药液稀释倍数对威百亩分解产生异硫氰酸甲酯及其消解的影响

种植前施用威百亩进行土壤熏蒸消毒,其分解产生的异硫氰酸甲酯(methyl isothiocyanate, MITC)可有效控制土传病原菌。威百亩以滴灌方式施用更为方便、安全,但在滴灌前的稀释过程中可能会水解产生MITC,MITC继续消解或挥发导致进入土壤的有效成分量减少。因此有必要筛选适宜的威百亩稀释倍数,保证MITC在土壤中分布均匀的同时减少威百亩分解及MITC消解和挥发导致的损失。本文研究了不同pH条件下稀释倍数对威百亩水解产生MITC及MITC消解的影响。结果表明,在中性条件下,由威百亩水解产生的MITC量及其消解速率均随稀释倍数增加而增加;在酸性条件下,稀释100倍时MITC的产生量及消解速率均为最大,稀释50倍时MITC的产生量最低,稀释400倍时MITC消解最慢;在碱性条件下,MITC的产生量随稀释倍数增加而增加,消解速率为稀释1 000倍时最快,稀释100倍时最慢。研究结果对滴灌施用威百亩时田间用水量及威百亩用量均具有指导意义。

棉隆熏蒸对烟草氮素吸收利用的影响

为探究棉隆熏蒸对烟草氮素吸收转化利用的影响,本试验选取云南酸性红壤、北京碱性潮土2种中国典型土壤,以本氏烟Nicotiana benthamiana为对象,研究了棉隆熏蒸对土传病原菌防效、土壤氮素转换、根系氮素供应、植株氮空间分布及氮代谢关键酶活性的影响。结果显示,棉隆熏蒸对2种供试土壤中土传病原菌镰孢属Fusarium spp.、疫霉属Phytophthora spp.真菌的抑制率均超过89%,棉隆熏蒸显著增加了土壤铵态氮含量,减少了硝态氮含量,抑制了土壤硝化速率及根系硝态氮供应速率,而促进了土壤反硝化速率及根系铵态氮供应速率。棉隆熏蒸显著降低了烟草组织总氮含量,但增加了根、茎、叶各部位铵态氮含量,减少了硝态氮含量,且在酸性红壤土中更明显。棉隆熏蒸后硝酸还原酶、亚硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸合成酶活性有不同程度增加。试验结果表明,棉隆熏蒸通过改变根际氮素形态及含量,进而影响根际氮素供应速率及氮代谢关键酶活性,促进烟草根茎叶各部位硝态氮的代谢,促进烟草生长。研究结果为棉隆的科学应用提供了理论支撑。

辣椒炭疽病菌Colletotrichum nigrum鉴定、生物学特性及药剂敏感性研究

对2021年9—10月从吉林省和内蒙古自治区东部辣椒主产区采集的辣椒果实炭疽病样本进行病菌的组织分离和纯化,获得212株形态特征基本一致的菌株,对代表菌株进行柯氏验证,证明其具有致病性,为该病害的病原菌。结果表明,结合病原菌的形态学特征及基于ITS、TUB2、ACT、GAPDH和CHS-1基因序列构建系统发育树,确定病原菌为Colletotrichum nigrum。病原菌的生物学特性研究发现,OA培养基适合病原菌菌丝生长;D-麦芽糖是最佳碳源;蛋白胨为最佳氮源;最佳pH为10;最适培养温度为20℃;全黑暗时最适合菌丝生长。代表菌株对25种杀菌剂敏感性研究表明,400 g·L^(-1)氯氟醚·吡唑酯SC、240 g·L^(-1)氯氟醚·吡唑酯EC、42.4%唑醚·氟酰胺SC、40%唑醚·戊唑醇SC、43%唑醚·氟酰胺SC对病菌菌丝生长速率和孢子萌发均有明显抑制作用,其EC_(50)<1 mg·L^(-1),可作为该病害防治的优选药剂。

28个农药产品推荐剂量对西瓜噬酸菌的抑制活性

西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli,简称Ac)引起的西瓜细菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch,简称BFB)是西瓜和甜瓜生产上重要的毁灭性种传细菌病害。一旦发病,用于该病害防治的有效药剂的选择就极为重要。为了筛选出高防效药剂,笔者采用抑菌圈法测定了乙酸素等28个农药产品的推荐剂量对2株西瓜噬酸菌的抑制活性。试验结果表明,供试药剂0.3%四霉素AS稀释30倍液和50倍液、30%乙蒜素EC 500倍液和700倍液、80%乙蒜素EC 1 500倍液和1 800倍液对供试菌株AacJ-N和Aac7500的抑菌活性较好,抑菌圈直径均在15 mm以上;46%氢氧化铜WG 700倍液和1 000倍液、53.8%氢氧化铜WG 500倍液和600倍液、20%溴硝醇WP 1 000倍液和1 500倍液、2%春雷·45%王铜WP(江门植保)470倍液和750倍液、3%噻霉酮ME 360倍液对供试菌株AacJ-N和Aac7500的抑菌圈直径在10～15 mm;其余供试药剂在试验剂量下均无抑菌作用。不同菌株对相同药剂同一浓度的敏感性存在差异。

