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DDAB/Tween 80阳离子脂质体的构建与评价
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作者 乔华 ajab khan 张慧超 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1918-1925,共8页
阳离子脂质体是基因转染中最受关注的一种非病毒类载体。本文以双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)与聚山梨酯-80(Tween 80)复配构建阳离子脂质体,并评价其使用安全性和DNA压缩性能。结果显示,DDAB与Tween 805∶5复配形成的脂质体,粒径和Zet... 阳离子脂质体是基因转染中最受关注的一种非病毒类载体。本文以双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)与聚山梨酯-80(Tween 80)复配构建阳离子脂质体,并评价其使用安全性和DNA压缩性能。结果显示,DDAB与Tween 805∶5复配形成的脂质体,粒径和Zeta电位适中,对溴酚蓝产生较强的包封作用;同时,可以有效地抑制DDAB的细胞毒性,在≤800μM时,红细胞溶血率<5%,表现出优良的使用安全性;当该脂质体与DNA质量比为4时,对DNA显示出较强地结合压缩作用,且形成的复合物带有较高的正电荷(约+40 mV),这为基因转染提供了良好的理论基础。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 DDAB/Tween 80复配体系 细胞毒性 红细胞溶血 DNA压缩性能
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LncRNA00067110通过靶向Cabyr调控B16-F10细胞增殖、凋亡和黑色素生成 被引量:1
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作者 杨婉赟 ajab khan +4 位作者 贾琼 胡世雄 焦丁兴 于雷涛 范瑞文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期799-808,共10页
长非编码RNA(lncRNA)是一类转录长度大于200个核苷酸的非编码RNA。现已证明,多个lncRNA是潜在的癌症治疗靶点。LncRNA00067110是从小鼠黑色素瘤B16-F10细胞和正常黑色素细胞转录物组图谱中发现的差异表达基因。为研究lncRNA00067110是... 长非编码RNA(lncRNA)是一类转录长度大于200个核苷酸的非编码RNA。现已证明,多个lncRNA是潜在的癌症治疗靶点。LncRNA00067110是从小鼠黑色素瘤B16-F10细胞和正常黑色素细胞转录物组图谱中发现的差异表达基因。为研究lncRNA00067110是否调控B16-F10细胞的增殖、凋亡和黑色素生成,本文通过LncTar预测和双荧光酶活性验证了钙结合酪氨酸磷酸化调节蛋白(Cabyr)和lncRNA00067110存在靶向关系。通过构建lncRNA00067110的过表达载体,转染B16-F10细胞,经过对B16-F10细胞的转录图谱分析,并对细胞增殖、凋亡和黑色素生成的表型以及相关基因表达变化进行了检测。结果显示,lncRNA00067110靶向Cabyr,在过表达lncRNA00067110的B16细胞中,17个基因呈差异表达。其中,Cabyr的表达被上调,细胞增殖相关基因MEK/ERK/MNK/CREB和黑色素生成相关基因TYR家族成员及CREB的mRNA和蛋白质水平显著被下调,凋亡相关基因AKT和Bcl-2的mRNA水平和蛋白质丰度被上调。进一步通过细胞增殖和凋亡的表型的变化验证了lncRNA00067110的功能。结果提示,lncRNA00067110通过靶向Cabyr,调控相关基因表达,从而抑制B16-F10细胞的增殖和黑色素生成,并诱导黑色素瘤细胞的凋亡,可能成为治疗和抑制黑色素瘤的新的靶点。 展开更多
关键词 lncRNA00067110 B16-F10 增殖 凋亡 黑色素生成 钙结合酪氨酸磷酸化调节蛋白(Cabyr)
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跨膜蛋白106B通过ERK/CREB信号通路调控黑色素生成
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作者 周兆琦 ajab khan +2 位作者 贾琼 胡世雄 范瑞文 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1386-1393,共8页
TMEM106B是一种二型跨膜蛋白质,定位于神经元细胞树突中的核内体和溶酶体中,能够调控神经元细胞树突中溶酶体的逆向转运,对于神经元树突的分支和维持发挥重要作用。哺乳动物的黑色素细胞来源于神经嵴细胞,胞内黑素体来源于早期核内体,但... TMEM106B是一种二型跨膜蛋白质,定位于神经元细胞树突中的核内体和溶酶体中,能够调控神经元细胞树突中溶酶体的逆向转运,对于神经元树突的分支和维持发挥重要作用。哺乳动物的黑色素细胞来源于神经嵴细胞,胞内黑素体来源于早期核内体,但TMEM106B是否在黑色素细胞中发挥功能未有报道。现有研究表明,TFEB与溶酶体的合成和功能有关,在神经元细胞中,TMEM106B表达促进了TFEB的核转位,而在黑色素瘤细胞中,TFEB和MITF存在互相调控的作用。因此,本研究通过TMEM106B在黑色素细胞过表达的方法,研究TMEM106B调控黑色素的生成作用及其可能的作用机制。研究表明,TMEM106B定位于黑色素细胞的细胞质中,提示其可能在黑色素细胞中有重要作用。将构建的TMEM106B表达载体转染到黑色素细胞中,与对照组相比,CREB和MITF的mRNA水平有明显的增加(P<0.001),其中,CREB增加最明显;通过免疫印迹分析,p-ERK蛋白表达水平明显增加(P<0.001),导致黑色素生成相关蛋白MITF、TYR、TYRP1和TYRP2表达上调。黑色素含量分析显示,TMEM106B过表达可使真黑素(P<0.05)和总黑素(P<0.001)含量增加,然而褐黑素减少(P<0.001)。以上结果表明,在黑色素细胞中,TMEM106B通过调控CREB/ERK信号通路调控黑色素生成。 展开更多
关键词 跨膜蛋白106B 转录因子EB 神经嵴细胞 树突 黑色素颗粒
