番茄泛素蛋白基因LeEBF1和LeEBF2的克隆表达分析(英文)

通过RACE和RT-PCR方法从番茄中克隆了LeEBF1(EIN3binding F-box protein1)和LeEBF2(EIN3binding F-box protein2)的全长cDNA序列,两个基因LeEBF1、LeEBF2全长分别是2866和2891bp,对序列的分析表明,它们的开放阅读框分别是1911和1995bp,编码区编码637和665个氨基酸残基,在氨基端含保守的F-box区域和在羧基端有14个亮氨酸重复单位,通过BLAST软件和DNAMAN分析表明这两个基因的氨基酸序列与拟南芥EBF1和EBF2有58.6%相似,同时又与其他物种的EBF蛋白的F-box区域比较有24.4%到73.2%的相近。Northern杂交指出:LeEBF1与LeEBF2在野生型和Nr的幼叶中的表达量高于成熟叶;当在果实发育期,LeEBF1与LeEBF2在青果期的表达量相比其他时期要弱。初步结果表明,LeEBF1与LeEBF2可能在番茄的生长发育中起着重要的作用。

胞外基质蛋白与血小板生长因子对气道平滑肌细胞的影响

目的研究层黏蛋白(laminin,LN)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、I型胶原(collagen I,Col I)3种不同细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)蛋白对血小板生长因子(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导的气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)形态及收缩变化的影响。方法将ASMCs分别附着在LN、ColI、FN表衬的细胞培养皿中,并分成2组,分别在有或无PDGF-BB(10 mg/L)的无血清培养基中培养0～5 d。然后采用显微图像方法观测细胞形态和宽长比,光学磁微粒扭转细胞测量方法测量细胞受KCl或组胺(histamine)刺激时的收缩反应。结果在有PDGF-BB的培养条件下,ASMCs形态总体上变细变长,即细胞宽长比减小,但附着在LN上的ASMCs比附着在Col I或FN上的细胞宽长比相对要大。在无PDGF-BB的培养条件下,ASMCs对KCl刺激的收缩响应随培养时间增加而增加,但不受ECM蛋白成分的影响。而在有PDGF-BB的培养条件下,ASMCs对KCl或Histamine刺激的收缩响应总体上随培养时间呈下降趋势,但附着在LN上的ASMCs收缩响应下降程度相对较小。结论 ASMCs受PDGF-BB作用时,其形态和收缩性的变化与不同ECM蛋白成分有关,相对于Col I和FN,附着在LN的细胞形态和收缩性的变化较小。ECM蛋白成分对PDGF-BB诱导的ASMCs形态和收缩性变化的差异性影响,对于深入认识基质蛋白、炎症因子与气道平滑肌细胞的相互作用及其与哮喘病理生理机制的关系具有重要意义。

高糖预处理内皮细胞条件培养基对脐带间充质干细胞增殖和凋亡的影响

为了探讨体外高糖诱发内皮细胞损伤而继发性对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cell,h UC-MSC)增殖和凋亡的影响及其机制,该研究采用酶消化法分离培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,h UVEC),制备不同糖浓度(5,30 mmol/L)培养h UVECs 24,48,72 h条件培养基(conditioned medium,CM);内皮细胞条件培养基(h UVEC-CM)培养h UC-MSC 3 d,实时细胞监测系统检测h UC-MSC的增殖;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞的凋亡情况;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Cl-Caspase3的表达。结果显示,条件培养基培养h UC-MSC 3 d后,与对照组相比,h UVEC-CM(HG)组h UC-MSC的增殖活力明显降低,凋亡率显著升高,凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显减少,Bax及Cl-Caspase3的表达明显增加(P<0.05)。以上表明,h UVEC-CM(HG)能抑制h UC-MSC的增殖,并通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cl-Caspase3的表达诱导h UC-MSC凋亡。

间充质干细胞移植治疗新型冠状病毒肺炎的思考

目前2019新型冠状病毒(2019-nCoV)感染疫情已造成了全球大流行.尽管科研人员已经对2019-nCoV展开了深入研究,并解析出了分子结构,进行了进化树分析,但对于其具体的致病机制还缺乏足够认识,导致目前尚缺乏特异有效的治疗药物与手段.由于2019-nCoV感染会引发过度炎症反应,进而导致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和脓毒症是其致死的主要并发症,因此,在抗病毒和对症治疗的同时减轻炎症反应,才能有更好的治疗效果.间充质干细胞(MSCs)不仅具有显著的免疫调节功能,还能发挥再生修复的作用,修复受损肺组织,可以考虑作为治疗新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)的一种新的有效手段.本文通过分析2019-nCoV的主要致病机制以及发展为ARDS的过程,并结合MSCs的研究现状,探讨其用于治疗新冠肺炎的意义与可行性,为临床治疗提供充实的理论依据.