苦参碱联合DMSO大规模冻存人胎肝细胞的实验研究

目的观察苦参碱对大规模低温冻存人胎肝细胞功能的影响。方法改良肝细胞获取方法分离人胎肝细胞,经过1h预培养后。将5种不同浓度(1×107,2.5×107,5×107,7.5×107,10×107.mL-1)的胎肝细胞以6mg/L苦参碱+5%DMSO为冻存保护液置于骨髓干细胞冻存袋在液氮中冷冻保存1个月。1个月后复苏,进行活率、形态学及功能检测。结果5种不同浓度的细胞冻存1个月后,细胞浓度为2.5×107·mL-1组复苏后存活率与其余四组相比差异有显著性(P<0.05),且明显高于其余四组。复苏后细胞存活率和24h贴壁率分别为73%,69%,经过短期培养后,细胞功能逐渐恢复。结论(1)苦参碱对低温冻存的人胎肝细胞有保护作用,与二甲基亚砜联用可降低DMSO的浓度;(2)以5%DMSO+6mg/L苦参碱作为冻存保护剂,细胞浓度在2.5×107·mL-1冻存效果最佳。该大规模冻存方法基本上可以满足生物人工肝肝细胞应用的需求。

手术治疗混合痔PPH术后吻合口狭窄疗效分析

在混合痔的手术治疗中，痔上黏膜环切钉合术（PPH）创伤小、术后恢复快、患者痛苦小，但术后吻合口狭窄是比较少见的严重并发症之一，可导致患者排便困难，严重影响患者的生活质量¨J。2007年1月一2012年12月，我们对PPH术后吻合口狭窄患者行手术切开狭窄的瘢痕环或增生瘢痕组织，以改善患者症状及生活质量。现报告如下。

持针式单孔法治疗小儿疝的解剖学基础与手术技巧

目的 总结持针式单孔法治疗小儿腹股沟疝的应用解剖及手术技巧。方法 回顾性分析我院2009年3月至2013年4月,采用持针式单孔法腹腔镜治疗小儿腹股沟疝1735例。右侧892例、左侧595例、双侧248例。均为男孩,年龄23.5-36.8月,平均26.7月。结果 1735例患儿均在腹腔镜下顺利完成疝囊高位结扎术。除早期出现1例髂血管血肿外,其余无与解剖因素有关的损伤或并发症。结论正确认识手术区域的解剖是手术成功与否的基础及关键,而熟练的手术操作是减少手术并发症,降低手术复发率及提高手术安全性的有力保障。

输注自体骨髓间充质干细胞延长犬活体肝移植存活的实验研究

目的探讨输注自体骨髓间充质干细胞延长犬活体肝移植存活的机制。方法14只受体犬建立活体肝移植模型后,随机分为对照组和处理组,对照组仅做活体肝移植,处理组在活体肝移植的基础上,术中输注自体骨髓间充质干细胞,术后观察两组犬的生存时间、肝功能(AST、ALT)、组织病理变化及移植细胞的分化状况。结果①处理组比对照组的中位生存时间明显延长(P<0.01)。②肝功能变化:术后两组AST、ALT总体相比较,处理组AST、ALT水平降低,有显著性差异(P<0.01)。③组织病理变化:术后两组均出现不同程度的免疫排斥反应,且排斥程度相似。④移植细胞分化情况:输注的骨髓间充质干细胞向有功能的肝样细胞分化。结论输注自体骨髓间充质干细胞可以延长活体肝移植受体犬的存活时间;经门静脉输注的自体骨髓间充质干细胞可向肝样细胞分化。

明胶、丝素—壳聚糖微载体培养肝细胞的比较研究

目的自制丝素—壳聚糖多孔微载体,在模拟微重力条件下接种培养肝细胞,并与多孔微载体CultispherS上的细胞生长状况进行比较。方法油包水乳化后以冻干法制作丝素—壳聚糖多孔微载体。培养体积50 ml,以旋转培养系统分别对接种至丝素—壳聚糖多孔微载体和Cultispher S的CL-1细胞进行培养,并动态观察形态学、细胞计数,检测人源性白蛋白分泌和尿素合成功能。结果CL-1细胞在Cultispher S上呈单层生长,在丝素—壳聚糖多孔微载体上呈现多层生长。第9天细胞计数结果达到峰值,丝素—壳聚糖多孔微载体的细胞密度可达到5.7×106个/ml,明显高于Cultispher S组(P<0.01)。自培养第10天起,丝素—壳聚糖多孔微载体组上清中的人源性白蛋白和尿素水平均明显高于Cultispher S组(P<0.01)。结论相对Cultispher S,丝素—壳聚糖多孔微载体更适合在微重力条件下培养CL-1细胞。