72%霜脲·锰锌可湿性粉剂防治人参苗期疫病田间药效试验

在2012年进行了72%霜脲·锰锌可湿性粉剂防治人参苗期疫病田间药效试验。试验表明:72%霜脲·锰锌可湿性粉剂对人参苗期疫病有很好的防治效果,使用剂量为有效量960～1 920g/hm^2喷雾对2次施药后7d的防治效果在70%～80%左右。人参生长无不良影响,对人参植株安全无药害。

水稻二化螟病原真菌鉴定及其致病力

通过对吉林本地自然越冬代罹病的水稻二化螟幼虫进行分离纯化,筛选出两个病原真菌JL003和JL005,采用形态特征比较和rDNA-ITS序列构建系统树进行分析,并采用浸渍法研究了2个菌株对二化螟3龄和6龄幼虫的毒力作用。鉴定结果表明,菌株JL003和JL005分别为渐狭蜡蚧菌和球孢白僵菌,其中,渐狭蜡蚧菌侵染水稻二化螟为国内新近报道。致病力研究结果表明,渐狭蜡蚧菌JL003对二化螟3龄和6龄幼虫的致死率为53.0%和46.0%,球孢白僵菌JL005对3龄和6龄幼虫的致死率为94.0%和93.0%。对低龄和高龄二化螟幼虫,菌株JL005对二化螟的致死率均明显好于菌株JL003,表现出更大的生物防治潜能。

化学药剂防控厚皮甜瓜细菌性果斑病的研究与应用

为了筛选防控果斑病的高效化学药剂,实现农药减施增效,通过田间试验研究了硫噻等药剂防控果斑病的效果。结果表明,只用硫噻200倍液进行种子消毒处理整枝打杈前、整枝打杈后的防效分别为74.7%和43.4%;硫噻种子消毒和田间硫噻喷雾(1000倍液)处理的整枝打杈前、整枝打杈后的防效分别为94.9%和92.0%,硫噻种子消毒和田间氧化亚铜喷雾处理的整枝打杈前、整枝打杈后的防效分别为94.9%和82.8%,两种处理病瓜率分别为1.9%、2.5%,没有显著性差异,但在其他地点试验中,厚皮甜瓜苗期喷施硫噻1000倍液,出现不同程度的药害,因此生产中优先推荐硫噻种子消毒和商品化的氧化亚铜喷雾防控果斑病。田间示范结果表明,种子消毒能够减少农药使用量,示范区比对照区全程减药48.7%,病瓜率减少34.4%,每667 m^2增加经济收益1806元。

防治甜瓜枯萎病药剂配方筛选及盆栽防效测定

以甜瓜枯萎病菌为试材,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法从8种待选药剂中选出4种较优试剂进行复配试验,采用Wadley方法分别计算菌丝生长和孢子萌发的增效系数,确定最优配比并进行盆栽试验。结果表明:8种待选药剂中,25%腈菌唑乳油和45%咪鲜胺微乳剂对菌丝生长抑制效果较好,EC50值分别为0.001 2、0.004 6 mg·L^-1;250 g·L^-1嘧菌酯悬浮剂和25%啶菌恶唑乳油对孢子萌发抑制效果较好,EC50分别为0.092 2、3.263 2 mg·L^-1。上述4种药剂按比例法两两混配,30种组合中有2种配比对病菌菌丝生长及孢子萌发均为增效和加和作用,即咪鲜胺∶嘧菌酯=4∶1,嘧菌酯∶啶菌恶唑=2∶3。盆栽接种防效测定结果表明,上述2个组合每株浇灌10 mL浓度为1.0 g·L^-1药液对甜瓜枯萎病防治效果分别为80.42%和76.57%,均显著高于单剂防效。为甜瓜枯萎病的防治药剂使用提供参考依据。

