组、PLGF-1+ox-LDL组和拮抗组白细胞介素6、基质金属蛋白酶2、可溶性细胞间黏附分子1、可溶性血管细胞黏附分子1的表达显著增加(P<0.01),拮抗组较PLGF-1+ox-LDL组的表达显著减少(P<0.01)。结论 PLGF-1可促使内皮细胞产生大量炎性因子,参与诱导内皮活化;抑制PLGF-1的生物活性可控制炎性的反应。

甲型H1N1患者循环血白细胞VCS参数分析

目的探讨VCS(Volume Conductivity Scatter)参数在甲型H1N1患者白细胞中的变化及其辅助诊断价值。方法用Beckman Coulter LH750型全自动血液分析仪,分别测定基因扩增法确诊甲型H1N1患者(实验组)和健康人群(对照组)白细胞VCS的参数。结果甲型H1N1患者VCS参数MMV(171.615±9.156)明显高于对照组(157.157±10.026)(P<0.001);MLS(62.003±6.916)比对照组(54.263±3.817)明显增加(P<0.001);MNS(114.946±1.603)较正常对照组(154.263±3.817)明显减低(P<0.001)。结论甲型H1N1患者白细胞VCS参数改变不同于健康人群,对早期诊断有一定参考价值。

心型脂肪酸结合蛋白与2型糖尿病患者颈动脉硬化的相关性分析

目的探讨2型糖尿病患者血清心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）水平与颈动脉粥样硬化的相关性。方法根据颈动脉彩色多普勒超声检测情况选取2型糖尿病患者100例，其中颈动脉正常患者50例，颈动脉粥样硬化50例，检测所有对象血中H-FABP水平及其他血脂生化指标。结果颈动脉粥样硬化组的患者血H—FABP水平显著高于颈动脉正常患者[分别为（23．70±3．56），（8．85±3．81）ng／ml]，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论H—FABP水平与糖尿病患者发生颈动脉粥样硬化关系密切。

铜绿假单胞菌感染的临床分布特征

目的分析铜绿假单胞菌感染的临床分布特征。方法回顾性分析2018年1月~2020年12月我院收治的489例铜绿假单胞菌感染患者临床资料,对489株铜绿假单胞菌采用全自动微生物测定仪进行鉴定和药敏试验。用SPSS 3.0统计学软件分析统计其临床感染分布及耐药性变化趋势。结果铜绿假单胞菌临床标本分布占比高低依次为痰液(63.0%)、脓液及分泌物(21.5%)、尿液(12.5%)、腹水(0.6%)、血液(0.4%)、其他(2.0%);铜绿假单胞菌临床科室分布占比高低依次为呼吸内科(24.1%)、骨科(20.5%)、ICU重症监护病房(9.6%)、心血管内科(7.2%)、脑病内科(6.8%)、脑病外科(5.9%)、泌尿外科(5.7%)、康复科(3.9%)、其他(16.4%);铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率最高,对阿米卡星的耐药率最低。11~30岁年龄阶段患者对亚胺培南、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南的耐药性较高,31~50岁年龄阶段患者对头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星、亚胺培南、环丙沙星、氨曲南的耐药性较高,51~70岁年龄阶段患者对亚胺培南、环丙沙星、氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星的耐药性较高,>70岁年龄阶段患者对亚胺培南、氨曲南、头孢他啶、环丙沙星的耐药性较高。结论3年间铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性趋势较稳定,应重视细菌耐药性动态检测,根据铜绿假单胞菌耐药特点合理用药。

某医院鲍曼不动杆菌临床分布及耐药性分析

为分析某医院鲍曼不动杆菌临床分布及耐药性情况,本文回顾性分析了2017年6月—2020年6月本院诊断为鲍曼不动杆菌的感染者111例,分析鲍曼不动杆菌临床科室分布情况,统计鲍曼不动杆菌标本来源分布情况及鲍曼不动杆菌耐药性分布情况。分布及耐药情况研究显示,呼吸科病房为最常见的菌株分布科室,其次为骨科病房和重症监护室(ICU);标本分布来源以痰液,尤其是下呼吸道分泌物最常见;耐药性研究显示,其对替加环素、妥布霉素和头孢哌酮/舒巴坦耐药性相对较低。由此可见,鲍曼不动杆菌在痰液标本检出率最高,好发于各科室,对于替加环素、妥布霉素和头孢哌酮/舒巴坦,经验用药可以考虑使用。

睾酮对内皮细胞表达细胞因子的影响

目的观察睾酮对人脐静脉内皮细胞表达转化生长因子-β1和血红素加氧酶-1的影响。方法用ELISA法观察睾酮对内皮细胞表达TGF-β1和HO-1的影响。结果睾酮在生理浓度(3.0×10-8mol/L)或接近生理浓度下均能促进内皮细胞表达TGF-β1和HO-1的量。两者的表达呈时间(当t=24h达到最理想的分泌量)、浓度依赖关系。结论生理浓度睾酮或接近生理浓度的睾酮有一定的细胞保护作用。

