常规器械免举宫经脐单孔腹腔镜全子宫切除术

目的探讨常规器械免举宫经脐单孔腹腔镜全子宫切除术治疗宫颈病变的应用价值。方法选择2021年12月~2023年6月因宫颈高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)或宫颈癌ⅠA1期行腹腔镜全子宫切除术60例,按患者意愿行经脐单孔腹腔镜手术及多孔腹腔镜手术各30例,均使用常规器械,不使用举宫器,比较2组手术指标。结果2组均未出现中转开腹及泌尿系、肠道或大血管等损伤。单孔组出血量较少[(54.6±20.5)ml vs.(67.5±27.0)ml,P=0.041],排气较早[(27.6±8.0)h vs.(32.2±9.0)h,P=0.040],总住院时间较短[(4.4±1.5)d vs.(5.1±1.2)d,P=0.044]。2组子宫重量、手术时间以及术后并发症差异无显著性(P>0.05)。2组切口愈合良好,未出现与穿刺器相关的近期并发症(如穿刺孔感染、出血)或远期并发症(如脐疝、切口疝)。结论免举宫经脐单孔腹腔镜全子宫切除术出血少,术后恢复快,瘢痕最小化,并发症与传统腹腔镜手术相似。

单药新福菌素静脉化疗对初治低危GTN患者的疗效及安全性评估

目的:评估单药新福菌素(Act)静脉化疗用于初治低危妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)患者的疗效及安全性。方法:回顾性分析2018年1月至2022年12月于江西省妇幼保健院接受化疗的106例初治低危GTN患者,根据治疗方案不同分为:Act组(23例)、5–氟尿嘧啶(5–FU)组(42例)、甲氨蝶呤(MTX)组(18例)、放线菌素D(Act–D)组(23例),比较四组患者的化疗疗效及不良反应发生情况。结果:四组患者化疗疗效比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。Act–D组患者获得完全缓解所需要的疗程数多于5–FU组,差异具有统计学意义(P <0.05);其余各组之间两两比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。本研究未出现因对一线单一药物化疗有效但血清人绒毛膜促性腺激素(HCG)水平不能降至正常或出现严重毒副反应,导致化疗不能实施而更换化疗方案的情况。有16例患者因对单药化疗无效而更换药物,更换联合化疗方案后通过化疗间期测定血清HCG值及根据影像学检查进行疗效评估,结果 16例患者血清HCG值呈对数下降,原发或转移病灶缩小,均得到临床完全缓解。血液学毒性分度情况比较,Act组、MTX组、Act–D组患者出现Ⅰ~Ⅱ度的比例均高于5–FU组,出现Ⅲ~Ⅳ度的比例均低于5–FU组,差异有统计学意义(P <0.05);Act组、MTX组、Act–D组三组患者之间两两比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。消化系统副反应分度情况比较,Act组、MTX组、Act–D组患者出现Ⅰ~Ⅱ度的比例均高于5–FU组,出现Ⅲ~Ⅳ度的比例均低于5–FU组,差异有统计学意义(P <0.05);Act组、MTX组患者出现Ⅰ~Ⅱ度的比例均高于Act–D组,出现Ⅲ~Ⅳ度的比例均低于Act–D组,差异有统计学意义(P <0.05);Act组、MTX组患者之间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:单药Act应用于初治低危GTN患者与国内外推荐的一线单药相比,疗效相当,毒副反应没有增加。因此,单药Act静脉化疗可作为初治低危GTN患者的另一项选择。