50%嘧菌环胺水分散粒剂防治人参灰霉病田间药效试验

2011-2012年进行了50%嘧菌环胺水分散粒剂防治人参灰霉病田间药效试验。试验表明:50%嘧菌环胺水分散粒剂对人参灰霉病有很好的防治效果,在有效量为225～300g/hm^2,于发病初期进行茎叶喷雾防治,防治效果在80%左右。对人参植株安全无药害。

25g/L咯菌腈悬浮种衣剂防治人参立枯病田间药效试验

2012年进行了25g/L咯菌腈悬浮种衣剂防治人参立枯病的田间药效试验。试验表明:25g/L咯菌腈悬浮种衣剂对人参立枯病有很好的防治效果,有效量2.5～10g(a.i.)/100kg种子处理对立枯病防治效果在70%～90%,对人参植株安全。

人参灰霉病菌Botrytis cinerea的种群表型和基因型多样性

为探究人参灰霉病菌Botrytis cinerea的种群表型和基因型多样性,对从我国人参主产区的8个地区所分离到的对人参有致病性的154株灰葡萄孢菌株进行研究,在PDA上培养3周观察其表型,通过PCR扩增的方法鉴定其转座因子类型和MAT基因型,并对不同转座因子类型的菌株进行致病力的测定。通过试验得到8种表型和3种转座因子型(Boty、Flipper和Transposa),不存在Vacuma类型,其中Transposa类型所占比例最高为93.51%,且致病力最强;同时也发现了含MAT1-1和MAT1-2的菌株个数分别为73株和75株,2种基因型在该种群中均匀分布。以上研究结果表明,我国人参灰霉病菌B.cinerea具有相对均匀的种群多样性,同时也具有丰富的表型和遗传分化。

吉林省西瓜蔓枯病菌对咪鲜胺和苯醚甲环唑敏感基线的建立和抗性监测

为明确吉林省西瓜蔓枯病菌Stagonosporopsis citrulli对咪鲜胺和苯醚甲环唑的抗药性水平,本试验采用菌丝生长速率法测定了151株西瓜蔓枯病菌对这两种药剂的敏感性及两种药剂对西瓜蔓枯病菌的MIC值,并测定了吉林省7个西瓜主产区的375株菌株对这两种药剂的抗性水平。结果表明,供试的151株菌株对这两种药剂的敏感性频率分布均呈连续的单峰曲线,接近正态分布;对咪鲜胺和苯醚甲环唑的敏感基线分别为(0.2030±0.1353)μg/mL和(0.6759±0.3942)μg/mL;两种药剂的最低抑制浓度MIC分别为20μg/mL和40μg/mL。供试375株菌株对两种杀菌剂的抗性频率均为0。本研究结果为咪鲜胺和苯醚甲环唑的合理用药策略提供了科学依据,为后续其抗性风险评估奠定了基础。

西瓜新炭疽病菌的鉴定、生物学特性及药剂敏感性研究

为了明确2018—2021年在吉林省及周边地区发现的一种西瓜炭疽病新病原菌的分类地位,探究其防治方法,采用组织分离法获得培养形状一致的52个菌株,柯氏验证结果表明其代表菌株具有致病性,结合形态学和分子生物学特征将该病原菌鉴定为菜豆炭疽菌Colletotrichum incanum。生物学特性观察结果表明:C.incanum菌丝生长的最适培养基为PDA,最佳pH值为5,最适氮源为甘氨酸,最适碳源为淀粉,最适温度为30℃,最适光照条件为全光照;产孢最适培养基为CMA,最适pH值为5,最佳氮源为甘氨酸,最佳碳源为麦芽糖,最适温度为10℃,在全黑暗条件下产孢最佳。采用菌丝生长速率法和孢子萌发法对该病原菌进行室内药剂敏感性测定。结果表明,在菌丝生长和孢子萌发方面,该病原菌对25%吡唑醚菌酯SC、350 g·L^(-1)苯甲·嘧菌酯SC、560 g·L^(-1)嘧菌·百菌清SC和40%嘧菌·戊唑醇SC敏感性均较好,可作为该病害防治的优先选用药剂。

