ECH-931长程治疗对老年性痴呆的分子基因药效学研究

阿尔茨海默病(AD)是最常见的与年龄有关的神经退行性疾病。全世界约15%的65岁以上人群和30%的80岁以上老人患有 AD。AD 的病因仍未明确,目前尚无有效的预防和治疗方法。随着人类社会的老龄化,本病已成为一个世界性的重大医学和社会难题。许多证据显示β-淀粉样肽在阿尔茨海默病(AD)的病因学和/或病程发展中起着关键作用。很多研究提示β-淀粉样肽的神经毒性与氧的负荷和自由基损伤密切相关。最近的研究表明,NF-_κ B 在神经元存活和突触的可塑性方面发挥重要作用,CREB 是长时程记忆(LTM)和长时程增强效应(LTP)的必要基因开关。本研究观察了科研新药 ECH-931对β-淀粉样肽1～40,β-淀粉样肽25～35和 H202所诱导的 B104中枢神经系神经元细胞株神经毒性的预防和治疗作用。ECH-931的低,中,高实验浓度分别为50μg/ml,100μg/ml和150/200μg/ml,用 ECH-931处理的方案如下:细胞经 ECH-931预处理3天后,用 ECH-931和 H202(100～200μM)共同处理3～12小时,以观察 ECH-931对 H202神经毒性的防治效果;细胞经 ECH-931预处理3天后,用 ECH-931和 Abeta 1～40(10μM)处理48小时来预防性治疗 Abetal～40的神经毒性;在细胞暴露于Abeta25～35(25μ M)8小时后再用 ECH-931处理48小时(经 ECH-931和 Abeta25～35共同处理48小时)以观察 ECH-931对 Abeta 神经毒性的治疗作用:在 NF-_κ B 和 CREB 基因转染后以 ECH-931处理5天,以观察ECH-931对 NF-_κ B 和 CREB 基因表达的影响;在 NF-_κ B 基因转染并加 Abetal～40(5μM)后以 ECH-931处理3天,以观察 ECH-931拮抗 Abeta1～40对 NF-_κ B 基因表达影响的效果。结果表明:经 ECH-931(50～200μg/ml)预处理和共同处理 B104神经元能完全拮抗β-淀粉样肽1～40(10μM)诱导的神经毒性(P<0.05～0.01>;用 ECH-931(50～200μg/ml)治疗性处理能显著阻止由β-淀粉样肽25～35(25μM)诱导的 B104神经元细胞死亡/凋亡(P<0.05～0.01);用 ECH-931(50-200μg/ml)预处理和共同处理能显著保护由 H202(100-200μM)诱导的 B104神经元细胞死亡/凋亡;用 ECH-931(50～150μg/ml)治疗性处理能显著上调在 B104 CNS 神经元细胞中转染基因 NF-_κ B 和 CREB 的表达(P<0.005～0.01>;ECH-93150～150μg/ml 能拮抗由β-淀粉样肽1～40诱导的 NF-_κ B 表达抑制(P<0.01>。并且,所有 ECH-931的处理效应都呈现剂量依赖性(P<0.05～0.01)。基于以上研究结果,我们认为 ECH-931能保护(预防和治疗)神经元免受由β-淀粉样肽诱导的神经毒性。其机制与拮抗活性氧/氢氧根自由基损伤和激活 NF-_κ B 细胞存活信号通路有关。ECH-931治疗 AD 的另一个重要机理可能是它能调节 CREB 的表达,而 CREB 是长期记忆的基因开关。ECH-931的神经元保护效应尤其是其阻止β-淀粉样肽诱导的毒性和细胞死亡的效力显示出它治疗神经退行性疾病(如 AD)的潜力,具有重要的研究开发价值和广阔的应用前景。