联检反应性鉴别非反应性献血者血浆标本乙型肝炎病毒感染情况的研究

目的 分析常规血筛中核酸单检系统联检结果反应性而初次鉴别结果非反应(NRR)献血者标本中HBV的感染情况,以期为NRR标本后续相关研究提供建议及数据支持。方法 对60份常规血筛中酶免结果阴性,核酸单检系统检测结果为NRR的献血者血浆标本进行HCV RNA和HIV RNA重复鉴别检测、HBV DNA病毒载量检测、HBV pgRNA病毒拷贝量检测,并对HBV DNA病毒载量和HBV pgRNA病毒拷贝量检测结果为阳性的NRR标本进行HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb的血清学检测,分析其中血清学感染状态和隐匿性乙型肝炎(OBI)的感染情况。结果 60份NRR标本HCV RNA及HIV RNA重复鉴别结果均为阴性。60份NRR标本中HBV DNA定量检测结果为阳性的有9份(15%),HBV DNA浓度均<10 IU/mL;HBV pgRNA定量检测结果为阳性的有9份(15%),其病毒拷贝量X±SD为289±58.25(copies/mL);HBV DNA阳性且HBV pgRNA阳性NRR标本有2份(3.33%)。9份HBV DNA阳性标本中HBcAb阳性率最高为66.67%,其中有7份(77.78%)并确认为血清学阳性OBI。9份HBV pgRNA阳性标本中HBcAb阳性标本的pgRNA拷贝量略高于其阴性标本,而HBsAb和HBeAb阳性标本的pgRNA拷贝量均低于其对应阴性样。近6年中心单检核酸系统中NRR标本比例波动范围0.09%~0.13%。结论 HBV DNA及HBV pgRNA存在于NRR标本中,HBV DNA和/或HBV pgRNA阳性标本中可检出相关血清学感染性标志物,NRR标本具有一定OBI感染的潜在风险,HBV DNA和HBV pgRNA联合检测,可以更好地确认NRR中的病毒感染状态,提高输血安全性。

都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱差异性分析

目的建立快速分子指纹图谱分析法,应用于都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱差异性分析。方法以野生株噬菌体M13微卫星特异核心序列为单一引物,分别进行都柏林念珠菌和白念珠菌基因组DNA的聚合酶链反应(PCR)扩增,并将产生的分子指纹图谱分别应用琼脂糖凝胶电泳和微流DNA芯片分析。结果17株都柏林念珠菌和白念珠菌基因组DNA的扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析,见都柏林念珠菌和白念珠菌各有5条固定阳性条带出现,两者之间阳性条带大小差异有统计学意义。微流DNA芯片显示都柏林念珠菌固定出现阳性条带大小依次为960、1177、1297、1495、1797bp;白念珠菌固定出现阳性条带大小依次为653、1323、1531、2021、2875bp。结论都柏林念珠菌和白念珠菌分子指纹图谱存在显著差别,可应用于两者的快速鉴别,尤其是微流DNA芯片法简便、快速、重复性好,更适合于大规模分子流行病学监测。

时间分辨荧光免疫检测应用于献血者HBsAg筛查的研究

目的通过与酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)进行对比分析,探讨时间分辨荧光检测技术(time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)在献血者样本乙型肝炎表面抗原(HBsAg)筛查中的应用价值。方法分别采用两个厂家的ELISA HBsAg试剂和TRFIA试剂检测国家卫生健康委临床检验中心HBsAg血清盘和烟台中心血站献血者样本,分析两种检测方法的灵敏度、特异性等性能指标。结果对于HBsAg血清盘检测结果TRFIA的灵敏度为99.43%,特异性为97.54%,阳性预测值(positive predictive value,PPV)为98.88%,阴性预测值(negative predictive value,NPV)为98.76%,约登指数为0.9697,均显著高于ELISA。对于5317例无偿献血者的筛查结果,TRFIA的灵敏度为100.00%,特异性为99.87%,PPV为66.67%,NPV为100.00%,约登指数为0.9987,灵敏度、NPV和约登指数三项指标优于ELISA,三者检测结果差异无统计学意义。结论TRFIA的检测灵敏度优于ELISA,适于向血液筛查推广。

烟台地区血液筛查乙型肝炎病毒残余风险评估

目的评估烟台地区经血传播乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的残余风险。方法收集2016年1月至2019年12月烟台市中心血站243787例无偿献血者的乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)以及HBV DNA的筛查数据,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HBsAg,采用发病率-窗口期模型分别评估重复献血者及初次献血者传播乙型肝炎的残余风险,其中初次献血者的发病率采用校正系数法计算。结果2016至2019年烟台市中心血站经HBsAg筛查后重复献血者及初次献血者的乙型肝炎残余风险分别为133.861/10万人次以及566.440/10万人次,核酸筛查后重复献血者及初次献血者的乙型肝炎残余风险分别为67.156/10万人次以及284.172/10万人次。结论烟台地区重复献血者的乙型肝炎残余风险低于初次献血者,增加核酸检测可降低HBV残余风险。