耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质研究

【目的】研究耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达,并检测其酶学性质,为耐热β-半乳糖苷酶的应用和工业化生产奠定基础。【方法】利用基因工程的原理和方法,将来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热β-半乳糖苷酶基因(bgaB)克隆到大肠杆菌pET表达系统(pET-28a(+)),并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将构建的重组菌(pET28a-bgaB)在含硫酸卡那霉素的液体LB培养基中以IPTG为诱导剂,对表达产物的最适反应温度、最适反应时间I、PTG诱导浓度、热稳定性及酶促动力学进行检测。【结果】成功构建了表达载体pET28a-bgaB,并测得耐热β-半乳糖苷酶的最适反应温度为65℃,最适反应时间为6 h,IPTG的最佳诱导浓度为1 mmol/L,且具有良好的热稳定性;在诱导后6 h,耐热β-半乳糖苷酶的表达量占菌体总可溶性蛋白的20%,表达效率较高;对透析蛋白进行蛋白质定量,蛋白质量浓度为0.75 mg/mL,透析蛋白的耐热β-半乳糖苷酶活性为75 U/mL,比活性为100 U/mg;酶促动力学研究表明,耐热β-半乳糖苷酶的反应常数为0.398μmol/mL,最大反应速度为27.435μmol/(min.mL)。【结论】耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中得到成功表达,并且在很大程度上提高了耐热β-半乳糖苷酶的活性。

水解羽毛粉与蒸制羽毛粉营养价值的比较研究

用饲养试验与氨基酸真可消化率测定相结合研究水解羽毛粉和蒸制羽毛粉对蛋鸡的饲养效果。结果表明:水解羽毛粉的TAAD为77.58%,蒸制羽毛粉的TAAD为71.84%,二者差异显著;以2%～4%的水解羽毛粉或2%蒸制羽毛粉等氮取代蛋鸡日粮中的豆粕,并维持适宜的赖氨酸、蛋氨酸水平,可提高蛋鸡生产水平,降低饲料成本2.21%～2.58%。

赖氨酸水平和性别对肉仔鸡胴体品质的影响

试验选用210只刚出壳的Hybro商品代混合健雏作为试验动物,分前(0～4周龄)后(5～8周龄)两期进行饲养试验。在饲喂相同基础饲粮(前期:2.90 Mcal/kg ME,21.0％ CP,1.02％Lys;后期:3.00 Mcal/kg ME,19.6％ CP,0.84％Lys)的基础上,添加不同水平的赖氨酸HCL,其添加量分别为0.0％、0.1％、0.2％和0.3％,相应命名为L0.0、L0.1、L0.2和L0.3处理组。各处理仔鸡0—3周龄群体网上平养,4～8周龄在蛋鸡笼上喂养,均自由采食,自由饮水。在网上平养阶段。

肉用仔鸡赖氨酸需要量的研究Ⅱ．赖氨酸水平对生产性能的影响

按出壳体重对等的原则，将海布罗混合健雏分成４组进行饲养试验。前后两期各组处理为：Ⅰ组喂基础饲粮，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ组分别添加０．１％，０．２％和０．３％的Ｌ－赖氨酸·ＨＣＬ．研究结果表明，在我国现行标准的能量和蛋白质条件下，赖氨酸水平对２，４，８周末体重无显著影响，但６周末体重Ⅱ，Ⅲ组极显著高于Ⅰ组，Ⅳ组也显著高于Ⅰ组；前期赖氨酸水平以１．１８％为好，后期以１．００％为佳。若把后期细分为５～６和７～８周龄，则赖氨酸水平分别为１．００％和０．８４％。

肉用仔鸡赖氨酸需要量的研究Ⅰ．赖氨酸水平与性别对胴体品质的影响

在前后期基础饲粮中分别添加０．０％、０．１％、０．２％、０．３％的Ｌ—赖氨酸·ＨＣＬ（基础饲粮赖氨酸含量分别为１．０２％和０．８４％）饲喂海布罗商品代仔鸡，８周龄结束时屠宰分割结果表明：添加赖氨酸对屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、脚重率、翅重率、腹脂率和肌胃重等均无显著影响（Ｐ＞０．０５）；性别对上述前５项指标及肌胃重也无明显作用（Ｐ＞０．０５），但公鸡腹脂率极显著低于母鸡（Ｐ＜０．０１），翅重率和脚重率则明显高于母鸡（Ｐ＜０．０５）。

