云南萝芙木叶愈伤组织诱导与植株再生

研究了云南萝芙木叶愈伤组织的诱导及器官发生条件.结果表明:诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;诱导愈伤组织芽分化和增殖的培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;根分化的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.8 mg/L;生根苗经练苗后移栽,成活率达90%,生长良好.

生物-非离子型表面活性剂对土壤石油污染的清除

为了研究鼠李糖脂与化学型表面活性剂复配体系清除土壤石油污染的效果,以吐温和司盘系列非离子型表面活性剂为研究对象,通过动态接触角测量仪测定各单组分的胶束浓度,进而考察鼠李糖脂浸膏与4种非离子型表面活性剂的最佳复配比例,并对其模拟石油污染土壤的清除石油效果及影响因素进行评价。结果表明,二元复配的非离子型表面活性剂体系比单一组分的清除石油效果好,添加少量的鼠李糖脂可大幅度降低复配体系的表面张力,清除石油效果明显提高。当0.3 g/L鼠李糖脂与4.0 g/L司盘60复配、固液比为1∶20(m/V,g∶mL),水浴为70℃时,复配体系对石油的去除率达到79.64%,2次清洗对石油的去除率可提高到82.91%。

油菜线粒体DNA提取纯化方法研究

以油菜为实验材料,探讨了植物线粒体DNA提取纯化过程中的影响因素,构建了一套快捷、经济、高效的植物线粒体DNA提取纯化方法.该方法结合差速离心和密度梯度离心分离得到线粒体,酶消化处理去除其他基因组的污染,用SDS与蛋白酶裂解线粒体,通过高盐沉淀,有机溶剂抽提,最后再用CTAB纯化得到mtDNA.用该方法提取的油菜线粒体DNA,经紫外分光光度计测定其纯度、限制性内切酶进行酶切.结果表明,此提取方法得到的mtDNA,其纯度可以满足后续遗传学分析.该法适用于不同植物材料mtDNA的提取纯化.

萝芙木人工繁殖研究进展

萝芙木是一种重要的药用植物,从其根中提制的生物碱利血平具有良好的降压和镇静效果。萝芙木的市场需求大,野生资源日益减少,自然状态下繁殖率低,大规模人工繁殖和栽培萝芙木是解决问题的关键。该试验从种子育苗、营养繁殖和组织培养3个方面对萝芙木的人工繁殖技术进行了介绍,指出传统育苗与现代生物技术相结合是解决萝芙木种苗短缺的有效途径。

洋葱挥发油的抗真菌作用及其机理

采用砂堡培养基液体稀释培养法和薄层色谱分析法研究了洋葱挥发油抗真菌效果及机理,以期发现天然抗真菌药物,开发洋葱资源．结果表明,洋葱挥发油提取物对酿酒酵母、白假丝酵母、新生(?)球菌、黑曲霉、黄曲霉、红曲霉、青霉等真菌的生长有较强的抑制作用;其最低抑菌浓度酿酒酵母和白假丝酵母为0．25％,新生隐球菌为0．50％．薄层色谱分析表明:洋葱挥发油处理后的白假丝酵母的羊毛固醇、麦角固醇的含量降低,而角鲨烯的含量增高,说明洋葱挥发油可能抑制白假丝酵母麦角固醇的早期合成．

植物性提取剂对松材线虫活性影响测定

为筛选具杀线虫活性的植物材料,测定了油茶籽饼等8种植物的甲醇或水粗提物对离体松材线虫的毒杀效果,并对接种后的马尾松进行防效试验。结果表明:8种植物的14种提取物对离体松材线虫均具有一定的抑制作用。其中油茶籽饼和雷公藤叶的水提取液(50 mg/mL)对离体松材线虫48 h后的活性抑制作用均达到100%。用10 mg/mL油茶籽饼和20 mg/mL雷公藤叶水提取液浸泡处理24 h,可以完全杀死马尾松苗离体茎段中接种的松材线虫。盆栽防效试验结果表明,油茶籽饼和雷公藤叶水提取液(50 mg/mL)浇灌2 a生马尾松苗后,可以有效抑制寄主马尾松中接种的松材线虫活性,特别是油茶籽饼效果最好。

“基础生理生化实验”综合性实验教学设计与探讨

"基础生理生化实验"是一门实践性、综合性很强的课程。本文以"植物生长素物质对插枝生根影响"为例阐述了开设综合性实验的意义,探讨了综合性实验的教学模式,实现了实验教学内容的合理拓展,真正体现了学生在实践中的主动性。