内蒙古黄瓜靶斑病菌的鉴定及药剂敏感性测定

对来自内蒙古自治区赤峰市宁城县五化镇山头村的黄瓜叶斑病标本进行组织分离,纯化得到20株分离物,经柯氏验证均为致病菌。结合病菌形态学特征和分子生物学相关序列分析,确定该病原菌为多主棒孢菌[Corynespora cassiicola(Berk&Curt)Wei]。采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定C.cassiicola对26种药剂的敏感性。结果表明,代表菌株HGBB-Ⅲ菌丝生长对25%咪鲜胺EC、40%肟菌·咪鲜胺EW、40%苯醚甲环唑SC和10%苯醚甲环唑WG的敏感性较高,EC_(50)<1 mg·L^(-1);对430 g·L^(-1)戊唑醇SC、50%腐霉利WP、50%福美双WP、50%异菌脲WP、75%肟菌·戊唑醇WG、40%唑醚·戊唑醇SC、32.5%苯甲·嘧菌酯SC、30%肟菌·戊唑醇SC的敏感性略低,1 mg·L^(-1)<EC_(50)<10 mg·L^(-1)。HGBB-III的孢子萌发对50%福美双WP的敏感性最高,EC_(50)<1 mg·L^(-1),对42.4%唑醚·氟酰胺SC、200 g·L^(-1)氟酰羟·苯甲唑SC、40%唑醚·戊唑醇SC、12%苯甲·氟酰胺SC的敏感性较低,10 mg·L^(-1)<EC_(50)<100 mg·L^(-1)。上述药剂中,50%福美双WP对病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果均较好,可以作为防治过程中的首选药剂。

甜瓜青霉果腐病的病原鉴定及药剂筛选

以发病甜瓜为试材,采用常规组织分离法对采自吉林省梨树县甜瓜上的一种新病害进行病原菌分离、致病性测定,并通过形态学特征及rDNA-ITS、NS、NL、CAM和RPB2序列分析,确定其为草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)。采用孢子萌发法测定了该病原菌对20种杀菌剂的敏感性,以期筛选出对防治甜瓜青霉果腐病有效的药剂。结果表明:草酸青霉对25%吡唑醚菌酯EC、17%唑醚·氟环唑SC、80%克菌丹WG、70%代森联WG、22.5%啶氧菌酯SC、75%肟菌·戊唑醇WG和60%唑醚·代森联WG敏感性较高,EC50为0.001 7~1.0000 mg·L-1;对75%百菌清WP、450 g·L-1咪鲜胺EW、500 g·L-1甲基硫菌灵、25%嘧菌酯SC、250 g·L-1苯醚甲环唑EC和12%氟菌·氟环唑EC的敏感性略低,EC50为1.379 5~8.131 5 mg·L-1,为生产上防治该病害提供了备选药剂。

西瓜噬酸菌Ⅲ型分泌系统hrcS基因功能分析

为明确编码Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,T3SS)中重要核心蛋白的hrcS基因对西瓜噬酸菌Acidovorax citrulli致病力的影响,以西瓜噬酸菌野生型菌株Aac5为对象,通过基因敲除构建hrcS基因缺失突变菌株ΔhrcS及其互补菌株ΔhrcS-comp,测定其致病力及致病相关基因表达量、烟草过敏性反应能力、运动能力及运动能力相关基因表达量、生物膜形成能力和离体生长能力。结果显示,与野生型菌株Aac5相比,hrcS基因缺失突变菌株丧失了对寄主的致病能力和引起非寄主烟草过敏性反应能力,运动能力显著增强了191.75%,生物膜形成能力显著下降了43.90%,离体生长能力在达到对数期后呈下降趋势。hrcS基因缺失使西瓜噬酸菌T3SS中hrpG、hrpX和hrpE基因以及鞭毛fliC基因表达量显著上调,分别为野生型菌株的2.27倍、2.38倍、1.26倍和1.77倍,hrcQ基因表达量显著下调,仅为野生型菌株的50.75%。表明hrcS基因在维持西瓜噬酸菌致病能力中发挥着重要作用。

西瓜噬酸菌效应蛋白AopK的功能研究

瓜类细菌性果斑病是西甜瓜产业中最重要病害之一,其病原菌西瓜噬酸菌的Ⅲ型分泌系统效应蛋白在致病过程中起重要作用。XopK为黄单胞菌效应蛋白,具有E3泛素连接酶活性,其在西瓜噬酸菌中的同源基因aopK鲜有研究。为鉴定效应蛋白AopK并探究其功能,本研究构建了西瓜噬酸菌AAC00-1菌株的aopK缺失突变株和互补菌株,发现基因aopK的缺失显著降低病原菌在西瓜幼苗上的致病力。通过AopK在本氏烟中的亚细胞定位实验,显示AopK定位于植物的细胞质膜。转录水平、外泌性及BAX共表达试验,证明aopK的表达受HrpX和HrpG正调控,其产物能够通过Ⅲ型分泌系统分泌到细胞外,并且能够抑制烟草叶片细胞中活性氧产生、胼胝质沉积以及细胞坏死产生,具有潜在抑制植物防卫反应的毒性功能。以上结果表明AopK为西瓜噬酸菌的Ⅲ型效应蛋白,研究结果为进一步探究其与寄主植物间的互作机理奠定了基础。