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木犀草素与人免疫球蛋白G的作用机制研究 被引量:2
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作者 李波 秦小茹 +3 位作者 ajabkhan 苗兰兰 孙体健 乔华 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2195-2202,共8页
采用紫外光谱、荧光光谱和圆二色谱以及分子对接技术,研究木犀草素(LUTE)与人免疫球蛋白G(hIgG)之间的相互作用。结果表明:LUTE对hIgG有较强的荧光猝灭作用,猝灭机理是形成复合物的静态猝灭,在形成LUTE/hIgG复合物时LUTE更靠近hIgG分子... 采用紫外光谱、荧光光谱和圆二色谱以及分子对接技术,研究木犀草素(LUTE)与人免疫球蛋白G(hIgG)之间的相互作用。结果表明:LUTE对hIgG有较强的荧光猝灭作用,猝灭机理是形成复合物的静态猝灭,在形成LUTE/hIgG复合物时LUTE更靠近hIgG分子中的色氨酸残基。紫外光谱、三维荧光光谱及圆二色光谱实验结果发现,LUTE与hIgG结合时对蛋白分子中氨基酸残基的微环境影响较大,而对hIgG分子的骨架影响较小。分子模拟与荧光猝灭实验结果说明,二者结合是多种作用力综合作用的结果。 展开更多
关键词 木犀草素 免疫球蛋白 光谱法 分子对接
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Identification and characterization of murine adipose tissue-derived somatic stem cells of Shenque(CV8)acupoint 被引量:2
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作者 Yu-Hui Hao Zhi-Zhen Liu +7 位作者 Hong Zhao Lei Wang ajab khan Jian-Bin Mu Yu-Fei Wang Li-Hong Yang Ran Zhou Jun Xie 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2021年第22期2730-2737,共8页
Background:Shenque(CV8)acupoint is located on the navel and has been therapeutically used for more than 2000 years in Traditional Chinese Medicine(TCM).However,clinical research on the underlying therapeutic molecular... Background:Shenque(CV8)acupoint is located on the navel and has been therapeutically used for more than 2000 years in Traditional Chinese Medicine(TCM).However,clinical research on the underlying therapeutic molecular mechanisms of the CV8 acupoint lags far behind.This study aimed to study the mechanisms of umbilical acupoint therapy by using stem cells.Methods:The morphological characteristics of CV8 acupoint were detected under a stereomicroscope using hematoxylin and eosin(H&E)staining.Oil Red,Masson,and immunohistochemical staining on multi-layered slices were used to identify the type of cells at the CV8 acupoint.Cell proliferation was measured by a cell counting kit-8(CCK-8)method.Flow cytometry and immunohistochemistry were used for cell identification.Induced differentiation was used to compare the differentiation of cells derived from CV8 acupoint and non-acupoint somatic stem cells into other cell types,such as osteogenic,adipogenic,and neural stem cell-like cells.Results:Morphological observations showed that adipose tissues at the linea alba of the CV8 acupoint in mice had a mass-like distribution.Immunohistochemical staining confirmed the distribution of stem cell antigen-1(Sca-1)positive cells in the multi-layered slices of CV8 acupoint tissues.Cells isolated from adipose tissues at the CV8 acupoint exhibited high expression of Sca-1 and CD44 and low expression of CD31 and CD34,and these cells possessed osteogenic,adipogenic,and neurogenic stem cell-like cell differentiation ability.The cell proliferation(day 4:0.5138±0.0111 vs.0.4107±0.0180,t=8.447,P=0.0011;day 5:0.6890±0.0070 vs.0.5520±0.0118,t=17.310,P<0.0001;day 6:0.7320±0.0090 vs.0.6157±0.0123,t=13.190,P=0.0002;and day 7:0.7550±0.0050 vs.0.6313±0.0051,t=42.560,P<0.0001),adipogenic([9.224±0.345]%vs.