经脐单一部位与常规腹腔镜阑尾切除术创伤反应的对比研究

目的：比较经脐单一部位腹腔镜阑尾切除术（ laparoendoscopic single-site appendectomy ，LESS-LA）与常规三孔法腹腔镜阑尾切除术（ laparoscopic appendectomy ，LA）对机体的创伤反应。方法2011年4月～2013年3月选择205例成人急性阑尾炎，按掷硬币法分为2组，分别为LESS-LA组和常规LA组，比较2组手术时间，术前1 h，术后24、72 h血清白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、C 反应蛋白（C reaction protein，CRP）。结果LESS-LA组手术时间（50．3±10．8）min，明显长于常规LA组（26．1±8．8）min（t＝17．625，P＝0．000）。 LESS-LA组患者术前1 h，术后24、72 h血清IL-6分别为（8.41±1．51）、（35．65±3．36）、（25．29±3．25） pg／ml，常规LA组分别为（8．76±1．39）、（35．21±3．19）、（25．56±3．19） pg／ml，2组比较均无统计学差异（ t＝-1．728，P＝0．086；t＝0．962，P＝0．337；t＝-0．600， P＝0．549）；LESS-LA组患者术前1 h，术后24、72 h血清TNF-α分别为（14．47±2．05）、（27．43±2．61）、（20．01±3．13） pg／ml，常规LA组分别为（14．65±2．09）、（27.36±2．63）、（20．57±3．18） pg／ml，2组差异均无显著性（t＝-0．622，P＝0.535；t＝0.191，P＝0．849；t＝-1．270，P＝0.206）；LESS-LA组患者术前1 h，术后24、72 h血清CRP分别为（18．47±2．71）、（45．59±3．07）、（32．46±3．22） mg／L，常规LA组分别为（18．34±2．52）、（45．03±3．16）、（32．61±3．13） mg／L，2组差异均无显著性（t＝0.356，P＝0．722；t＝1．286，P＝0.200；t＝-0．338，P＝0．736）。结论与常规三孔法LA比较，LESS-LA切口美观，瘢痕几乎不可见，但手术时间显著延长，且手术创伤并未减少。

胸腔闭式引流术对肺部手术后病人的疼痛及肺功能的影响

【目的】评估肺部手术后患者胸腔闭式引流对伤口疼痛程度和一秒用力呼气容积（FEVI）的影响。【方法】对】17例肺脏切除术后患者（包括63例肺楔形切除或段切除，54例行肺叶切除；52例行单侧传统开胸手术，65例行电视胸腔镜辅助下微创手术）进行前瞻性对比研究。所有患者术后均留置一根24#胸腔闭式引流管。分别记录并比较患者在拔管前1h与拔管后1h；传统方法与微创方法；3d内拔管与3d后拔管时患者静态疼痛、动态疼痛（进行5次深呼吸活动后）评分和FEV1值。使用数字评分法（NPSnumeric pain scale）评估疼痛程度，使用便携式肺功能检测仪测量FEV1。【结果】拔管前患者的平均静态疼痛、动态疼痛评分为（2．6±1．9）和（4．2±2．O），拔管后平均静态疼痛、动态疼痛评分为（1．6±1．5）和（2．4±1．8），分别下降39％和42％（P〈0．01）。拔管前的平均FEV1为（1．4±0．7）L，为预测值的55％，而拔管后为（1．6±0．8）L，提高了16％（P=0．0003）。56％患者认为拔管后静态疼痛评分改善，75％的患者认为动态疼痛评分改善，68％可以测得FEV1改善。无论是VATS手术还是传统开胸手术后患者所获得的结果均相仿。对比术后拔管迟的患者（〉术后3d），术后3d内能拔管的病人在拔管后的静态疼痛评分降低更明显（45％VS31％，P=0．04），FEV1改善更佳（20％VS13％，P=0．01）。【结论】无论是传统开胸手术还是VATs微创手术，术后胸腔闭式引流管的适时拔除都能够减轻病人疼痛和改善肺通气功能，尤其是在术后早期能拔管的病人中更为明显，因此胸科术后病人在条件允许情况下早期拔管更有利于病人的康复。

