神经生长颗粒含药血清对大鼠背根神经节生长的影响

目的:研究神经生长颗粒(NGG)含药血清对体外培养新生大鼠背根神经节生长及高分子量神经丝蛋白(NF-H)和生长相关蛋白43(GAP43)表达的影响。方法:采用体外大鼠背根神经节(DRG)植块培养,通过免疫荧光细胞化学法,观察不同剂量的含药血清对DRG神经突起生长的影响;采用DRG单细胞分离培养,通过实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别观察不同剂量的含药血清对DRG细胞NF-H和GAP43基因及蛋白表达的影响。结果:免疫荧光细胞化学法提示NGG含药血清能促进DRG神经突起的生长;实时荧光定量PCR和免疫印迹法结果提示NGG含药血清能增加体外培养的DRG细胞NF-H、GAP43mRNA和蛋白的表达。结论:NGG含药血清能促进体外培养DRG神经突起的生长并促进NF-H和GAP43的表达,表明NGG对发育期感觉神经元具有一定的神经营养作用。

腰椎管狭窄动物模型的实验研究

目的 :建立腰椎管狭窄 (lumbar spinal canal stenosis,L SCS)的动物模型 ,在此基础上进行步态、知觉过敏、电生理及组织学研究。方法 :L SCS组选用 8周的 Wistar大鼠 2 8只 ,切除腰 5腰椎棘突、椎弓 ,并移植碎骨片于此处。Sham手术组为 6只 ,仅切除椎弓。对照组为 3只 ,不作任何处理。术后 8、9个月进行步态、知觉过敏及脊髓体感诱发电位的波幅 (SSEP)的测定 ,同时 ,术后 9个月进行组织学分析。结果 :LSCS组 ,术后 8个月步行距离明显减少 ,步容出现变化 ,Seep的振幅明显减小及知觉出现过敏。术后 9个月步行距离明显减少、步容出现变化、知觉出现过敏及 Seep的振幅明显减小的同时 ,椎管横断面积减少 ,粗纤维减少而细纤维增多。结论 :腰椎管狭窄后 ,大鼠步行分析、电生理学及组织学均出现明显异常。为以后药物治疗的研究打下基础。

雪旺氏细胞和成纤维细胞体外培养的实验研究

目的：本实验通过雪旺氏细胞（Ｓｃ）和成纤维细胞（Ｆｂ）不同培养方法的研究来获得不同比例共存的雪旺氏细胞和成纤维细胞。方法：分散培养（１）差速贴壁法，（２）阿糖胞苷处理法。观察：（１）相差显微镜，（２）Ｓ－１００免疫细胞化学染色，（３）细胞计数。结果：被Ｓ－１００染色染上的雪旺氏细胞在相差显微镜下观察到的活体雪旺氏细胞的形态是一致的，细胞呈梭形。经差速贴壁法和阿糖胞苷处理后３天雪旺氏细胞所占比例为９５％，４～５周雪旺氏细胞仍占７０％。结论：通过对雪旺氏细胞和成纤维细胞培养的不同方法的研究，从而获得自已所需要的细胞培养状态。

补阳还五汤对大鼠坐骨神经损伤的修复作用

目的 :研究补阳还五汤(BYHWD)对大鼠坐骨神经夹伤损伤的修复作用。方法 :SD雄性大鼠50只,随机分为BYHWD高、中、低剂量组(剂量分别为25.92、12.96、6.48 g生药/kg)、弥可保组(剂量为625μg/kg)、生理盐水阴性对照组。行大鼠坐骨神经夹伤5 mm术,术后每日灌胃给药,持续4周。于术后1、2、3、4周行足迹实验,测定展趾功能,术后4周行电生理检测,测定复合肌动作电位和神经干动作电位,组织形态学分析,运用光镜和电镜组织学方法对手术侧再生神经进行形态学和免疫组织化学检测,利用图像分析系统进行计量分析,观察BYHWD对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。结果 :与生理盐水对照组相比,BYHWD组展趾功能、复合肌动作电位和神经干动作电位波幅及恢复率、板层数显著高于生理盐水组。结论 :BYHWD可促进大鼠坐骨神经夹伤后神经功能的恢复,且存在剂量-效应关系。

