脂质体包裹猪白细胞介素6基因对猪带绦虫抗原基因免疫小鼠的影响

比较研究了BALb/c小鼠分别肌肉注射猪带绦虫抗原基因VTS76、猪白细胞介素 6(VPIL 6)联合VTS76及其阳离子脂质体包裹质粒等 5个处理的免疫效应。结果表明 ,VTS76联合VPIL 6共注射小鼠的IgG含量和抗体滴度 ,脾细胞增殖反应和IL 2诱生活性以及免疫细胞数量 ,均比注射VTS76的显著增强。经阳离子脂质体包裹的VTS76+VPIL 6在减少质粒用量 80 %时 ,免疫应答水平仍显著高于脂质体包裹VTS76,且明显高于VTS76+VPIL 6,证明VPIL 6能显著增强基因疫苗 (VTS76)免疫小鼠的免疫应答。

退化草地土壤农化性状与微生物区系研究

通过对三种退化程度不同的草地土壤农化性状与微生物区系进行研究，结果表明，草地退化后，其土壤肥力水平、土壤微生物数量和微生物种类有随退化程度增高而下降（减少）的趋势；退化草地存在不同程度的营养元素比例失调，表现为少氮、缺磷、富钾和高有机质含量，且退化程度接近的草地间，在土壤微生物区系和农化性状有部分类似的特征。

川西北退化草地土壤微生物生化活性的初步研究

通过对川西北三种不同退化程度的几种土壤的生化活性大小及其相关性进行研究，结果表明，草地退化后其土壤生化活性受到不同程度的影响，其影响明显地与退化程度有关；土壤生化活性大小有随退化程度增高而减小的趋势，但差异并非都达到统计学上的显著性，而土壤生化活性间的相关性则显著地与草地退化程度有关，说明退化草地其土壤微生物间的协同作用受到显著影响，从而影响其土壤碳氮循环代谢途径，降低土壤肥力水平。

退化草地土壤生化活性研究

通过对三种不同退化程度的退化草地土壤生化活性进行测定和相关性分析，结果表明草地退化后其土壤生化活性受到不同程度的影响，表现为土壤生化活性随着退化程度增高而减小，但差异并非都达到统计学上的显著性，而土壤生化活性间的相关性则显著地与草地退化程度有关，说明退化草地土壤微生物间的协调作用受到显著影响，从而影响土壤氮素和碳素代谢途径。

阳离子脂质体包裹CpG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响

对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细胞介素 2 (IL 2 )诱生活性和免疫细胞数量、血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应 。

有机络合液肥对水稻、玉米的增产和品质改进效应

在水稻和玉米叶面喷施不同用量的“通丰 2 0”有机络合液肥试验 ,结果表明 ,该液肥能显著增加水稻和玉米产量和增进产品品质 ,以 3L/hm2 的喷施量效果为最佳 ,水稻和玉米平均分别增产 12 2 %和 14 3 % ,而且穗长、穗粒数和千粒重等明显增加、水稻空壳率和玉米秃尖显著降低 ;水稻粗蛋白含量和玉米VB2含量分别增加 2 7%和 6 4%。

四川广元地区野生大型真菌的分类研究及其新记录种

本文报道了该地区野生大型真菌320种，其中食、药用菌201种、有毒菌52种，食毒不明的67种等，分别隶属子2亚门4纲13目40科118属，其中有粉红毒伞Amanitalongistrita、葫芦地星Geastrumlageniforme、角孢丝盖伞Inocybenodulosospora、肉色蜡蘑Laccariavinaceoavellanea等全国新记录10种，四川省新记录种57种；从数量上看，以担子菌纲的菌类最多（276种），占总种数的86．25％；从生态特性看，主要以地生为主。

农作物秸秆资源的综合利用

本文对农作物秸秆的产量、开发利用现状、设备及存在的问题等方面进行了分析研究。

川西北退化草地土壤微生物数量与区系研究

通过对三种不同程度退化草地土壤微生物区系和数量的比较分析研究，结果表明不同程度的退化草地在土壤微生物种类与组成、优势菌群与数量等方面有较大差异，种类与数量有随退化程度增高而减少的趋势；三种退化草地土壤微生物数量以细菌占绝对优势，真菌和放线菌较少，并有明显的垂直分布和季节变动规律。

均匀设计法对产几丁质酶细菌C4发酵条件的优化

系统研究了碳源 ,氮源 ,起始pH值、培养基装量、培养温度和时间等因素对细菌C4产几丁质酶的影响。结果表明 ,碳、氮源分别以胶体几丁质、KNO3 和蛋白胨最好 ;在起始pH值 7.6～ 8.5 ,培养基装量为三角瓶体积的 12 % ,培养温度 2 8℃ ,振荡培养 (180r/min) 5d时最有利于几丁质酶的产生。在此基础上通过均匀设计法优化了发酵培养基配方。优化后的培养基配方为 :胶体几丁质 1.5 % ,蛋白胨 0 .5 5 % ,KNO3 0 .3% ,MgSO40 .0 9% ,Tween80 0 .0 0 5 %。在该条件下 ,几丁质酶活力达 2 .6 8U/mL ,比在原基础培养条件下的酶活力提高 90 .1%。

