对乙酰氨基酚诱导HepG2细胞氧化应激损伤模型的构建

目的建立以对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)诱导的HepG2细胞氧化应激损伤模型。方法噻唑蓝〔MTT〕法检测HepG2细胞活力;微板法检测细胞培养液中天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)活性;利用荧光探针(DCFH-DA)法对HepG2细胞内活性氧的水平(ROS)进行检测;JC-1染色法检测不同浓度APAP对HepG2细胞线粒体膜电位的影响;Hoechst染色观察细胞凋亡情况。结果随着APAP处理时间和浓度增加,HepG2细胞相对活力明显降低,细胞数量减少,并伴随着皱缩、变圆甚至漂浮等形态学变化;细胞培养液中的ALT、AST和LDH含量显著升高,而细胞中的CAT和SOD活性明显下降;另外,胞内ROS水平和线粒体膜电位发生显著变化,细胞凋亡显著增加。诱导Hep G2细胞产生氧化应激损伤模型最佳条件为APAP浓度30mmol·L-1,细胞作用时间12h。结论本研究构建了APAP体外氧化应激细胞损伤模型,为保肝活性药物筛选及其作用机制研究提供细胞学模型。

GC-MS分析牛樟芝多糖的单糖组成及其抗氧化活性

研究牛樟芝的单糖组成和多糖的体外抗氧化活性。采用水提醇沉法提取牛樟芝多糖。以葡萄糖为标准品,苯酚硫酸法测定多糖的总糖含量。多糖经三氟乙酸水解后,糖腈乙酸酯法进行衍生化,采用气相色谱法-质谱法联用(GC-MS)分析测定单糖组成。通过DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基的清除能力评价牛樟芝多糖的体外抗氧化能力。结果表明,牛樟芝多糖的得率为3.02%±0.09%,总糖(以葡萄糖计)含量为55.42%±2.13%,单糖组成为半乳糖、葡萄糖、甘露糖,摩尔比为1∶7.14∶0.96。体外抗氧化实验结果表明牛樟芝多糖对DPPH自由基,ABTS自由基和OH自由基清除的IC50分别为(0.584±0.008)、(1.182±0.058)、(1.384±0.133) mg/mL。GC-MS用于检测牛樟芝多糖的单糖组成简单、快速、灵敏,牛樟芝多糖对三种不同自由基具有一定的清除作用。

荣昌区25家公立医疗机构药事管理与临床药学服务现状调查与分析

通过调查荣昌区公立医院药事管理与临床药学现状,探讨优化我区药事管理与临床药学服务方法。方法 采用网络问卷调查法,对我区27家公立医疗机构的药剂科人员进行调查,对结果进行统计分析,从中找到存在问题并针对性提出建议。结果 共回收问卷25份,回收率92.5%,其中合格问卷25份,合格率100%。我区药学专业技术人员总数占医院专业技术人员总数的比例在0%~8%之间,药学专业技术人数占总专业技术人数占比平均为5.6%,仅一家医院药学专业技术人员比例达到国家要求的比例(8%)。25家医院中,3家二级医院均配备了专职临床药师,1家(1名)未达到国家相关规定(3名),22家一级医院均未配备专职临床药师,仅7家有兼职临床药师。25家医院均已开展了处方点评、药学咨询和药物不良反应监测工作,其中二级医院均开展了处方专项点评,二级医院尚未开展;2家二级医院开展了药师驻科工作,一级医院均未开展;3家二级医院和22.7%的一级医院开展了药学会诊;25家医院均未开展精准用药工作(基因检测、血药浓度监测)。3家二级医院提升药学服务能力的主要手段有到大型三甲医院进修学习、参加市内外学术讲座、院内学习,仅1家二级医院开展了科内学习;仅13.6%的一级医院派送药学人员到区二级医院学习,50%的医院参加了区内讲座,68%的医院参加了院内讲座。25家公立医院药学人员均认为本单位存在药学学科发展缓慢、药学人员配备不足、临床药学工作开展不够问题,22家一级医院均认为本单位药事管理信息化水平低、药学人员进行学习机会少、药品配备不齐全,25家医院均期望得到上级医疗机构专家的长期指导。结论 重视药学学科发展,引进高层次药学专业技术人员,通过多途径提升药学专业技术人员的能力(组织药学人员外出进修学习、参加线上线下学术讲座等),加强临床药学工作建设,从而达到促进患者合理用药,保障患者用药安全的目的。