高浓度胰岛素对阿司匹林抑制的血小板中TXB2合成影响的研究

目的：探讨高浓度胰岛素是否影响阿司匹林抑制的血小板中TXB2合成。方法将制备的两组等体积的富含血小板血浆（PRP）分别加入浓度为30μU/ml和300μU/ml的胰岛素，37℃的环境下孵育3min，再次将上述两组的PRP分成等体积，分别用浓度为0、75μmol/L、150μmol/L和300μmol/L的阿司匹林处理，于37℃的环境下继续孵育30min，加入ADP 5min后，用吲哚美辛和柠檬酸葡萄糖封闭血小板反应；用血小板聚集仪检测各组的血小板最大聚集率，酶联免疫吸附法检测血小板中TXB2的含量。结果胰岛素300μU/mL组与30μU/mL组比较，前者可明显升高经阿司匹林作用后的血小板最大聚集率（P〈0.05），且明显增加血小板中TXB2的合成（P〈0.05）。结论高浓度胰岛素可减弱阿司匹林抑制的血小板TXB2合成作用。

睾酮对TNF-α作用于内皮细胞表达HO-1的影响

目的观察不同浓度睾酮对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells)ECV-304表达血红素加氧酶-1(HO-1)的影响,初步探讨其作用机制。方法用ELISA法观察不同浓度睾酮及雄激素受体拮抗剂Flutimide、雌激素受体拮抗剂ICI182,780对ECV-304表达HO-1干预作用。结果睾酮在3×10-6,3×10-7,3×10-8,3×10-9mol/L几种浓度下均具有促进TNF-α诱导的ECV-304细胞表达HO-1的量。与3.0×10-8mol/L睾酮干预组相比,予1.0×10-6mol/LICI182,780预处理,ECV-304细胞释放的HO-1的量明显减少,并诱导HO-1的表达呈时间(当t=24h达到最理想的分泌量)、浓度依赖关系。结论睾酮对TNF-α诱导的ECV-304细胞表达HO-1的影响与其浓度有关,生理浓度睾酮对其具有一定的促进作用,而且这种生物学效应是部分通过转化为雌激素后,作用于雌激素受体实现。

珠海地区2014—2016年鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析

目的探讨珠海地区鲍曼不动杆菌的临床分布和耐药情况,为预防和控制医院感染,合理使用抗生素提供依据。方法收集珠海地区3家三甲医院临床分离的非重复鲍曼不动杆菌1 094株,采用纸片扩散法测定菌株对抗生素的敏感性,采用WHONET 5.4软件分析数据。结果 2014—2016年共分离出1 094株鲍曼不动杆菌,主要分离来自痰液(74.3%);科室分布以重症监护病房(73.4%)和呼吸内科(15.9%)为主;鲍曼不动杆菌对15种常用抗生素的耐药性较高,且逐年增长;但对多菌粘素B和米诺环素的耐药率最低。2014—2016年分别检出多重耐药鲍曼不动杆菌211株(61.7%),237株(64.6%)和268株(69.6%),泛耐药鲍曼不动杆菌146株(42.7%),188株(51.2%)和203株(52.7%)。结论鲍曼不动杆菌是珠海地区重要的院内感染病原菌,耐药率较高,该菌以引起呼吸系统感染为主。临床应根据药敏结果合理使用抗生素,减少鲍曼不动杆菌的感染和耐药菌株产生。

重组酶聚合酶等温扩增快速检测肺炎支原体方法的建立和初步应用

目的:建立基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)技术快速检测肺炎支原体的方法。方法:本研究以肺炎支原体编码P1黏附蛋白为靶基因,利用Primer Premier 5软件进行引物、探针的设计,最终筛选出最佳引物。同时设计相应的实时荧光定量PCR(RT-PCR)引物用于后续的验证试验。对反应体系试剂比例、反应时间、反应温度、引物探针浓度进行确定。肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、肺炎克雷伯菌、肺炎双球菌、大肠杆菌和链球菌作为对照评估RPA检测肺炎支原体的特异性及敏感度。结果:RPA快速检测肺炎支原体方法仅需14 min,检测灵敏度达200 copies/mL;6种非肺炎支原体均不能扩增,特异性较高。结论:本研究建立了肺炎支原体的RPA快速检测方法,具有迅速、简便、经济等优势,为肺炎支原体的快速检测提供一个新的有利工具。