健侧颈7神经转位重建对侧肢体功能患者的手术配合与护理

目的:探讨健侧颈7神经转位重建对侧肢体功能患者的手术配合与护理方法。方法:对7例健侧颈7神经转位重建对侧肢体功能患者分析主要的护理问题,实施有效的护理措施。结果:7例患者手术顺利,术中未出现相关并发症,经1.5~2.0年随访,所有病例上肢功能都有不同程度的改善。结论:巡回护士根据病情和手术需要正确选择补液部位,根据手术进展及时调整手术体位,同时对患者进行全面评估,有效防止相关并发症的发生是确保手术成功和患者安全度过手术期的关键。

一种新型肌腱周边缝合方法的生物力学研究

目的:通过比较连续周边缝合(Running)、Cross-stitch、Halsted及一种新型肌腱周边缝合方法的生物力学特性,为该方法的临床应用提供理论依据.方法:将36根新鲜成年猪后蹄Ⅱ区屈肌腱随机分成4组,分别用连续周边缝合(Running)、Cross-stitch、Halsted及一种新型肌腱周边缝合方法进行修复.将缝合好的肌腱等速拉伸至完全断裂,并用材料力学测定仪(Instron4411)测定2-mm间隙形成负荷、最大负荷,计算断裂功耗.结果:新型肌腱周边缝合法的2-mm间隙形成负荷为(53.2±6.O)N、最大负荷为(68.8±6.9)N、刚度为(6.6±O.7)N/mm,为各组中最高;断裂功耗为(O.784±O.075)J与Halsted法相近,高于Cross-stitch及Running法.结论:该新型肌腱周边缝合法的生物力学强度高于目前临床应用的Running、Cross-stitch、Hal-sted法,能提供较大的抗张强度、有效抵御间隙形成、操作简便,有利于肌腱早期主被动功能锻炼.

壳聚糖温敏水凝胶复合rhBMP-14促兔急性肩袖损伤愈合的实验研究

目的:研究重组人骨形态发生蛋白-14(recombinant human bone morphogenetic protein-14,rh BMP-14)在兔急性肩袖损伤后肌腱止点重建过程中的作用。方法:共取45只8月龄雄性新西兰大白兔,随机选取3只作为正常组,进行生物力学测试。其余42只随机分成3组,每组14只。采取双侧冈上肌腱完全离断模型作为肩袖急性损伤模型,并一期行肌腱止点重建术。实验组在腱-骨界面注射以壳聚糖温敏水凝胶(chitosan/glycerophosphate,CS/GP)为载体的rh BMP-14;实验对照组仅填充CS/GP;空白对照组不给予任何处理。分别于处理后第4周和第8周随机处死实验用兔7只,切取肩袖标本。随机选取各组4例肩袖标本进行HE染色观察腱-骨愈合情况,取各组4例标本进行苦味酸天狼星红染色进行Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原面积测定并进行比较。另取各组6例标本进行生物力学测试。结果:(1)组织学观察:HE染色显示术后4周实验组有大量软骨细胞增生,并伴有胶原纤维和软骨组织形成,胶原方向较为恒定;在实验对照组及空白对照组仅有少量胶原纤维及软骨形成,方向性差。实验组腱-骨界面组织于术后8周连接紧密,胶原纤维方向一致,并伴有矿化胶原纤维形成,腱-骨界面出现明显的Sharpey’s纤维连接,有类似直接止点形成;实验对照组和空白对照组有部分似直接止点的矿化胶原纤维形成,大部分由结缔组织充填。苦味酸天狼星红染色显示随着时间的增加,实验对照组及空白对照组Ⅰ型胶原面积和Ⅲ型胶原面积之比均有所提高,而实验组的面积比例在选取的相同时间段较对照组明显提高(P<0.01)。(2)生物力学测试显示:术后3组最大载荷及刚度都随时间的延长而增强。实验组在第4周、第8周的最大载荷与刚度都较实验对照组与空白对照组明显增高(P<0.01)。结论:rh BMP-14可促进肌腱止点的成熟,并可诱导直接止点形成,明显提高腱-骨界面的最大载荷及刚度,在修复肩袖损伤的过程中具有重大意义。