小儿肠套叠腹腔镜复位与传统开腹复位的临床疗效比较

目的比较小儿肠套叠需手术复位时腹腔镜手术与传统开腹手术的临床疗效。方法回顾性分析我院2007年1月至2010年1月小儿肠套叠经空气灌肠失败需手术复位病例40例,其中选择腹腔镜组与传统开腹组各20例,在手术时间、术中出血量、手术并发症、胃肠功能恢复时间、住院时间、住院费用及复发率等方面进行比较。结果腹腔镜手术与开腹手术均无死亡病例,腹腔镜组在住院时间、胃肠功能恢复时间较开腹组明显减少(P<0.05),而住院费用方面则明显增加(P<0.05),有统计学意义。手术时间、术中出血量、复发率、并发症等方面无差异(P>0.05)。结论肠套叠腹腔镜复位与传统开腹复位一样安全、有效,腹腔镜组较传统开腹组具有创伤少、恢复快等优点,但住院费用相对较高。

小儿嵌顿疝手法复位后行腹腔镜疝囊高位结扎术的手术时机选择

目的探讨小儿嵌顿疝手法复位后行腹腔镜疝囊高位结扎术的手术时机选择。方法回顾分析本院2009年10月～2010年10月嵌顿疝经手法复位后行手术治疗病例共60例,按手术时间分成3组,Ⅰ组:1～2d,Ⅱ组:3～5d,Ⅲ组:≥6d。手术方式为双孔法。从内环处腹膜水肿情况、手术并发症、手术时间及复发率等方面作比较。结果 3组均无并发症发生,术后随访时间最长3年,最短1.3年,平均2.6年,未见复发病例。各组在内环水肿情况、手术时间等方面比较差异具有统计学意义(P<0.05),手术时间第Ⅰ组较其他两组长。内环水肿情况以第Ⅰ组最明显,第Ⅱ组及第Ⅲ组水肿不明显或基本消退。结论嵌顿疝复位后1～2d内环水肿明显,输精管及精索血管显露不清,手术难度增大,增加了手术时间,最好待水肿期过后再行手术治疗。

自体骨髓间充质干细胞对异基因猪移植肝的保护作用

目的研究自体骨髓间充质干细胞术中经门静脉输注对异基因小型猪移植肝脏的保护作用。方法建立异基因猪肝移植急性排斥反应模型,实验分对照组和处理组,对照组只做原位肝移植,处理组在原位肝移植的基础上,术中经门静脉注射一定数量预先制备的受体自身骨髓间充质干细胞,术后1,3,6d静脉采血检测肝功能,并做肝组织的病理活检,并观察受体的生存时间。结果①处理组中受体的生存时间明显比对照组的延长(P<0.001);②肝功能变化:术前两组血清AST及ALT比较差异无显著性(P>0.05),术后处理组受体血清中AST及ALT总体变化明显低于对照组,两组比较差异有显著性(P<0.01);③组织病理变化:处理组在术后7d病理活检见:大致呈正常肝脏病理,肝组织轻度瘀血,血管周围少量炎性细胞浸润,少数汇管区小静脉或肝静脉内皮细胞下淋巴细胞浸润,肝细胞点状坏死,中性粒细胞浸润。而对照组在术后3d移植的肝脏中出现汇管区大量炎症细胞聚集,肝细胞浑浊,气球样变性并出现不同程度的点状、灶状坏死。结论自体骨髓间充质干细胞经门静脉输注能够保护移植的肝脏,延长受体的存活时间。