松毛虫赤眼蜂对柞蚕灰卵的寄生选择与适应性

为明确柞蚕Antheraea pernyi灰卵(工厂化繁育赤眼蜂过程中广泛存在的一种感病寄主卵)对松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi寄生选择与适应性及其繁育子代蜂寄生能力的影响,以柞蚕灰卵作为供试寄主,健康卵作为对照,在无选择和双向选择条件下研究松毛虫赤眼蜂对其的寄生选择与适应性,并比较灰卵和健康卵繁育的子代蜂对0、1、2、3日龄米蛾Corcyra cephalonica卵的寄生能力。结果表明,在无选择条件下,松毛虫赤眼蜂在灰卵上的寄生率、羽化率、单卵出蜂数和总蜂数分别为30.0%、54.1%、39.3头和48.7头,而在健康卵上分别达到96.0%、93.0%、82.5头和96.8头。在双向选择条件下,松毛虫赤眼蜂在灰卵上的寄生率、羽化率、单卵出蜂数和总蜂数分别为33.3%、27.1%、24.7头和52.2头,而在健康卵上分别为68.0%、86.3%、60.6头和74.2头。在无选择和双向选择条件下,松毛虫赤眼蜂在灰卵和健康卵上的发育历期和后代雌性比均不存在显著差异,但灰卵繁育的子代蜂对1、2日龄米蛾卵的寄生数则显著低于健康卵繁育的子代蜂,且后者对米蛾卵的寄生数随着米蛾卵日龄的增加呈逐渐下降趋势,而灰卵繁育的子代蜂对0、3日龄米蛾卵的寄生数要显著高于1、2日龄的。表明柞蚕灰卵会对松毛虫赤眼蜂的寄主选择与适应性以及子代蜂的寄生能力产生不良影响。

防治西瓜枯萎病药剂配方筛选及盆栽防效测定

为筛选出对西瓜枯萎病菌抑制效果较好的杀菌剂及混配比例,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定7种药剂对病原菌的室内毒力。结果表明:25%啶菌噁唑乳油和250 g/L嘧菌酯悬浮剂对孢子萌发的抑制效果较好,EC50值分别为0.98 mg/L和1.08 mg/L;45%咪鲜胺微乳剂和25%腈菌唑乳油对菌丝生长的抑制效果较好,EC50值分别为0.02 mg/L和0.05 mg/L。上述4种药剂按比例法两两混配,采用Wadley方法计算增效系数,30种组合中有4种配比对病菌孢子萌发及菌丝生长均为增效作用,即咪鲜胺:嘧菌酯4:1,啶菌噁唑:嘧菌酯2:3、1:1、4:1,增效系数分别为7.21:2.00,2.67:6.14、4.68:2.14、1.72:4.06。盆栽接种防效测定结果表明:每株浇灌10 mL浓度为1.5 g/L药液对西瓜枯萎病防效分别为94.42%、87.51%、83.83%、83.43%。

糜子细菌性条斑病病原菌鉴定及其对13种杀菌剂的敏感性

为有效防治糜子细菌性条斑病,采用平板划线分离法对2016年自黑龙江省齐齐哈尔市采集的罹细菌性条斑病的糜子植株进行病原菌分离与纯化,依据柯赫氏法则对其致病性进行测定;采用Biolog自动微生物鉴定系统、16S rDNA和16S-23S rDNA间隔区序列分析及病原菌的生理生化反应对病原菌进行鉴定;并测定该病原菌对13种常用杀菌剂的敏感性。结果显示,从糜子叶片和叶鞘病斑中共分离纯化获得10株培养性状一致的菌株,经柯赫氏法则验证均为细菌性条斑病病原菌。经Biolog鉴定,3株代表菌株与标准菌株燕麦噬酸菌Acidovorax avenae的相似值分别为0.716、0.705、0.723,序列分析显示,这3株代表菌株与燕麦噬酸菌燕麦亚种A. avenae subsp. avenae的一致性为99%以上;该病原菌的革兰氏染色反应及碳源利用等生理生化反应与对照菌株燕麦噬酸菌ICMP3183表现一致。因此,确定糜子细菌性条斑病病原菌为燕麦噬酸菌。糜子细菌性条斑病病原菌代表菌株MZ121101对80%乙蒜素乳油、30%乙蒜素乳油及0.3%四霉素水剂的敏感性较高,抑制中浓度EC50介于389.31~939.94μg/mL之间,这2种药剂可作为防治糜子细菌性条斑病的首选药剂。