巨噬细胞对体外培养的雪旺细胞及背根神经节感觉神经元作用的实验研究

目的通过巨噬细胞、雪旺细胞及感觉神经元的联合培养,了解雪旺细胞的活性及感觉神经元的存活。方法(1)取乳鼠坐骨神经进行雪旺细胞的分散培养,24h后在腹腔中取巨噬细胞并用分隔培养皿进行联合培养。(2)联合培养后24h、48h、72h,采用RT-PCR法,半定量分析雪旺细胞NGFmRNA含量的变化。(3)将巨噬细胞和雪旺细胞的联合培养基加入至乳鼠背根神经节感觉神经感觉神经元体外培养中,培养48h后观察神经元的生长情况,用MTT法测定神经元的活性。结果单纯雪旺细胞培养中存在NGFmRNA但表达量较低,加入巨噬细胞后NGFmRNA表达量显著升高。联合培养条件培养基可明显促进体外培养的体外培养中感觉神经感觉神经元的存活。结论巨噬细胞可改变雪旺细胞的活性,联合培养条件培养基对感觉神经感觉神经元有明显的营养作用。

三角纤维软骨复合体的解剖学研究

目的观察三角纤维软骨复合体(TFCC)的解剖形态学特征及其与尺腕关节的关系。方法采用12具成人截肢手术新鲜上肢标本,观察三角纤维软骨复合体的组成及各成份的形态、走行及附着点,并研究三角纤维软骨复合体与桡尺远侧关节及尺腕关节的关系。结果三角纤维软骨复合体成份包括三角纤维软骨盘(TFC)、半月板近似物、远侧桡尺背侧韧带、远侧桡尺掌侧韧带、尺侧腕伸肌下键鞘、腕尺侧副韧带、尺三角韧带、桡尺三角韧带和尺月韧带。其中,尺月韧带、尺三角韧带与近排腕骨间的月三角骨间韧带的止点互相融合,三者之间形成一个稳定的类似三角形关系结构。结论三角纤维软骨复合体是腕部解剖学和生物学意义上的多种坚韧组织复合体,作为整体来维持桡尺远侧关节及尺腕关节的稳定性;尺月韧带、尺三角韧带和月三角骨间韧带共同在维持尺腕关节的稳定性中发挥重要作用。

神经再生条件液中 6.16～10.23KDa 蛋白粗制品对雪旺细胞的动力学影响

目的：了解神经再生条件液中６．１６～１０．２３ＫＤａ蛋白粗制品对雪旺细胞（Ｓｃｈｗａｎｎｃｅｌ，Ｓｃ）增殖的作用。方法：雪旺细胞的培养采用差速贴壁法，分成５组，每组３个标本。第１组：外周神经再生条件液中６．１６～１０．２３ＫＤａ蛋白粗制品（ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｆｌｕｉｄｓ，ＮＲＣＦｐ）；第２组：成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）的粗提物；第３组：纤连蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ，ＦＮ）；第４组：神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）；第５组：对照组。各组进行细胞计数和动力学分析。结果：ＮＲ－ＣＦｐ组、ＦＧＦ粗提物及ＦＮ组的细胞增长加快并且Ｓ期、Ｇ２＋Ｍ期（ＤＮＡ合成前期、ＤＮＡ合成后期及分裂期）所占比例增加。结论：本实验显示ＮＲＣＦｐ、ＦＧＦ粗提物及ＦＮ能够促进Ｓｃ的增殖。

乳鼠坐骨神经条件培养基促进周围神经再生的实验研究

目的:通过对乳鼠坐骨神经条件培养基的研究,了解其对周围神经再生的作用。方法:用静脉桥接10mm缺损的鼠坐骨神经,静脉腔内注入用Askanas植块法得来的乳鼠坐骨神经条件培养基(实验组),对照组则注入单纯的培养液。术后8周、12周进行电生理、光镜及图象分析的研究。结果:实验组再生神经的传导速度、有髓神经纤维数及再生有髓纤维直径均优于对照组。结论:乳鼠的坐骨神经培养基可引导并促进坐骨神经在静脉管内的再生,为周围神经缺损后的再生提供良好的微环境。