瘦肉型生长猪赖氨酸需要量的研究

湖北白猪是选用英国大白猪与长白猪两个瘦肉型猪种及本地中小型早熟品种通城猪杂交育成的瘦肉型猪种。依据制订我国“瘦肉型猪饲养标准及典型日粮配方”的攻关要求,结合盛产棉花的湖北省蛋白质饲料不足的问题,用棉仁饼作饲料蛋白源,进行了瘦肉型猪赖氨酸需要量的研究试验。

酵母及其培养物对反刍动物生产性能的影响

本文综述了国内外大量有关酵母培养物影响反刍动物生产性能的研究 ,主要探讨其对采食量、产奶量、增重的影响。

补饲对仔猪双月断奶窝重的影响(二报)

按时等原则,将8窝春产仔猪分为试验组和对照组。试验组采取早期诱食。增补夜食、改善补食营养、添加有关药物;时照组按生产常规饲养管理。结果试验组仔猪双月断奶窝重和35—60日龄个体日增重分别较对照组高21.08％和41.32％,每窝仔猪净收入增加144.68元。

枯草芽孢杆菌bioI基因的克隆和高效表达及BioI蛋白的纯化

【目的】克隆和表达枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)bioI基因并纯化表达产物。【方法】提取B.sub-tilis1A747基因组DNA,从中扩增bioI基因并将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)的表达载体pET-28a(+)上,构建bioI的表达载体pET28a-bioI。将重组质粒pET28a-bioI电转化到大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,对表达产物BioI用Ni2+-NAT亲和层析树脂进行纯化,并对纯化蛋白进行波长扫描。【结果】成功构建了表达载体pET28a-bioI,酶切鉴定结果正确并在大肠杆菌中表达成功,经IPTG诱导8 h后,重组蛋白BioI的表达量占总可溶性蛋白的20%;波长扫描发现,重组蛋白BioI在400 nm处有特征吸收峰。【结论】bioI基因克隆表达成功,其表达产物BioI具有P450蛋白的特征,为蛋白性质的进一步研究和抗体的制备奠定了基础。

犬的营养需要与饲料配方

狗属哺乳纲,食肉目,犬科动物,其饲养已遍及世界各地,美国非常普遍。我国养犬历史虽很悠久,但真正走向经济生产还是近年之事,不少专业户饲养菜犬、种狼犬、玩赏犬等获得了较高利润,上升之势依然不减。

猪饲粮养分消化率不同测定方法的比较

本试验采用全收粪法和Cr_2O_3法测定两种饲粮干物质、有机物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、无氮浸出物和能量消化率,并用离体消化法测定干物质和能量消化率。结果表明,Cr_2O_3法测得各种养分及能量消化率与全收粪法基本一致(P>0.05),离体法两项消化率也与全收粪法吻合。

高剂量铜对肉仔鸡生产性能的影响

选择海布罗品种商品代1日龄混合雏234只，分别分到高能高蛋、中能中蛋和低能低蛋的高铜组（250mgCu／kg）和低铜组（8mgCu／kg），结果表明高铜对肉仔鸡前期生长有一定的促进作用，且基础饲粮营养水平愈高，此作用愈大，但对后期和全期生长无显著影响，增加饲粮ME和CP水平对前、后期生长均有促进作用，仅超过一定水平后，则无明显改进（全期生长）．

补饲对仔猪双月断奶窝重的影响(初报)

按对等原则,将26窝春产仔猪分为试验组和对照组。试验组采取早期诱食、增补夜食、改善补食营养;对照组按生产常规饲养管理。结果试验组仔猪双月断奶窝重和35—60日龄个体日增重分别较对照组高40.4％和40.9％(P<0.05)),仔猪哺育率也有提高。

生长猪沉积N及尿N与吸收N的关系

为配合湖北白猪饲养标准化课题,研究蛋白质食入量对生长猪N沉积量的影响,以寻求较佳的N供给量及合理利用饲料蛋白质,故进行此试验。材料与方法时间 1984年5月与10月。地点华中农业大学试验猪场。试猪试验一为湖北白猪3系3世代第2胎生长猪;试验二为该猪3系4世代第1胎生长猪。体重均在30—40千克之间。设计与处理试验一以5种不同蛋白质食入量分为5组;试验二以同蛋白质食入量分为2组。均采用窝组配对分组,每组3头。