实时荧光重组酶聚合酶扩增快速检测临床常见曲霉菌方法的建立

目的:针对曲霉菌属转录间隔区ITS1设计引物、探针,利用实时荧光重组酶聚合酶扩增(Real-time RPA)技术建立一种快速、准确、经济的临床常见曲霉菌检测鉴定方法。方法:利用建立的实时荧光重组酶聚合酶扩增体系对标准菌株及临床标本提取的DNA进行扩增,验证该方法的性能。结果:本研究针对曲霉菌属转录间隔区ITS1设计引物、探针利用RPA试剂盒(荧光型)建立了Real-time RPA扩增体系,在15分钟内即可检测出临床常见的四种曲霉菌;特异性试验结果显示反应体系只对烟曲霉、黄曲霉、土曲霉、黑曲霉四种曲霉呈现出明显的扩增曲线,而其它细菌和真菌均无扩增曲线。灵敏性试验显示最低检出限为10-3 ng/μL。临床验证试验的12份曲霉菌均有较高的扩增效应。结论:本研究建立的Real-time RPA方法能快速、特异、灵敏地检出烟曲霉、黄曲霉、土曲霉、黑曲霉等临床常见曲霉菌,为曲霉菌的快速、现场检测提供了一种新的思路。

大肠埃希菌泌尿系统感染患者临床分布及药物敏感性分析

目的:探讨大肠埃希菌引起泌尿系统感染患者的临床分布情况及其药物敏感性分析,为临床诊断及合理使用抗菌药物提供理论性依据。方法:选取2015年1月至2020年12月期间诊治的2052例大肠埃希菌泌尿系统感染患者为研究对象,使用MALDI-TOF MS全自动微生物鉴定质谱仪对细菌进行鉴定,应用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定及药敏分析仪进行药物敏感性分析。结果:2052例大肠埃希菌泌尿系统感染患者中泌尿外科患者占比最高,为17.50%,其次为肾病科患者,占12.87%。其中检出803株产ESBLs的大肠埃希菌,泌尿外科占比最高,为18.56%,其次是肾病科占13.95%,内分泌科占11.71%,重症医学科10.09%。2052株大肠埃希菌整体药敏分析结果显示,大肠埃希菌对美罗培南、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、呋喃妥因、米诺环素、头孢西丁等药物敏感率高,均>90%,头孢唑啉、环丙沙星、左氧氟沙星、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、氨苄西林敏感率低,均<50%,其中氨苄西林敏感率最低,只有28.17%。结论:大肠埃希菌泌尿系统感染主要发生在泌尿外科,产ESBLs大肠埃希菌整体检出率较高,临床应重视泌尿系统感染患者的尿细菌培养及药物敏感性分析,尽量避免仅凭经验性用药,根据药物敏感性结果合理选择抗菌药物。

择期手术交叉配血TAT的现状分析与对策

目的:探讨研究预先配血模式在择期手术交叉配血中的应用。方法:将择期手术输血按传统配血和预先配血2种方式进行,分别统计检测周转时间(TAT),分析TAT延长及手术室不满意的原因,以进一步缩短手术用血等候时间,提高手术室对输血科交叉配血TAT的满意度。结果:标准检测阶段是影响TAT的主要因素,压缩该段TAT是很困难的。研究中传统配血模式的满意度是88%,预先配血模式的满意度是97%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:交叉配血是输血流程中最难提高的一个TAT节点,输血科可以运用预先配血模式解决该问题,提高TAT,缩短手术用血等待时间。

心型脂肪酸结合蛋白的临床应用与进展

脂肪酸结合蛋白（fattyacidbindingprotein，FABP）是几乎存在于所有组织中的一种分子量很小的可溶性蛋白质，当组织损伤时，能迅速释放入血，可为ll缶床提供多种有用信息，近年来在临床上的应用广泛受到人们关注和重视，本文就心型脂肪酸结合蛋白（heart-typefattyacidbindingprotein，H-FABP）在临床中的应用与进展作一综述。

降钙素原、C反应蛋白、血沉联合检测对血流感染早期诊断价值

探讨血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)及其联合检测对血流感染早期诊断的临床价值。方法 选自2016年1月-2017年12月在我院确诊血流感染的患者45例作为感染组,同期选择健康体检者45人作为对照组。检测两组患者PCT、CRP、ESR水平,并进行统计分析,评估其诊断价值。结果 感染组血清PCT、CRP 、ESR 升高的患者分别占 66.67%、73.33%、88.89%,对照组血清 PCT、CRP 、ESR升高的患者分别占8.89%、13.33%、15.56%,感染组阳性率明显高于对照组,两组比较有显著性差异(P<0.05);PCT、CRP 、ESR及PCT+CRP+ESR在诊断血流感染的敏感度分别为66.67%、73.33%、77.78%、88.89%;特异度分别为:90.12%、88.79%、82.20%、90.19%,PCT的AUC为0.860,CRP的AUC为0.901,ESR的AUC为0.897,PCT+CRP+ESR联合检测的AUC为0.912 。结论 PCT、CRP 、ESR联合检测有助于对血流感染早期诊断,对及时早期合理应用抗菌药物有重要的指导意义。