E003对RSA模型小鼠蜕膜组织超微结构的影响

目的观察瑞香素(daphnetin)即E003处理后RSA模型小鼠蜕膜组织形态结构的改变。方法建立反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)模型小鼠后,实验分正常妊娠组、RSA模型组、E003低剂量组和E003高剂量组共4组,E003连续灌胃处理14 d后,取蜕膜组织。光镜下观察蜕膜组织血管和细胞形态,电镜下观察蜕膜组织超微结构。结果解剖子宫计算胚胎吸收率,E003处理组(低剂量组和高剂量组)低于RSA模型组,差异具有统计学意义,P<0.05;E003高剂量组胚胎吸收率与正常妊娠组相比无统计学差异,P>0.05。光镜下可见RSA模型组蜕膜细胞碎裂,数量较正常妊娠组减少;E003低剂量组和高剂量组蜕膜细胞数量均较模型组增多,排列较整齐。电镜下RSA模型组较正常妊娠组蜕膜细胞体积减小,细胞间隙增大,血管壁不完整,血管内皮细胞结构不完整,细胞核呈梭形;E003低剂量组与模型组比较,蜕膜细胞体积增大,细胞间隙增大,血管壁较完整,血管内皮细胞呈长梭形,细胞结构较完整,细胞间隙稍增宽;E003高剂量组蜕膜细胞组织及血管壁接近正常妊娠组。结论RSA模型小鼠存在母胎界面血管生成障碍,E003可修复RSA模型小鼠蜕膜组织中破坏的细胞结构,改善血管生成和细胞器形态,对RSA模型小鼠具有一定的治疗作用。

常规器械单孔腹腔镜辅助阴式子宫切除术

目的探讨单孔腹腔镜辅助阴式全子宫切除术(laparoscopic-assisted vaginal hysterectomy,LAVH)的应用价值。方法对2016年10月~2018年10月因非恶性妇科疾病行LAVH进行回顾性分析。依照患者意愿分为单孔和三孔组各30例。单孔组使用一次性单孔套管穿刺系统。比较2组手术指标和并发症。结果2组均无中转开腹手术,无肠管、输尿管、膀胱或大血管损伤。单孔组术后血红蛋白降低少[(17.1±6.5)vs.(20.9±8.1)g/L,P=0.045];2组手术时间[(73.1±24.3)vs.(70.3±22.1)min,P=0.639],子宫重量[(311.2±185.3)vs.(339.4±234.3)g,P=0.607],排气时间[(34.1±5.8)vs.(34.2±4.7)h,P=0.961],总住院时间[(4.1±1.1)vs.(4.3±1.0)d,P=0.541],术后并发症发生率(3例vs.3例,P=1.000)差异无显著性。2组术后短暂性麻痹性肠梗阻3例(单孔组2例,三孔组1例),盆腔血肿2例(2组各1例),败血症1例(三孔组),未出现与穿刺器相关的并发症(如脐疝)。结论单孔LAVH显示术中出血较少及几乎无瘢痕的优势,与三孔手术结局及并发症相似。

138例宫颈腺癌卵巢转移危险因素分析

目的:探讨宫颈腺癌卵巢转移的危险因素。方法:回顾性分析1993年1月至2008年12月江西省妇幼保健院肿瘤科收治的138例宫颈腺癌患者的临床病理资料(首次治疗方式均为手术治疗),采用SPSS 19.0统计软件Fisher精确检验分析和Logistic回归分析其卵巢转移的危险因素。结果:138例宫颈腺癌Ⅰ～Ⅱ期患者中发生卵巢转移4例,转移率2.90%;Fisher精确检验分析显示:临床分期(P<0.01)、宫旁受侵(P<0.01)、输卵管转移(P<0.05)、盆腔淋巴结转移(P<0.01)与卵巢转移相关;Logistic回归分析显示:FIGO 2009临床分期(0R=27.923)、输卵管转移(0R=133.000)与卵巢转移相关。结论:对于临床Ⅰ～Ⅱ期宫颈腺癌患者保留卵巢存在一定风险,但是对于希望保留卵巢功能的年轻患者,在仔细评估卵巢转移高危因素后可考虑保留卵巢。

