不同浓度曲古抑菌素A对鸡胚翅芽发育的影响

目的观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对鸡胚翅芽发育中某些基因表达水平的作用,探讨不同浓度TSA(75μmol/L、750μmol/L、1.5mmol/L)对鸡胚翅芽发育的影响,提高我们对染色质结构重组和表观遗传对基因表达的调控作用,以及对正在开发的抗癌药物的认识。方法以鸡胚翅芽作为实验模型,用TSA处理翅芽,对鸡胚胎实施原位杂交,检测与肌肉发育相关基因的表达,并采用硫酸耐尔蓝(Nile blue sulfate)法检测细胞凋亡状况。结果75μmol/L TSA能够抑制与肌肉发生相关的基因MyoD和Myf5在鸡胚翅芽的表达,经TSA(75μmol/L)处理的胚胎没有发生明显的细胞凋亡。但是随着TSA药物浓度的提高,TSA(≥750μmol/L)不仅强烈抑制相关基因的表达,而且出现翅芽外部畸形(外形改变、体积缩小)以及细胞凋亡。结论75μmol/LTSA调控某些重要的转录因子及有力地控制肌肉细胞的分化;高浓度TSA(≥750μmol/L)导致细胞凋亡和胚胎翅芽畸形;发育的鸡胚能够作为一个便利的、供体内研究药物(如HDAC抑制剂类等)的模型。

Trichostatin A在体内对鸡胚翅芽发生中基因表达模式的作用

表观遗传和染色质重塑参与了胚胎形成及肿瘤发生,乙酰化作用是调控基因转录的关键修饰之一,组蛋白去乙酰基酶抑制剂被视为肿瘤治疗中最有前景的药物开发目标.然而哪些基因在体内对乙酰化作用修饰更敏感?这些基本问题仍未完全知晓.以鸡胚翅芽作为实验模型,用HDAC抑制剂trichostatin A(TSA)处理翅芽,研究翅芽发生中一系列基因对TSA的反应.结果显示,TSA(75μmol/L)能够改变某些对翅芽发育具有重要功能的基因的表达水平,其中SF/HGF和Twist1基因的表达被上调;FGF8,Shh,TCF4,Myf5及MyoD基因的表达被下调;与此不同,Pax3,Paraxis,CREB和PCNA基因的表达水平不受TSA作用的影响.结果提示,发育的鸡胚翅芽能够作为一个便利的、供体内研究HDACs抑制剂对基因表达作用的模型,有助于提高对染色质重塑和表观遗传对基因表达的调控作用,以及对正在开发的抗癌药物的认识.