谷氨酸棒杆菌苯丙氨酸生物合成有关基因克隆及在选育苯丙氨酸产生菌中的应用

谷氨酸棒杆菌K_(38)是一株抗对—氟苯丙氨酸和邻—氟苯丙氨酸的苯丙氨酸产生菌;而谷氨酸棒杆菌KY_(9456)则是一株缺失分枝酸变位酶和预苯酸脱水酶菌株。我们把K_(38)的分枝酸变位酶和预苯酸脱水酶基因克隆到KY_(9456)的pCE_(53)质粒中,构建了质粒pCmB_4。pCmB_4含有一段插入到pCE_(53)BamHI单一酶切位点上的9.4KbBamHIDNA片段。质粒pCmB_4弥补了KY_(9456)的苯丙氨酸和酪氨酸双重营养缺陷。pCmB_4质粒转入谷氨酸棒杆菌RRL_5中:结果RRL_5的分枝酸变位酶活性增加10倍左右。pCmB_4质粒转入K_(38)中,携带质粒的K_(38)菌可累积19.0mg/ml苯丙氨酸(比原K_(38)增产50%以上)。