云南萝芙木中利血平含量测定方法的建立

通过分光光度法建立了一套简便、准确检测云南萝芙木中利血平的新方法并确定其最适反应体系。该方法基于利血平芳香环结构与2，4-二硝基-6-溴苯胺重氮化盐偶合反应，其红褐色偶合产物与利血平浓度呈正相关。结果表明，该方法反应灵敏、专一，产物稳定性好。反应体系最适检测波长510 nm，最适反应温度和时间分别为40℃、10 min，最适反应摩尔比为1︰1，反应终止0.5 h检测适宜，体系反应过程宜遮光。利血平在0～60μg/mL遵从比尔定律。通过对萝芙木甲醇浸提物的检测结果表明，该方法与HPLC法没有明显差异，有效性高，适合萝芙木原料及产品中利血平的快速检测及其质量监控。

急性臭氧胁迫对6种园林景观灌木生理的影响

为探讨臭氧污染对热带城市常见园林植物的胁迫影响,分别用质量浓度为0.43、0.86 mg·m-3的臭氧,人工熏蒸胁迫夹竹桃、朱瑾、金叶女贞、金边假连翘、三角梅、栀子花6种景观灌木,8 h后分别对相对渗透率、脯氨酸、叶绿素3个生理指标及后续表观变化进行研究。结果表明:相对渗透率、总叶绿素指标对6种植物抗逆性强弱的评价结果一致,都是随着臭氧胁迫浓度增大而变化幅度增加,可以作为园林植物臭氧抗逆性强弱的参考指标。臭氧胁迫下脯氨酸积累不明显(夹竹桃除外),表现为伤害性的合成减少。叶片表观变化为产生坏疽癍、退绿乃至落叶。6种灌木抗臭氧能力强弱依次为:夹竹桃、金边假连翘、栀子花、三角梅、金叶女贞和朱瑾。试验结果可为热带地区筛选抗臭氧树种提供参考。

全球变暖对物种分布的影响研究进展

综述了物种分布对全球变暖的响应.研究表明:在全球变暖下物种分布发生变化,这将导致部分物种灭绝、发生物种更替、生物群落结构和数量都会发生变化,预示着农林业生产的布局将被迫发生改变.

博白大果油茶ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以博白大果油茶Camellia gigantocarpa Hu et Huang为材料,通过单因素实验设计和正交设计L18(35)对影响PCR反应体系的主要成分及PCR扩增程序进行优化。建立了稳定的、可重复的博白大果油茶ISSR-PCR扩增反应体系。在20μL的反应体系中,Mg2+浓度为2.5mmol/L,模板DNA用量为20ng,Taq DNA聚合酶为1.75U,dNTPs浓度为0.25mmol/L,引物浓度为0.6mmol/L。反应程序为:94℃预变性4min,94℃变性30s,50℃退火45s,72℃延伸90s,35个循环,72℃延伸7min,4℃保存。

松材线虫侵染对松树苯丙氨酸解氨酶及酚类物质的影响

以湿地松(Pinus elliottii Engelm)、日本黑松(Pinus thunbergii Parl)为材料,研究松材线虫[Bursaphelenchus xylophilus(Steiner&Buhrer,1934)Nickle]感染对苯丙氨酸解氨酶和酚类物质的影响.两种松树的苯丙氨酸解氨酶的活性在发病过程中都有明显增加,并且伴随着酶活性的变化,各种苯丙烷次生代谢产物,如总酚、类黄酮的含量也发生明显的变化.但湿地松在苯丙氨酸解氨酶活力和酚类物质的积累上的变化比黑松要大些.结果表明,松材线虫病的发生、发展与寄主植物苯丙氨酸解氨酶活性和酚类物质含量变化有关.

马尾松苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与序列分析

苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia lyase,PAL)是苯丙烷类代谢的关键酶,催化苯丙氨酸转化为肉桂酸,促进黄酮、木质素等次生代谢产物的合成。根据其他植物PAL基因的DNA保守序列设计的简并引物,经过PCR扩增,得到1条864 bp的特异性片段,编码288个氨基酸。通过分析其序列和编码的氨基酸序列,发现其与其他物种的PAL基因高度同源,证实为马尾松PAL基因的核心序列。所得序列已经登陆在NCBI的Genbank中,序列号为GQ142010。