加味四妙汤配合重组人干扰素α-2b凝胶在高危型HPV感染患者阴道免疫微环境调控中的应用价值

目的:探究加味四妙汤配合重组人干扰素α-2b凝胶在高危型人乳头瘤状病毒(HPV)感染患者中的应用效果。方法:选取2020年10月-2021年10月江西省妇幼保健院收治的80例高危型HPV感染患者,按照随机数字表法将其分为对照组与观察组,每组40例。对照组采用重组人干扰素α-2b凝胶治疗,观察组采用加味四妙汤配合重组人干扰素α-2b凝胶治疗。比较两组疗效、中医症状积分、HPV转阴率、阴道免疫微环境及不良反应发生情况。结果:观察组总有效率及HPV转阴率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组接触性出血、带下异常、腰骶酸痛、外阴瘙痒评分均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)与白细胞介素-6(IL-6)水平均低于对照组,γ-干扰素(IFN-γ)水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:经加味四妙汤配合重组人干扰素α-2b凝胶治疗可有效改善患者阴道免疫微环境,促使患者各项症状改善,促使HPV转阴,显著提高临床治疗效果,值得推广。

优质囊胚形成相关因素分析

目的探讨授精第3d(D3)卵裂期胚胎继续培养发育成囊胚的情况并分析其影响因素。方法回顾性分析本中心2014年1月到2018年11月D3胚胎移植/冷冻后剩余的81108枚继续囊胚培养的卵裂期胚胎形成囊胚的情况。分别按照女方年龄、D2卵裂球数、D3卵裂球数、胚胎碎片率、空泡、对称性和多核进行分组分析优质囊胚形成与其关系。结果年龄20-22岁组优质囊胚形成率为33.0%,23-32岁组为35.6%,33岁以上为28.0%,3组间比较差异均有计学差异(P<0.0001)。D2卵裂球数<4个组优质囊胚形成率为20.4%,等于4个组(40.6%),大于4个组(27.7%),3组间有统计学差异(P<0.001)。D3卵裂球数≤6组优质囊胚形成率18.7%,7-10个组35%,≥11个组53.3%,3组间比较均有统计学差异(P<0.001)。碎片率≤20%组优质囊胚形成率显著高于碎片率>20%组(33.9%vs28.3%,P<0.001)。D3卵裂球对称组优质囊胚形成率明显高于不对称组(36.63%vs31.73%,P<0.001)。D3胚胎有空泡组优质囊胚形成率明显低于无空泡组(30.23&vs33.6%,P=0.0188)。D3胚胎有多核组优质囊胚形成率明显低于无多核组(22.66%vs33.63%,P<0.001)。Logistic分析发现女方年两、碎片、空泡、对称性及多核均为优质囊胚形成的独立影响因素。结论优质囊胚形成与女方年龄、卵裂球数、胚胎碎片率、空泡、对称性及多核均相关,患者进行囊胚培养进行单囊胚移植时需要综合考虑多方因素,从而可以通过囊胚培养筛选出具有发育潜能的囊胚移植或冷冻,提高病人IVF周期移植胚胎数目,提高妊娠率及提高可利用胚胎的可行方法。

Treg/Th17细胞平衡在反复种植失败患者外周血中的调节作用

目的探讨Treg/Th17细胞平衡在反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)患者外周血中的调节作用。方法收集来我院行IVF治疗的RIF患者(实验组)和首次移植妊娠成功患者(对照组)外周血及其临床资料各20例。RT-PCR检测两组患者外周血中Treg和Th17特异性转录因子Foxp3、ROR-γt和相关细胞因子IL-10、IL-17的mRNA水平,数据进行统计分析后探讨Treg/Th17调控RIF发生的可能分子机制。结果与对照组相比,实验组Foxp3(0.45±0.03vs0.86±0.06)、ROR-γt(1.27±0.75vs0.43±0.15)和IL-10(1.03±0.15vs1.60±0.08)、IL-17(1.06±0.02vs0.57±0.04)的mRNA表达水平均有显著差异,P均<0.05。结论Treg和Th17特异性转录因子Foxp3、ROR-γt和相关细胞因子IL-10、IL-17的mRNA水平可能参与了RIF患者外周血中Treg/Th17细胞平衡的调节,从而导致RIF的发生发展。