异基因小型猪原位肝移植急性排斥反应模型的建立

背景:在大动物肝移植的研究领域,在肝脏解剖结构及生理代谢方面,猪是更接近于人类的哺乳动物。目的:建立异基因中国小型猪原位肝移植急性排斥反应模型,并在此基础上开展免疫学实验,验证建立成熟稳定的异基因原位肝移植急性排斥反应模型的可行性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-02在南方医科大学南方医院实验动物中心完成。材料:选用健康西藏小型猪30只,健康版纳小型猪10只。方法:分别进行西藏猪→西藏猪原位肝移植、版纳猪→西藏猪原位肝移植10对次,非转流条件下行原位肝移植。主要观察指标:移植后观察两组受体的存活时间,移植后1,3,7d检测受体血清中天冬氨酸转氨酶活性及总胆红素含量,并观察肝组织的病理变化。结果:①同基因肝移植组受体生存时间明显长于异基因肝移植组(P<0.01)。②异基因肝移植组受体移植后血清天冬氨酸转氨酶活性及总胆红素含量显著高于同基因肝移植组(P<0.01);移植前两组差异无显著性意义(P>0.05)。③异基因肝移植组受体于移植后7d出现严重的排斥反应;肝组织内见大量的片状坏死,汇管区有大量的炎症细胞浸润。结论:建立了稳定的异基因小型猪原位肝移植急性排斥反应模型。

甲亢围手术期甲状腺危象的预防体会

目的:探讨甲状腺功能亢进症围手术期甲状腺危象并发症的预防。方法:回顾性分析本院2002-2009年收治的434例经手术治疗的甲亢患者的临床资料。结果:全部患者均未出现甲亢危象,顺利出院。结论:充分术前准备及术中术后处理能有效预防甲状腺危象发生。

间苯三酚对提高小儿肠套叠空气灌肠复位效果的研究

目的探讨间苯三酚对小儿肠套叠空气灌肠复位的影响效果。方法将我院接诊的小儿肠套叠空气灌肠患儿120例作为研究对象,患者分为4组,每组各30例。观察组采取肠套叠空气灌肠+间苯三酚+安定处理(P+V+AE),对照组1采取安定+肠套叠空气灌肠处理(V+AE),对照组2采取山莨菪碱+安定+肠套叠空气灌肠处理(A+V+AE),对照组3单纯实施肠套叠空气灌肠(AE),对比分析4组复位成功率、复发率、不良反应发生率及医疗费用。结果处理组在复位成功率、复发率、不良反应发生率及医疗费用上均显著优于其余三组(P<0.05);P+V+AE与V+AE组效果均明显优于AE组(P<0.05),但V+AE与A+V+AE对比无显著性差异(P>0.05)。结论间苯三酚应用在小儿肠套叠空气灌肠中可提高复位成功率,降低不良反应,同时减少医疗费用。

85例青年乳腺癌临床病理特点及预后的回顾性分析

目的回顾性研究85例青年乳腺癌的临床病理特点,探讨青年乳腺癌的临床病理特点,并分析其对临床预后的影响。方法本研究将收治的青年乳腺癌(≦35岁)85例作为青年组,将同时期收治的中老年乳腺癌(﹥35岁)98例作为中老年组,收集其临床病理类型,包括雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)、Her-2表达、P53表达方面、腋窝淋巴结转移情况和术后5年无病生存率等方面开展比较,进行统计学分析。结果青年组乳腺癌和中老年组乳腺癌在病理类型上、组织学分级及临床分期上均无显著差异(P>0.05);在ER、PR及Her-2的表达方面具有显著差异(P<0.05);而在P53的表达方面无显著差异(P>0.05);在腋窝淋巴结转移率方面具有显著差异(P<0.05);两组在术后5年无病生存率上的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论青年乳腺癌的病理类型提示其较中老年乳腺癌有更强的侵袭性,淋巴结转移较早,5年无病生存率较低,所以在临床上改善其预后最好的办法是早期发现并早期接受规范化治疗。

