FCN3调控肝细胞癌细胞增殖、迁移和上皮间质化

目的:探讨纤维胶凝蛋白3(FCN3)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及对HCC细胞增殖、迁移和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法:首先利用生物信息学技术分析FCN3在HCC中的表达及与患者预后的关系;然后通过qRT-PCR、免疫组化进一步检测FCN3在HCC细胞和组织中的表达。构建过表达FCN3的Huh7稳转细胞株,通过CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测FCN3对HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响;通过Western Blot实验检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达水平;通过裸鼠皮下成瘤实验,在体内探究FCN3对HCC增殖的影响。结果:生物信息学分析表明FCN3在HCC组织中的表达水平显著低于癌旁组织,高表达FCN3的HCC患者具有更长的总体生存时间。qRT-PCR表明,与正常肝细胞相比,HCC细胞株Huh-7、Hep3B和SNU-449中FCN3 mRNA表达水平显著降低。免疫组化表明,FCN3在HCC组织中染色阳性细胞的比例显著低于癌旁组织。选取FCN3相对表达量最低的Huh-7细胞株进行慢病毒稳转FCN3基因,得到稳定OE-Huh7和空载慢病毒稳转的NC-Huh7。Transwell实验、划痕实验、CCK8实验表明,与NC-Huh7组相比,OE-Huh7组的迁移、增殖、侵袭能力显著降低;Western Blot结果显示,OE-Huh7组Vimentin、N-cadherin蛋白表达量降低,E-cadherin蛋白表达量升高。结论:FCN3在HCC中低表达且影响患者的预后,过表达其水平后可抑制HCC细胞的增殖、迁移及EMT。

肝细胞癌干性分型及其预后基因GSDMC的研究

目的:通过肝细胞癌干性分型筛查某些对免疫治疗反应更灵敏的患者,并验证其预后相关基因GSDMC。方法:从StemChecker数据库中提取26个干细胞基因组,采用共识聚类算法对癌症基因组图谱计划数据库中的328个肝细胞癌样本进行干性亚型鉴定。评估两种亚型在预后、肿瘤微环境成分和治疗反应方面的差异。然后,通过加权基因共表达网络分析、Cox回归和随机森林生存分析,筛选预后相关基因。最后,选择预后相关基因GSDMC进行实验验证。结果:根据单样本基因集富集分析,将肝细胞癌患者分为两种亚型(C1和C2)。C1和C2在生存率、免疫浸润水平和治疗反应方面存在显著差异。结合WGCNA,Cox回归和随机森林生存分析确定了4个预后相关基因(GSDMC,AOC1,OTX1,CASC9)。免疫印迹、免疫组织化学和实时荧光定量PCR表明,GSDMC在肝细胞癌组织和细胞中的表达降低。细胞成球实验表明GSDMC抑制肝细胞癌细胞的干性。结论:鉴定两种不同的干细胞亚型C1和C2,为肝细胞癌的临床异质性及其与预后、TME特征和免疫治疗提供了有价值的见解;GSDMC在肝细胞癌组织和细胞中的表达降低,GSDMC抑制肝细胞癌细胞的干性。