短时受精联合早补救ICSI在辅助生殖技术中的应用研究

目的比较短时受精与长时受精的临床应用效果,评估短时受精联合早补救ICSI在辅助生殖技术中的应用价值。方法回顾分析9039个周期常规受精的患者,分为短时受精组和长时受精组,分别比较两组及两组同时期行R-ICSI和LICSI组的受精情况、卵裂率、临床妊娠率等,并进行统计学分析。结果两组的多精受精率(≥3PN)、受精率、种植率及自然流产率无统计学差异(P>0.05)。短时受精的2PN率(65.22%vs 43.06%,P<0.01)、卵子利用率(48.84%vs 37.53%,P<0.01)、0PN率(21.59%vs 37.84%,P<0.05)、1PN率(4.85%vs 13.43%,P<0.05)、卵裂率(96.87%vs 93.06%,P<0.01)、优质胚胎率(50.66%vs 44.63%,P<0.01)、取消移植率(4.95%vs 16.08%,P<0.01)、胚胎利用率(81.25%vs 63.91%,P<0.01)、临床妊娠率(53.49%vs35.85%,P<0.01)及抱婴回家率(37.75%vs 14.40%,P<0.01)明显高于长时受精组。R-ICSI的受精率(44.79%vs 24.70%)、卵裂率(98.90%vs 68.25%)、优质胚胎率(40.38%vs 31.79%)、卵子利用率(62.90%vs 45.10%)及临床妊娠率(48.98%vs 29.23%)明显高于L-ICSI,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论短时受精可以明显增加2PN受精率,在一定程度上改善了胚胎质量,从而改善临床结局。短时受精失败后及时行R-ICSI能极大地提高卵子利用率,并能获得很好的临床妊娠结局,对预防及降低受精失败有重要意义。短时受精联合R-ICSI在辅助生殖中有较好的应用前景。