周围神经双卡综合征动物模型的实验研究

目的 建立神经根部及周围双重压迫的动物模型 ,进行步态、电生理及组织学研究。方法 按Mackinnon等方法建立神经根部及周围双卡综合征 (doublecrushsyndrome ,DCS)的模型。DCSM组 :Wistar大鼠 10只 ,切除腰5腰椎棘突、椎弓 ,并将碎骨片移植于此处。术后 4个月 ,用与坐骨神经直径相匹配的 5～ 10mm长硅胶管覆盖于右侧坐骨神经。对照组 :Wistar大鼠 4只 ,用硅胶管覆盖右侧的坐骨神经。术后即刻、1、2、3、4、5个月共 6个时间点检测坐骨神经功能指数 (sciaticfunctionalindex ,SFI) ;术前、术后 5个月测定节段性体感诱发电位的波幅 (spinalsomotosensoryevokedpotential,SSEPs) ;术后 5个月进行组织学分析。结果 DCS组 ,SFI逐渐下降 ,术后 5个月时为 [( -2 4.1± 4.8) , x±s ,下同 ]明显低于对照组( -4 .7± 4.9,P <0 .0 5 )。术后 5个月 ,DCS组硅胶管近端及远端的SSEPs波幅为 ( 112 .4± 2 1.3 ) μV和( 83 .5± 16.3 ) μV ,比对照组明显下降 ( 179.1± 2 3 .2 ) μV及 ( 170 .9± 10 .2 ) μV ,P >0 .0 5。组织学分析显示两组神经外膜均出现肥厚及纤维化 ,且神经轴索间均出现肿胀 ;DCS组更加明显 ,并出现粗纤维减少而细纤维增多。结论 神经根部及周围神经双重卡压后 ,其步态学。

神经再生液中相对分子质量为6.16 000～10.23 000的蛋白粗制品、NGF和CNTF对背根神经节细胞生长的影响

目的研究神经再生条件液中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品（ｐｒｏ－ｔｅｉｎｉｎｎｅｒｖｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｆｌｕｉｄｓ，ＮＲＣＦｐ）、睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）和神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）对背根神经节感觉神经元细胞有无促进其存活和生长的作用。方法采用背根神经节体外植块培养，分散培养及ＭＴＴ微量比色法，比较在培养器，培养板孔中加入神经再生条件中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品、ＣＮＴＦ及ＮＧＦ三个实验组，对体外培养的背根神经节神经元细胞生长的影响。结果三实验组中背根神经节神经元细胞的轴突生长均旺盛，它们的四唑盐终产物与对照组（加ＤＮＥＮ培养液）相比，其差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１），但各实验组之间无明显差异。结论神经再生条件液中相对分子质量为６．１６０００～１０．２３０００的蛋白粗制品、ＣＮＴＦ及ＮＧＦ对背根神经节神经元细胞体有促进其存活和生长的作用。

神经生长液含药血清对神经元生长和雪旺细胞增殖的影响

目的观察神经生长液含药血清对体外培养的背根神经节神经元生长和雪旺细胞增殖的影响，探讨其促损伤神经修复的机制。方法制备神经生长含药血清；采用新生大鼠背根神经节及雪旺细胞体外培养，通过形态学分析，观察神经生长液含药血清对背根神经节神经元突起生长的影响；采用MTT、BmIU标记和细胞计数法，观察神经生长液含药血清对雪旺细胞活力及其增殖的影响。结果高剂量的神经生长液含药血清，可有效地促进大鼠背根神经节神经元生长；高、低剂量的神经生长液含药血清均能显著增加大鼠雪旺细胞的活力，促进雪旺细胞增殖。结论神经生长液含药血清具有促进神经元生长、增强雪旺细胞活力、促进雪旺细胞增殖作用。

乳鼠雪旺氏细胞的培养及形态学研究

神经损伤后雪旺氏细胞被认为是修复的基础。它的增殖能形成索带，引导轴突生长。同时，它能分泌多种因子促进及调控轴突的生长。为研究雪旺氏细胞，采用植块反复种植法来获得大量雪旺氏细胞，通过相差显微镜、扫描电镜及透射电镜进行形态学研究。

腓肠内侧动脉穿支皮瓣修复上下肢创面

目的介绍吻合血管的腓肠内侧动脉穿支皮瓣修复上下肢创面的临床方法和经验。方法采用吻合血管的腓肠内侧动脉穿支皮瓣修复上下肢创面11例,女6例,男5例。皮瓣设计区域为同侧小腿,腓肠内侧肌肌腹以远1/2的表面部分,前内界为胫骨的内后缘,后外侧界为小腿后正中纵轴线,皮瓣的轴行线为前内界和后外侧界的中线。皮瓣长8～15 cm,宽6～14 cm。结果10例皮瓣成活,皮瓣质地柔软,富有弹性,不臃肿,恢复了一定的触觉;1例皮瓣全部坏死,经扩创、断层皮片修复创面;不影响供区的运动功能。结论腓肠内侧动脉穿支皮瓣可以用来修复上下肢创面,尤其对手足部创面的修复有较为满意的临床疗效。

