淋巴细胞减少期联合免疫重建和瘤苗免疫增强抗肿瘤免疫的机制

目的阐明向免疫重建的淋巴细胞减少小鼠(reconstituted lymphopenic mice,RLM)进行瘤苗免疫增强抗肿瘤免疫反应的机制.方法分别以放疗和环磷酰胺处理C57BL/6小鼠,建立淋巴细胞减少模型,并各设正常-非免疫组、RLM-非免疫组、正常-免疫组和RLM-免疫组等4个实验组.在免疫重建的24 h内,分别用灭活黑色素瘤细胞F10(放疗实验部分)和GM-CSF修饰的活黑色素瘤细胞D5-G 6(化疗实验部分)免疫,8～10 d后采集肿瘤疫苗部位引流淋巴结(tumor vaccine draininglymph node,TVDLN),以FACS分析细胞表型.磁珠纯化的T细胞分别经anti-CD3及anti-TCRβ刺激后,分别以[3H]-TdR掺入法和FACS检测T细胞的增殖能力和CD69的表达情况,以此反映T细胞的激活阈值.结果 RLM-免疫组TVDLN中,DC细胞和活化T细胞的频数显著增高.新鲜T细胞的体外增殖能力显著增强,激活阈值明显降低.结论放、化疗引起的淋巴细胞减少可诱导T细胞增殖活化,激活阈值降低,有助于瘤苗免疫打破机体对肿瘤的免疫耐受,增强抗肿瘤免疫反应.

抗OX-40和抗IL-4抗体体外促进Th1细胞的初步探讨

将灭活的自身黑色素瘤细胞MEL 72与BCG混合免疫MEL 72黑色素瘤病人 ,10d后手术方法获取局部引流淋巴结 ,制成淋巴细胞悬液 ,以抗CD3抗体体外培养 ,ELISA方法检测细胞上清中肿瘤特异性Th1、Th2细胞因子的表达。进一步用抗OX 40抗体与CD4+ T淋巴细胞表面OX 40作用或用抗IL 4抗体阻断IL 4的分泌 ,观察肿瘤特异性免疫反应能否向Th1方向转换。结果表明 :用灭活的自体肿瘤细胞免疫机体能诱导出该肿瘤细胞特异性的Th1和Th2。应用抗OX 40抗体与抗IL 4抗体作用后 ,Th1细胞因子分泌水平增加 (TNF β和IFN γ ) ,结果提示 ,应用抗OX 40和抗IL 4抗体可诱导肿瘤特异性Th1反应。