胃癌细胞角蛋白mRNA和Ⅰ型胶原mRNA的原位杂交及杂交电镜观察

采用两种ｃＤＮＡ探针，建立了胃癌组织角蛋白ｍＲＮＡ和Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ的原位分子杂交和杂交电镜技术。结果显示：胃癌细胞具有旺盛合成角蛋白的能力，而胃癌间质中间质细胞对Ⅰ型胶原基因的转录合成与正常胃粘膜无异。并对原位杂交、杂交电镜的技术方法和两种ｍＲＮＡ表达的意义进行了探讨。Ｐ＜０．０１经秩和检验，差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）２．２电镜观察４０例胃粘膜和５８例胃癌分别有８例和２１例在电镜下观察到龟蛋白ｍＲＮＡ阳性杂交信号。粘膜上皮细胞内杂交颗粒细小，散布于胞浆基质中，以细胞核周围为多。胃癌细胞内角蛋白ｍＲＮＡ阳性颗粒增多，常聚集成粗大的颗粒，分布不均（图３）。经过ＲＮａｓｅ预处理的胃癌切片，癌细胞内阳性颗粒明显减少（图４），或完全消失；胃粘膜和胃癌间质细胞的胞浆中有多少不等的Ⅰ型胶原ｍＲＮＡ的阳性颗粒，分布于整个胞浆基质中，阳性率分别为２５％（１０／４０）和２４．１％（１４／５８）。３讨论以前定位肿瘤细胞骨架和细胞外基质多采用免疫组化方法，从基因产物水平观察这些成分的变化。由于细胞内外的蛋白产物有累积作用，而且容易易位，所以免疫组化方法难以真正反映细胞的蛋白质合成状态［１］。原位杂交定位检测细胞ｍＲＮＡ能真?