一种新型肌腱周边缝合方法的生物力学研究

目的通过比较连续周边缝合(Running)、Cross-stitch、Halsted及一种新型肌腱周边缝合方法的生物力学特性,为该方法的临床应用提供理论依据。方法将36根新鲜成年猪后蹄Ⅱ区屈肌腱随机分成4组,分别用连续周边缝合(Running)、Cross-stitch、Halsted及一种新型肌腱周边缝合方法进行修复。将缝合好的肌腱等速拉伸至完全断裂,并用材料力学测定仪(Instron4411)测定2-mm间隙形成负荷、最大负荷,计算断裂功耗。结果新型肌腱周边缝合法的2-mm间隙形成负荷为(53.2±6.0)N、最大负荷为(68.8±6.9)N、刚度为(6.6±0.7)N/mm,为各组中最高;断裂功耗为(0.784±0.075)J与Halsted法相近,高于Cross-stitch及Running法。结论该新型肌腱周边缝合法的生物力学强度高于目前临床应用的Running、Cross-stitch、Hal-sted法,能提供较大的抗张强度、有效抵御间隙形成、操作简便,有利于肌腱早期主被动功能锻炼。

两种手术入路治疗复杂小儿肱骨髁上骨折疗效的比较

目的比较两种手术入路对复杂的小儿肱骨髁上骨折疗效的影响。方法随访2010年7月至2011年12月采用肘后人路切开复位克氏针内固定治疗的34例复杂的肱骨髁上骨折患儿。随访时间16～32个月，平均（21．7±4．4）个月。按照肱三头肌不同的处理方法，将病例分为肱三头肌正中切开入路组（A组），肱三头肌旁人路组（B组）。A组19例，B组15例。随访内容：两侧肘关节活动度（屈曲、背伸），前臂旋前、旋后活动范围；提携角，两侧伸肘肌力；影像学资料（Bamnann角、肱骨干髁角）；Mayo肘关节功能评分。记录随访结果，并对最后一次随访结果进行统计学分析。结果两组病例中肘关节活动度及前臂旋前、旋后活动范围均在正常范围，两组间差异无统计学意义。计算患侧伸肘肌力与健侧的百分比，两组问差异无统计学意义。Mayo肘关节功能评分均为100分，两组间差异无统计学意义。测量Baumann角、肱骨干髁角，两组的均值均在正常范围内，两组间的差异无统计学意义。结论肱三头肌旁及肱三头肌正中切开两种入路在小儿肱骨髁上骨折治疗中具有相同的疗效。

掌指关节运动时侧副韧带长度变化的研究

目的研究在体示、中、环、小指掌指关节屈伸运动时尺桡侧侧副韧带的长度变化。方法以螺旋CT扫描6例志愿者的示、中、环、小指的掌指关节，分别获得各掌指关节在0°至屈曲90°内每隔30°的运动范围内掌骨中段以远至近节指骨中段的图像，三维重建骨结构图像后经软件处理得到在各掌指关节屈伸运动时尺桡侧侧副韧带的长度变化。结果掌指关节屈曲时，尺桡侧侧副韧带的背侧束逐渐伸长，而掌侧束相对缩短，中间束长度无明显的变化规律。结论掌指关节屈伸活动时侧副韧带都处于紧张状态，只是韧带内部相对紧张、松弛的部位及程度不同。它屈曲时主要存在2种相对的运动：侧副韧带的背侧束伸长，紧张性增大；掌侧束缩短，紧张性相对减小；而中间束始终保持了合适的紧张度，共同限制和调节关节的运动。

右美托咪啶联合舒芬太尼用于断指再植术后静脉镇痛的临床研究

目的右美托咪啶联合舒芬太尼用于断指再植术后静脉镇痛，观察对术后疼痛、镇静效果及血管痉挛的影响。方法60例急诊行单指断指再植患者，随机分为2组（n=30），即对照组（A组）和右美托咪啶组（B组），观察术后镇痛、镇静效果，不良反应，以及断指再植后的血管痉挛发生率。结果术后两组患者的镇静评分、不良反应和血管痉挛发生率差异无统计学意义（P〉0．05）；B组镇痛评分小于A组（P〈0．05）。结论断指再植术后应用右美托咪啶复合舒芬太尼静脉自控镇痛，右美托咪啶可以增强舒芬太尼的镇痛效果，无明显不良反应，但对血管痉挛的影响不明显。