温度对兰州鲇消化酶活性的影响

测定了兰州鲇(Silurus lanzhouensis)胃、肝胰脏、前肠、中肠、后肠在不同温度(15℃、20℃、25℃、30℃、37℃4、2℃、47℃)条件下的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。结果表明,随温度的升高,各种酶活性的变化均表现为先增高后下降直至不能检出。消化道各部位蛋白酶的最适温度均为42℃;淀粉酶的最适温度除胃和肝胰脏为37℃外,其他部位均为30℃;脂肪酶的最适温度除后肠为30℃外,其他部位均为25℃。消化酶的最适温度高于其生活水域的水温,反映出消化酶作为酶蛋白的耐热性。最适温度下,蛋白酶活性前肠≈中肠>后肠>肝胰脏≈胃;淀粉酶活性前肠>中肠>肝胰脏>胃>后肠;脂肪酶活性中肠>后肠>前肠≈肝胰脏>胃。研究结果还表明,前肠和中肠是兰州鲇消化蛋白的主要部位,中肠是其消化脂肪的主要部位,而前肠是其消化淀粉的主要部位。在消化酶表现出活性的温度范围内,蛋白酶活性明显高于淀粉酶活性。实验还表明脂肪酶具有活性的温度范围较蛋白酶和淀粉酶窄。

日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响

选择4头安装有永久性瘤胃瘘管的泌乳奶牛,按4×4拉丁方设计,分别饲喂精粗比约为30∶70的“高低质粗料型”日粮、30∶70的混合型高青贮日粮、50∶50的精粗料比例相当的日粮及65∶35的高精料日粮等4种不同精粗比日粮,研究日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响。结果显示,日粮精粗比对奶牛瘤胃pH值,氨氮质量浓度,总挥发性脂肪酸、丙酸、丁酸的浓度和乙酸/丙酸、(乙酸+丁酸)/丙酸有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)影响,而对瘤胃乙酸浓度影响不显著(P>0.05);饲喂不同精粗比日粮,奶牛乳产量、4%标准乳产量均有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异,而乳脂、乳蛋白、乳糖、非脂固形物及总固形物的含量差异均不显著(P>0.05),但其产量随乳产量的增加而增加,存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异。结果表明,4种精粗比日粮能使瘤胃发酵和乳成分含量保持稳定,但影响瘤胃挥发性脂肪酸浓度和乳产量;低质和优质粗料的合理搭配有利于稳定瘤胃内环境和乳脂含量,且能改善泌乳性能。

兰州鲇肌肉生化成分分析及营养学评价

测定了黄河中上游特有鱼类兰州鲇的肌肉生化成分并对其进行了营养学评价。结果表明,兰州鲇肌肉(鲜样)中粗蛋白质量分数(17.4±0.7)%,粗脂肪(2.22±1.09)%,粗灰分(1.12±0.09)%,水分(80.4±0.8)%。肌肉中含有18种氨基酸,总量为(71.29±3.71)%(质量分数,干样),其中含量最高的为谷氨酸(10.43±0.47)%,含量最低的为胱氨酸(0.663±0.040)%,8种人体必需氨基酸总量为(30.24±2.18)%,占氨基酸总量的42.38%,其构成比例符合FAO/WHO标准。兰州鲇肌肉中限制性氨基酸为缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸,必需氨基酸指数(EAAI)为69.3,4种鲜味氨基酸总质量分数为24.62%(干样)。不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的65.21%,并以油酸(C18∶1)和亚油酸(C18∶2)为主。磷含量显著高于其余12种矿物元素(p<0.05),锌在8种微量元素中含量(10.18mg/kg,鲜样)最高,铁(8.31mg/kg,鲜样)次之,硒含量(0.31mg/kg,鲜样)丰富。从营养学角度,兰州鲇是一种营养价值较高的优质鱼类。

补饲对仔猪35日龄窝重的影响

按照对等原则附１９９１年春产的１０窝纯汉白仔猪分为试验组和对照组．试验组采取早期诱食增补夜食、改善补食营养，对照组按该场生产常规饲养管理．结果３５日龄仔猪的成活率和３５日龄窝重试验组分别比对照组高１２．４８％（Ｐ＜０．０１）和１５．２７％（Ｐ＜０．０５），而各阶段的个体日增重和个体重均差异不显著。

饲喂方式对生长肥育猪生产性能的影响

1 材料与方法 1.1 试猪选用汉中地区种猪场1988年春产杜洛克×汉白杂种一代双月断奶健康仔猪32头,平均体重22kg,按窝重分组将仔猪分到4个小组。除试1组为6雌2雄外,其余各小组均为5雌3雄。 1.2

仔猪早期断奶试验

仔猪早期断奶是提高母猪生产力的重要措施。汉中地区种猪场近年出现了产仔季节拖后的现象,致使春季产仔拖到夏季,秋季产仔拖到冬季,不仅影响母猪年产仔胎数,还严重影响了哺乳仔猪的生长发育。根据近两年我们在该场进行的哺乳仔猪补饲试验以及该地区的饲料资源情况,为满足实际生产需要进行了此项试验。