金针菇与凤尾菇科间原生质体融合研究

金针菇与凤尾菇皆属四极性异宗结合食用菌,其双核异核体菌株都具锁状联合遗传标记。本研究以金针菇和凤尾菇的双核异核菌株为亲本,将热灭活的凤尾菇原生质体,以PEG为融合剂,在高钙、高pH值条件下,与金针菇原生质体融合,结果从1329个再生菌株中选择出6株双亲细胞质和细胞核都融合的无锁状联合单核菌株,经融合核分裂技术处理后,融合核分裂成为具锁状联合的双核菌株。应用RAPD技术分析,证明融合子菌株均含有与双亲株同源的遗传物质,是真正的融合子菌株。

CpG序列和猪白细胞介素6基因转染表达对猪囊尾蚴基因疫苗免疫影响的研究

以猪囊尾蚴VTS76抗原基因和质粒VPIL 6、pUCl8 CpG免疫接种小鼠 ,检测了小鼠的体液及细胞免疫反应。结果发现 ,VPIL 6或pUC CpG与VTS76共同免疫小鼠的特异性抗体滴度、IgG含量、淋巴细胞白细胞介素 2诱生活性、脾细胞增殖反应和血液免疫细胞数量显著高于VTS76免疫组和对照组。证明VPIL 6和CpG序列能显著增强动物对DNA疫苗的细胞和体液免疫反应 。

平菇原生质体的高效制备及再生优化条件

以杂优1号平菇为出发菌株,对其原生质体制备、再生的各关键因子及条件进行比较研究,结果表明,其原生质体制备的优化条件为:以0·6mol/LMgSO4为稳渗剂配制浓度为15mg/mL新鲜溶壁酶液,菌丝与酶液比w/V=1mg∶8μL,取培养6d的菌丝200mg,自然pH下28℃小平板酶解6h,原生质体得率可达2·80×107个/mL.原生质体再生实验结果表明,50U/mL链霉素能有效控制平菇原生质体再生的杂菌污染.孟加拉红对平菇原生质体再生具强抑制作用,抑制率达93%.进一步研究证实,0·6mol/L的MgSO4、KCl等无机盐稳渗剂对原生质体制备的得率较高,而0·6mol/L的蔗糖作为稳渗剂的平菇原生质体再生率较高.

猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究

用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性 ,并免疫家兔制备高免血清 ,得到高效表达猪IL 6的质粒pGPIL 6 ,RT PCR确证 pGPIL 6在大肠杆菌中能正确转录 ,经SDS PAGE分析表达蛋白分子量为 4 9kD ,融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性 ,以此免疫家兔 ,可制备滴度为 1∶12 80 0

CpG序列及阳离子脂质体对猪带绦虫抗原基因免疫应答的影响

本实验将猪带绦虫抗原基因VTS76分别与pUC1 8质粒、重组pUC1 8 CpG质粒联合及阳离子脂质体包装后免疫小鼠。结果表明 :pUC1 8和 pUC1 8 CpG能显著提高免疫小鼠总IgG和特异性抗体水平 ,增加小鼠免疫细胞数量 ,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素 2的诱生活性。其中 ,pUC1 8 CpG的免疫增强效果更显著。阳离子脂质体包裹具有减少质粒用量。

猪生长激素基因的原核表达及其抗体制备

通过构建pGH基因的原核表达质粒,转化大肠埃希氏菌TOP10,经IPTG诱导,成功表达了重组猪生长激素的融合蛋白。经SDS PAGE分析,在分子质量50.4ku处有1条新的特异蛋白质条带。对以包涵体形式表达的融合蛋白进行SDS PAGE分离,并经透析得到了重组融合蛋白,以此融合蛋白免疫家兔,制备并纯化了抗pGH多克隆抗体,经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹分析和免疫组织化学方法检测,此抗体具有较高效价和特异性。成功地表达了pGH基因并获得了多克隆抗体。

猪淋巴细胞白细胞介素-6(PIL-6)基因的克隆和序列分析

将猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 4 8h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 6基因 (PIL 6 ) ,并克隆到pUC18载体测序 .结果发现 ,PIL 6的cDNA长度为 74 1bp ,开放阅读框为 6 36bp ,编码 2 12个氨基酸 ,分子量2 4kD ,等电点 5 .5 ;其 4 6～ 12 9bp编码PIL 6的信号肽序列 ,130～ 6 81编码PIL

一株拮抗姜瘟青枯劳尔氏菌的泛菌的分离及鉴定

从生姜田土中分离到一株对姜瘟青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacarum)有强拮抗作用的泛菌菌株Q6,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征的鉴定及16S rDNA序列的分析.以16S rDNA序列为基础构建了包括12株相关种属细菌在内的系统发育树,其中与11个泛菌属的菌株的16S rDNA序列的同源性为95.54%～99%.

几丁质酶产生菌C4发酵培养基优化及其对Bt的增效作用研究

为提高几丁质酶产生菌C4的产酶效率,加强其对Bt(Bacillus thuringiensis)的增效作用,本研究通过培养基优化,筛选出了该菌发酵优化培养基,配方为:蛋白胨0.8%,酵母膏0.8%KNO30.8%,MgSO40.05%,KH2PO40.03%,pH 7.5.28℃,180 r/min,培养48 h至对数期,加入1.0%的胶体几丁质,诱导C4菌产生几丁质酶.在此条件下,C4菌产酶周期由5 d缩短为4 d;几丁质酶活力由2.68 U/mL提高到5.95 U/mL.用此发酵菌液与Bt菌液等量混合使用,Bt的杀虫效果提高了47.8%.