DNA甲基化介导miR-128-2沉默对子宫内膜癌细胞中DJ-1表达的影响

目的在子宫内膜癌细胞系水平,进一步明确上调子宫内膜癌细胞内DJ-1表达的重要调控机制。方法1.利用正常人子宫内膜上皮细胞(ESC)和4种子宫内膜癌细胞株,检测细胞中miR-128-2基因启动子区DNA甲基化的水平、miR-128-2、DJ-1 mRNA及DJ-1蛋白表达水平,比较分析它们在不同的子宫内膜癌细胞系中的差异变化及相关性。2.将miR-128-2 mimic和miR-128-2 inhibitor依次分别转染Ishikawa和SPEC-2子宫内膜癌细胞株,测定细胞中miR-128-2、DJ-1 mRNA及DJ-1蛋白表达水平的变化,以求阐明miR-128-2是否能调控内源性DJ-1表达。3.分别构建含野生型DJ-1-3’UTR的重组荧光素酶报告载体pGL3-DJ-1-3’UTR-wt和含有突变型DJ-1-3’UTR的重组荧光素酶报告载体pGL3-DJ-1-3’UTR-mut,验证DJ-1是否为miR-128-2直接靶基因。4.Ishikawa和SPEC-2子宫内膜癌细胞经5μM甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)药物预处理48 h或5-Aza-dC预处理后再转染miR-128-2 inhibitor 48 h,随后检测miR-128-2基因启动子DNA甲基化水平的变化、miR-128-2和DJ-1 mRNA表达丰度的变化、DJ-1蛋白的表达水平变化,以求阐明子宫内膜癌细胞中miR-128-2基因启动子DNA甲基化是否沉默miR-128-2表达进而上调DJ-1表达。结果1.与正常ESC相比较,Ishikawa、RL95-2、KLE及SPEC-2四种子宫内膜癌细胞中miR-128-2基因启动子区DNA甲基化水平均显著增加(P<0.01),同时miR-128-2表达明显下调(P<0.01),而DJ-1 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.01);通过相关性分析发现miR-128-2甲基化水平与miR-128-2表达具有显著负相关性(r=-0.9124,P<0.01),而与DJ-1 mRNA表达具有显著正相关性(r=0.8304,P<0.01);此外,miR-128-2表达与DJ-1 mRNA的表达表现为负相关性(r=-0.8963,P<0.01)。2.Ishikawa和SPEC-2细胞中转染miR-128-2 inhibitor后,DJ-1 mRNA及蛋白表达水平较对照组均有明显升高(P<0.01),而miR-128-2 mimic转染细胞后,DJ-1 mRNA及蛋白表达水平较对照组均出现明显下降(P<0.01)。3.miR-128-2 mimic转染细胞后,重组报告质粒pGL3-DJ-1-3’UTR-wt的荧光素酶活性大幅降低(P<0.01),但miR-128-2 mimic对重组报告质粒pGL3-DJ-1-3’UTR-mut的荧光素酶活性却无法产生作用(P>0.05),提示miR-128-2可直接与DJ-13’UTR靶向结合。4.经5μM甲基化抑制剂5-Aza-dC预处理48 h后,Ishikawa及SPEC-2细胞中miR-128-2甲基化水平均显著下降(P<0.01),miR-128-2表达均显著上升,而DJ-1 mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P<0.01)。此外,5-Aza-dC预处理上调miR-128-2表达并下调DJ-1 mRNA和蛋白表达的作用可被miR-128-2 inhibitor所逆转(P<0.01),然而,5-Aza-dC预处理降低miR-128-2甲基化水平的作用却未能被miR-128-2 inhibitor影响。结论子宫内膜癌细胞中DJ-1的表达可由miR-128-2直接靶向负调控;miR-128-2基因启动子区DNA甲基化致miR-128-2表达沉默可能是子宫内膜癌细胞中上调DJ-1表达的关键机制。

瑞香素对反复自然流产模型小鼠蜕膜组织中SOCS1和SOCS3蛋白表达的影响

探讨瑞香素(daphnetin,E003)对反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)模型小鼠蜕膜组织中细胞因子信号传导抑制因子(Suppressor of cytokine signaling , SOCS)中SOCS1和SOCS3蛋白表达的影响。实验方法是按照2:1的比例,将雌性 CBA/J分别与雄性 BALB/c及 DBA/2小鼠进行交配,建立一种正常妊娠模型和典型RSA动物模型。按照RSA模型对照组、正常妊娠对照组、E003高剂量治疗组、低剂量组的方式将本次实验分为4组;Western Blot检测上述四组小鼠蜕膜组织中SOCS1和SOCS3蛋白水平。结果E003处理组(高/低剂量组)能够使 RSA蜕膜组织中的SOCS1和SOCS3蛋白水平都得到显著下降,并且与 RSA的动物模型组进行了比较,其统计差异为(P<0.01),与E003高剂量组与低剂量组进行比较,其统计差异为(P<0.05)。结论 E003可降低RSA模型小鼠蜕膜中SOCS1和SOCS3蛋白表达,并呈较好的剂量相关性,为临床治疗RSA新思路提供实验依据。