不同品种油茶花粉生物学特性研究

以湖南省林业科学院选育的新品种"湘林210"子代优株‘#13-4’、‘#1-5-4’、‘#1-6-9’、‘#1-7-16’、‘#1-12-3’为试材,对5个优株油茶的花粉量、花粉生活力以及传粉昆虫的特性进行观察研究。结果表明:不同油茶品种的花粉量存在一定的差异,‘#1-3-4’花粉量最高达到每枚花药6 060.3粒,经测定该优株的花粉生活力也较其它优株高,达到(84.5±0.25)%(P<0.05);访花昆虫主要是蜂类、蝇类,也有少量的蝶类;主要的传粉昆虫为油茶地蜂和大分舌蜂;不同昆虫在不同油茶优株间的访花频率存在一定差异,蜂类较多的访问‘#1-5-4’油茶树,而蝇类则较多的访问‘#1-12-3’油茶树。

马尾松对松材线虫病抗病性差异的研究进展

松材线虫病是松树的一种毁灭性病害,不同种源的马尾松的抗病性存在差异.就马尾松对松材线虫病的抗病性差异研究进展进行了综述.目前,马尾松抗病性的研究主要有以下5个方面:①不同树龄与抗病性之间的关系;②不同地理种源马尾松对松材线虫病抗病性的差异;③与种源抗病性有关的主要成分;④马尾松的诱导抗病性;⑤马尾松抗病育种.马尾松的抗病性与多种因素有关系,通常具有抗性的马尾松一般生长状况较好;马尾松的抗病物质很复杂,到目前为止,人们已经发现了马尾松的一些抗病物质的种类,并对这些物质的结构进行了研究,但对这些抗性物质的产生和马尾松抗病机理还有待于进一步的研究.

华蟾素分散片溶出度的研究

目的：建立华蟾素分散片溶出度的测定方法。方法：依据《中国药典》2005年版溶出度测定法（附录XC第三法），以水为溶出介质，转速75r／min，45min取样后，其溶出量不得低于标示量的70％。结果：华蟾素分散片溶出度测定方法在15—150肛g呈线性（r=0．9995），回收率99．32％，RSD=1．05％。结论：本法稳定、简便、准确。

云南萝芙木中三种生物碱含量的HPLC法测定

运用高效液相色谱法(HPLC)测定云南萝芙木中育亨宾、阿吗碱、利血平3种生物碱的含量。采用岛津VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-(0.004 mol/L二乙胺)水系统,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长278 nm,柱温30℃。结果表明,育亨宾在0.140～0.700μg(r=0.999 1)、阿吗碱在0.096～0.480μg(r=0.998 7)、利血平在0.104～0.520μg(r=0.998 8)范围内呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.4%、95.5%、96.3%,变异系数分别为1.15%、0.48%、1.14%。该方法可同时检测萝芙木根中育亨宾、阿吗碱、利血平3种生物碱,准确,快速,简便。

松材线虫对湿地松叶片质膜和可溶性糖的影响

松材线虫病由松材线虫引起,是一种毁灭性的森林病害,到目前为止还没有找到有效的途径来防治此病.以接种松材线虫的湿地松来作为实验材料,对感病湿地松叶片内可溶性糖含量与叶片质膜透性变化的关系进行研究.结果表明:湿地松叶片的质膜透性与可溶性糖含量呈正相关,可溶性糖含量的多少在湿地松抗病过程中有重要作用;可溶性糖含量的增加是湿地松产生抗性的一种积极表现,可溶性糖含量的增加可以作为湿地松产生抗性的一个理化指标.

马尾松捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cab-Pm1的克隆与原核表达

光合作用是光合生物将光能转化为化学能,并同时将无机物转化成有机物贮存在生物体的过程。现已证明光合生物对光能的吸收、传递和转化都是在光合膜上具有一定的分子排列和空间构象的色素蛋白复合体上进行的（郁飞等,2001）。

马尾松苯丙氨酸解氨酶基因cDNA全长克隆与序列分析

苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)是连接植物初级代谢和次级代谢途径关键酶、限速酶,催化苯丙氨酸转化为肉桂酸,促进黄酮、木质素等次生代谢产物的合成,在植物抗病过程中有重要意义.采用RT-PCR和RACE技术,从马尾松中克隆到PAL基因的cDNA全长.此cDNA全长2 700 bp,包括2 154 bp的完整ORF,编码717个氨基酸的蛋白,相对分子质量与等电点分别为78 200和5.81.其推导的蛋白序列与火炬松(Pinustaeda)、欧洲赤松(Pinus sylvestris)和海岸松(Pinus pinaster)的苯丙氨酸解氨酶同源性分别为98.2%、99.4%和97.8%.