HCV感染相关的肝细胞性肝癌中精氨酸酶Ⅱ的表达

目的通过对丙型肝炎病毒-原发性肝细胞肝癌（HCV-HCC）组织及细胞中精氨酸酶Ⅱ（Arg-Ⅱ）的表达进行分析，并以RNA干扰技术阻断其在细胞内的表达，初步研究Arg-Ⅱ表达在HCV-HCC发病中的意义。方法首先以基因转染技术分别将HCV基因组和对照质粒导入HuH7细胞中，以逆转录-实时荧光PCR检测HCV基因组的转录并作细胞生长曲线测定，以Western blotting技术研究HCV基因组转染对细胞内Arg-Ⅱ表达的影响，以免疫组化技术分析HCV-HCC组织中Arg-Ⅱ的表达水平，运用RNA干扰技术对Arg-Ⅱ作初步的功能分析。结果以基因转染技术分别将HCV基因组和对照质粒导入HuH7，成功建立了HuH7-HCV和HuH7-vector两个细胞系，逆转录-实时荧光PCR检测表明HuH7-HCV细胞的HCV转录水平为0．5～5拷贝／细胞。Western blotting结果显示，与对照细胞相比，HuH-7-HCV细胞的Arg-Ⅱ含量升高3．9倍。免疫组化技术分析HCV-HCC组织标本中Arg-Ⅱ的表达，结果呈强阳性，而对照标本中基本不表达。采用RNA干扰方法阻断HuH7-HCV细胞的Arg-Ⅱ表达，发现细胞增殖被明显抑制。结论Arg-Ⅱ在HCV阳性肝细胞系中及HCV-HCC组织中异常表达并可能参与HCV-HCC的发病机制。

精氨酸酶I在HCV转染肝癌细胞增殖中的作用

目的:研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因组转染的肝癌细胞中精氨酸酶Ⅰ的表达及其意义,探究其在HCV-肝细胞肝癌(HCC)发病中的作用。方法:以转染HCV基因组的人肝癌细胞系(Huh7)为研究对象,采用蛋白印迹技术研究HCV基因组转染对细胞内精氨酸酶Ⅰ表达的影响;运用小干扰RNA(siRNA)技术抑制细胞精氨酸酶Ⅰ表达,并探讨其对细胞生长的影响及作用机制。结果:精氨酸酶Ⅰ在HCV阳性肝癌细胞系(Huh7-HCV)中的表达上调,且与对照细胞相比,Huh7-HCV细胞的精氨酸酶Ⅰ含量升高4.3倍。运用siRNA抑制细胞精氨酸酶Ⅰ表达,可明显抑制细胞生长并导致其死亡,且可使细胞周期发生明显改变。结论:精氨酸酶Ⅰ在HCV阳性肝细胞Huh7中表达上调,可能对促进Huh7-HCV细胞生长具重要意义。

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