一种以纳米技术为基础的免疫佐剂诱导猪肺脏中抗猪繁殖与呼吸综合征病毒交叉保护反应的创新方法

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染引起的对经济有毁灭性影响的猪呼吸道疾病。PRRSV是动脉炎病毒属的高突变RNA病毒,主要感染肺脏巨噬细胞。一方面,由于广泛使用的PRRS减毒活疫苗已无法阻止PRRS暴发和再感染,且活病毒疫苗的安全性仍有待研究;另一方面,灭活疫苗免疫原性低,但安全性高。本试验对增强猪呼吸系统中PRRS灭活疫苗抗原(KAg)的免疫原性进行了研究,具体方法:①将KAg包埋在可生物降解的聚(乳酸-羟基乙酸)纳米粒子中(NPKAg);②偶联NP-KAg和潜在的黏膜佐剂,如结核分枝杆菌的全细胞裂解液(M.tb WCL);③应用疫苗配方对生长猪滴鼻2次。前期研究结果显示,单剂量NP-KAg部分清除接种的异源PRRSV。最近研究结果显示,NP-KA偶联未包埋的M.tb WCL能显著清除接种的异源PRRSV的病毒血症。因PRRSV是主要的肺脏疾病病原,本试验旨在调查免疫异源PRRS疫苗猪肺脏的病毒载量、肺脏黏膜表面及其软组织保护的不同免疫相关性。结果表明,5个不同疫苗佐剂配方中,NP-KA偶联未包埋的M.tb WCL能显著清除检测到的、可复制的、有效的PRRSV,伴随着10倍降低肺脏中病毒RNA载量及大幅度减少肺脏病理损伤。从免疫学角度来讲,本试验观察了肺脏中的强烈体液免疫(通过高亲和力抗体来增强病毒中和抗体)和细胞介导的免疫反应(增加分泌IFN-γ的CD4+和CD8+淋巴细胞数量和减少免疫抑制因子的分泌)。总之,在猪呼吸系统中NP-KA偶联可溶性的M.tb WCL引起了抗PRRSV免疫的广泛交叉保护。