改良胸腔闭式引流在肺大泡自发性气胸治疗中的应用

目的:观察使用中心静脉导管作胸腔闭式引流在自发性气胸治疗中临床应用的可行性。方法:50例自发性气胸患者应用中心静脉导管行胸腔闭式引流术,观察术后肺舒张时间,治疗有效率,患者疼痛不适异常感觉以及拔管后的美观效果等。结果:肺复张时间1～2天,治愈率96%,全部患者均无置管处疼痛不适等,拔管后患者胸壁处无瘢痕残留。结论:应用中心静脉导管作闭式引流术治疗自发性气胸具有操作方法简便、实用、安全、并发症少、穿刺点不留瘢痕美观等优点。

复发性小儿疝嵌顿一例报道并治疗策略探讨

目的:探讨复发性小儿疝嵌顿的治疗策略。方法:回顾分析1例复发性腹股沟疝嵌顿出现假性复位患儿的临床资料,探讨复发性小儿疝嵌顿的治疗策略。患儿男,2.5岁,2014年曾行腹腔镜下右侧疝囊高位结扎术,术后半年疝复发,于术后6个月、8个月、9个月先后3次出现疝嵌顿,均手法复位成功。患儿术后11个月出现第4次疝嵌顿,手法复位后症状反复,予以手术治疗。结果:手术在腹腔镜下完成,术中诊断为嵌顿疝假性复位,遂行疝复位及疝囊高位结扎术。手术时间19 min,术中出血2 ml,术后24 h出院,无阴囊肿胀、切口感染等并发症发生,随诊1.4年未见疝复发及睾丸萎缩等情况。结论:对于复发性腹股沟疝嵌顿处理应充分认识复发病例局部解剖变化特点,复位时避免疝假性复位而出现严重并发症。同时根据病情、自身对疾病的处理经验综合分析,以选择恰当的手术时机及手术方式。

电视胸腔镜手术治疗25例肺磨玻璃病变临床分析

目的：探讨电视辅助胸腔镜手术（VATS）治疗肺部磨玻璃样变（GGO）的临床应用价值。方法：回顾分析我院2012年1月-2014年9月经VATS治疗的25例GGO病例的临床资料,术前行CT引导下穿刺定位,术中行胸腔镜病灶切除术,并将病灶送快速冰冻病理检查,根据病理报告选择相应手术方式。记录手术一般情况和术后的并发症情况。结果：病理检查中：良性增生患者13例,恶性增生患者12例。所有患者手术顺利,手术时间30~120min,术中出血量50~300ml,术后未发现严重并发症及死亡病例。结论：VATS对GGO病灶切除具有创伤小,效果好,术后恢复快、不留手术疤痕等优点,适合临床长期推广应用。

低位直肠癌行保肛术后吻合口狭窄手术治疗10例临床资料分析

目的探讨低位直肠癌保肛术后吻合口狭窄行手术治疗可行性。方法对10例低位直肠癌行保肛术后吻合口狭窄的患者的临床资料回顾性分析,对行手术治疗的效果进行总结。结果10例患者均经一次性手术切除吻合口狭窄疤痕环,狭窄症状明显改善,随访3年所有患者均排便通畅,未见再次狭窄发生。结论低位直肠癌保肛术后吻合口狭窄行手术切除疤痕环治疗安全、有效,术后狭窄不易复发。

改良单孔法腹腔镜手术治疗儿童腹股沟疝的应用体会

目的探讨改良单孔法腹腔镜手术治疗小儿斜疝的安全性及有效性。方法 2006年2月~2010年10月,对77例小儿腹股沟斜疝采用改良单孔法腹腔镜手术,经脐部置入3 mm或5 mm腹腔镜监视腹腔,在体外使用普通开放手术针持夹持大圆针,在缺损内环口体表刺入并带入4号丝线,在腹膜外环形高位缝扎内环口。结果 77例均手术成功。术中发现并同时处理对侧隐匿性斜疝22例（31.4%）。平均手术时间48例单侧疝13 min（7~19 min）,29例双侧疝21 min（14~31 min）。术后住院时间平均48 h（26~52 h）,未发现有脐戳孔疝、戳口处血肿、腹膜外气肿、阴囊血肿等并发症。35例获得随访6~36月,平均22.6月,无并发症及复发病例。结论改良单孔法腹腔镜手术治疗小儿斜疝安全、可靠,创伤少,效果好,容易学习掌握。