[3.933±1.800]%,t=5.000,P=0.0075),and neurogenic stem cell-like cell differentiation(diameter<50 mm:7.2000±1.3040 vs.2.6000±0.5477,t=7.273,P<0.0001;diameter 50–100 mm:2.6000±0.5477 vs.1.0000±0.7071,t=4.000,P=0.0039;and diameter>100 mm:2.6000±0.5477 vs.0.8000±0.8367,t=4.025,P=0.0038)were significantly enhanced in somatic stem cells derived from the CV8 acupoint compared to somatic stem cells from the groin non-acupoint.However,cells possessed significantly weaker osteogenicity([2.697±0.627]%vs.[7.254±0.958]%,t=6.893,P=0.0023)in the CV8 acupoint group.Conclusions:Our study showed that CV8 acupoint was rich with adipose tissues that contained abundant somatic stem cells.The biological examination of somatic stem cells derived from the CV8 acupoint provided novel insights for future research on the mechanisms of umbilical therapy. 展开更多
关键词 Shenque(CV8)acupoint Non-acupoint site NAVEL Adipose tissue Somatic stem cells Stem cell antigen-1(Sca-1) Umbilical therapy
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A rapid colloidal gold immunochromatographic assay for the diagnosis of coronavirus disease 2019 被引量:1
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作者 Xiao-Ling Wang Lei Wang +10 位作者 Chao-Lu Hasi Yu-Po Wang ajab khan Bin-Zhi Ren Zhi-Zhen Liu Shun-Lin Hou Li-Hong Yang Liao-Yun Zhang Yong-Kang Dong Jun Xu Jun Xie 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2020年第16期1986-1988,共3页
Coronavirus disease 2019(COVID-19),caused by a severe acute respiratory syndrome coronavirus-2(SARS-CoV-2),which can lead to pneumonia and severe acute respiratory syndrome,continues to spread across the globe.[1]Due ... Coronavirus disease 2019(COVID-19),caused by a severe acute respiratory syndrome coronavirus-2(SARS-CoV-2),which can lead to pneumonia and severe acute respiratory syndrome,continues to spread across the globe.[1]Due to strict precautionary measures,the epidemic situation of COVID-19 has been initially controlled in China.However,the numbers of confirmed positive cases of COVID-19 and deaths are increasing in other countries.In fact,the SARS-CoV-2 is more contagious than severe acute respiratory syndrome coronavirus(SARS-CoV)[2]and Middle East respiratory syndrome coronavirus(MERSCoV).[3]Therefore,the rapid and accurate identification of pathogenic viruses plays a vital role in controlling epidemics.Computed tomography imaging and some hematologic parameters are the initial markers for COVID-19 infection,[4,5]while viral nucleic acid detection by reverse transcription-polymerase chain reaction is used as a gold standard for the clinical diagnosis of suspected cases. 展开更多
关键词 DIAGNOSIS RESPIRATORY initially
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