基于三重实时荧光聚合酶链反应构建黄牛和牦牛源性成分同步检测方法

目的建立一种拥有内源质控的三重实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,用以快速鉴定肉和乳中黄牛和牦牛的源性成分。方法首先对黄牛肉、牦牛肉、黄牛奶、牦牛奶等7种动物产品进行特异性检测,同时通过稀释梯度方法验证此方法的绝对检出限(limit of detection,LOD),最后通过黄牛和牦牛肉掺假模拟试验确定该方法的相对灵敏度。结果该方法的特异性强,能特异性地检测到来源于黄牛和牦牛肉和乳的DNA,稳定扩增的内源质控有效地避免了假阴性结果,本方法针对黄牛奶的绝对LOD为2.5×10^(-3)5.0×10‒3 ng,针对牦牛奶的绝对LOD为2.5×10^(-3)5.0×10^(‒2)ng,本方法对黄牛肉和牦牛肉混合肉的相对灵敏度可达0.1%牦牛肉。结论所建立的三重实时荧光PCR方法特异性强、灵敏度高,可实现黄牛和牦牛源性以及内源质控的同步检测,又能通过内源质控排除实验假阴性结果。

不同施氮量对大豆田土壤线虫群落的影响

为了深入研究土壤线虫对不同氮肥施用大豆田土壤生态环境变化的生物指示作用,以兴安盟农牧科学研究所羊场子基地大豆田土壤为研究对象,通过田间小区试验及取样数据分析,对比研究了不同施氮条件下(0、45、90 kg/hm^(2))不同土层(0~10 cm、10~20 cm和20~30 cm)的土壤线虫生态特征指数,并进行了主成分分析。结果表明,不同施氮处理中,合理施用氮肥能增加土壤线虫数量,抑制植物寄生线虫丰富度,提高食细菌线虫丰富度,有利于土壤线虫形成较为健康多样的生态群落。通过经济性状以及产量分析,施用氮肥45 kg/hm^(2)大豆产量最高,表明合理施肥能促进作物生长增加产量。主成分分析结果表明:0~10 cm土层的前两个主成分PC1和PC2分别解释了总变异的60.50%和39.50%,H、J、PPI、SR、EI、SI等指数及pH值之间的关系更为密切,土壤有机质、碱解氮和速效钾的结合相对紧密;10~20 cm土层的前两个主成分PC1和PC2分别解释了总变异的52.88%和47.12%,WI、F/B、J、H、EI、SI等指数之间的关系相对更为密切,pH值、有机质、碱解氮和速效钾的结合相对紧密;20~30 cm土层的前两个主成分PC1和PC2分别解释了总变异的61.20%和38.80%,H、J、WI、EI、SI、SR、F/B之间的关系相对密切,pH值、有机质、碱解氮和速效钾的结合相对紧密。综上,土壤线虫群落多样性对于揭示施用氮肥对土壤环境的影响具有良好的作用。本研究为探求兴安盟地区氮肥投入对土壤线虫群落的影响提供参考。