褪黑素联合囊胚培养液在人类未成熟卵母细胞体外培养中的应用

探讨一种新型的安全有效的人类未成熟卵母细胞体外成熟(in-vitro maturation, IVM)手段。 方法 将2021年1月~2021年6月作为时间段,选取在江西省妇幼保健院辅助生殖中心择期行ICSI-ET治疗的96例不孕病患作为研究对象,然后取她们促排卵周期中废弃的未成熟GV期卵母细胞作为实验材料,然后将其随机纳入对照组与实验组中实施培养,前者的培养液为囊胚培养液,后者培养液选用褪黑素联合囊胚,分析两组体外成熟度与ICSI授精情况以及胚胎繁育状况等。 结果 96个周期共取得未成熟卵母细胞(GV期)356枚,随机分成对照组和实验组各178枚。24h成熟培养后,实验组IVM成熟率71.9%较对照组IVM成熟率70.2%,实验组正常受精率75%较对照组正常受精率72.8%无统计学差异(P>0.05)。继续实施培养直到生长至胚囊器,结果得出实验组囊胚形成率47.9%明显高于对照组27.5%,实验组优质胚囊形成率36.5%明显高于对照组14.3%,且P<0.05。其中共有移植周期6例,获2例临床妊娠率,妊娠率33.33%;有2例共2个健康婴儿出生。结论 囊胚培养液和褪黑素组合的新型IVM培养液可作为一种经济安全有效的人类未成熟卵母细胞体外培养体系运用于临床。

沉默DJ-1基因表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及凋亡的影响

目的 :探讨DJ-1基因沉默对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及凋亡的影响。方法 :将针对DJ-1基因的特异性干扰质粒(pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shRNA)转染子宫内膜癌Ishikawa细胞,然后采用MTT法检测pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shRNA转染对Ishikawa细胞增殖的抑制作用,采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测DJ-1mRNA及蛋白表达水平的变化,采用Annexin-Ⅴ/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染和FCM法检测细胞凋亡情况。结果 :pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shRNA转染能够明显抑制Ishikawa细胞的体外增殖,并且该抑制作用具有浓度和时间依赖性(P<0.05)。pGPU6/GFP/neo-DJ-1-shRNA转染Ishikawa细胞后,DJ-1 mRNA及蛋白表达水平均明显低于各对照组(P<0.01),而细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01)。结论 :沉默DJ-1基因表达可抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖,促进细胞凋亡。

DJ-1在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:探讨DJ-1基因mRNA及其蛋白在子宫内膜癌、癌旁组织及正常子宫内膜组织中的表达规律及临床意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blot)及免疫组织化学Elivision法检测100例子宫内膜癌、癌旁组织及30例正常子宫内膜组织中DJ-1基因mRNA及其蛋白的表达情况,分析DJ-1基因在子宫内膜癌组织中的表达与肿瘤的病理类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、期别及患者血CA125水平等临床病理特征之间的关系。结果:子宫内膜癌组织中的DJ-1 mRNA及DJ-1蛋白的表达均明显高于癌旁组织及正常子宫内膜组织,癌旁组织及正常子宫内膜组织间表达无显著差异。DJ-1 mRNA的表达与子宫内膜癌的病理类型、期别及血CA125水平无明显相关性;中低分化的子宫内膜癌组织中DJ-1 mRNA的表达高于高分化者,深肌层浸润的子宫内膜癌组织中DJ-1 mRNA的表达高于局限于黏膜层及浅肌层浸润者,DJ-1 mRNA在有淋巴结转移的患者中的表达高于无淋巴结转移者。结论:DJ-1 mRNA及蛋白在子宫内膜癌组织中高表达,且可能参与了子宫内膜癌的发展、浸润和转移等环节的调控。

瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响

目的探讨中药活性成分瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响。方法以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,CCK-8法分析瑞香素对Ishikawa细胞增殖的影响,qRT-PCR检测瑞香素对Ishikawa细胞DJ-1 mRNA表达,流式细胞术检测瑞香素对Ishikawa细胞凋亡的影响。结果不同浓度瑞香素处理Ishikawa细胞后,细胞增殖抑制率较对照组明显增加,且呈现时间-浓度依赖性,瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,抑制率IC50值为78μmol/L;与对照组相比,78μmol/L瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,其DJ-1mRNA表达量明显降低(P<0.05),同时早期凋亡率(P<0.01)和晚期凋亡率(P<0.05)均明显升高。结论瑞香素可通过降调DJ-1的表达促进子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,并呈剂量依赖关系。