绿色荧光蛋白在人大肠癌HT-29c细胞的表达

目的 观察增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)在人大肠癌细胞的表达情况。 方法 构建逆转录病毒载体质粒prkatEGFP/neo ,用磷酸钙沉淀法转导 2 93T细胞 ,4 8h获得高滴度病毒颗粒上清液并转染人大肠癌HT 2 9c细胞。荧光显微镜及流式细胞仪观察转染的EGFP基因在人大肠癌HT 2 9c细胞体内外的表达。 结果 携带EGFP的逆转录病毒载体能有效地转染人大肠癌细胞 ,HT 2 9c细胞能稳定、高效和持久地表达EGFP ,与未转染细胞比较 ,他们的生物学特性未改变 (F =0 6 2 ,P >0 0 5 )。在裸大鼠皮下肿瘤中 ,EGFP也能稳定、高效的表达。 结论 外源性EGFP能在人大肠癌HT 2 9c细胞内进行有效的复制、转录和翻译 ,在体内外可持续、稳定、高效的表达。它能作为一种新的实验方法应用于肿瘤细胞生长。