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Q345B大厚板双面双弧焊接头组织与力学性能 被引量:1
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作者 高桂丽 缪神 +1 位作者 蔡春波 张华军 《哈尔滨理工大学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期113-117,共5页
针对Q345B大厚板高强钢接头在机器人双面双弧焊中易出现焊不透、撞枪的问题,采用根部无预留间隙的焊接方法,通过增大焊接线能量、减小弧间距实现根部全熔透。依据《美国钢结构焊接规范》标准对接头进行力学性能试验和显微组织分析,结果... 针对Q345B大厚板高强钢接头在机器人双面双弧焊中易出现焊不透、撞枪的问题,采用根部无预留间隙的焊接方法,通过增大焊接线能量、减小弧间距实现根部全熔透。依据《美国钢结构焊接规范》标准对接头进行力学性能试验和显微组织分析,结果表明:根部打底前焊道组织为针状铁素体和贝氏体,打底后焊道和填充焊组织为针状铁素体和少量的先共析铁素体;熔合区组织为针状铁素体和板条马氏体,粗晶区为板条束更粗大的板条马氏体。焊接接头平均抗拉强度达到536.47 MPa,焊缝强度高于母材。接头出现局部硬化,硬度最高值为281 HV,符合标准的要求。 展开更多
关键词 Q345B大厚板 双面双弧焊 无预留间隙 机器人
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MYOZ2通过负调控TCAP的表达促进C3H10T1/2细胞成脂分化 被引量:3
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作者 吴怡琦 李文霞 +12 位作者 杨帅 张燕伟 何志强 李文新 杨阳 赵燕 刘宏 张明青 高鹏飞 蔡春波 郭晓红 李步高 曹果清 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期380-390,共11页
本研究旨在明确钙调磷酸酶肌小节结合蛋白2(myozenin2,MYOZ2)的组织表达特性,阐明其对C3H10T1/2细胞成脂分化的影响及可能的作用机制。采集180日龄马身猪、60日龄ICR小鼠、35日龄罗斯肉鸡和12月龄小尾寒羊背最长肌、皮下脂肪和肝组织,检... 本研究旨在明确钙调磷酸酶肌小节结合蛋白2(myozenin2,MYOZ2)的组织表达特性,阐明其对C3H10T1/2细胞成脂分化的影响及可能的作用机制。采集180日龄马身猪、60日龄ICR小鼠、35日龄罗斯肉鸡和12月龄小尾寒羊背最长肌、皮下脂肪和肝组织,检测MYOZ2基因mRNA表达。结果显示,MYOZ2基因在所检测的物种中表现出相似的组织表达规律,在背最长肌表达量最高,皮下脂肪与肝组织低水平表达。在C3H10T1/2细胞中沉默MYOZ2基因后,qRT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂关键基因PPARγ、FABP4表达极显著下调(P<0.01);Western印迹结果表明,PPARγ蛋白含量显著降低(P<0.05);油红O染色发现,沉默MYOZ2基因后脂滴数明显减少,甘油三酯含量显著降低(P<0.05)。利用qRT-PCR技术检测沉默MYOZ2基因后,脂肪代谢相关基因SCD、FASN、SREBP1、NR1H3、DGAT1、PNPLA2、HSL、CES1、CPT1等的表达,结果显示,SCD、FASN、SREBP1、PNPLA2、HSL极显著下调(P<0.01),NR1H3显著下调(P<0.05),DGAT1表达下调但差异不显著,CES1、CPT1显著上调(P<0.05)。利用STRING数据库构建MYOZ2相关蛋白质互作网络图,发现MYOZ2可能通过肌联蛋白帽(Titin-cap,TCAP)与PPARγ相互作用进而影响成脂分化。沉默TCAP基因,qRT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂关键基因PPARγ、FABP4表达极显著上调(P<0.01);Western印迹结果表明,与对照组相比,PPARγ蛋白含量显著升高(P<0.05);油红O染色发现,沉默TCAP基因后脂滴数明显增多,甘油三酯含量显著升高(P<0.05)。利用qRT-PCR技术检测沉默MYOZ2后TCAP基因的表达结果显示,沉默MYOZ2后TCAP的表达极显著升高(P<0.01)。综上所述,MYOZ2基因在背最长肌中表达量最高,在皮下脂肪和肝组织中也有少量表达。此外,MYOZ2可能通过MYOZ2-TCAP-PPARγ途径影响成脂关键基因PPARγ和FABP4的表达,进而调控脂肪酸代谢相关基因SCD、FASN、SREBP1、NR1H3、DGAT1、PNPLA2、HSL、CES1、CPT1,在成脂分化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 钙调磷酸酶肌小节结合蛋白2 肌联蛋白帽 表达特性 C3H10T1/2细胞 成脂分化
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‘马身猪’皮下前体脂肪细胞的分离培养及成脂诱导分化研究 被引量:1
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作者 刘敏 张雪莲 +7 位作者 张万锋 何志强 黑伟 蔡春波 高鹏飞 曹果清 李步高 郭晓红 《新疆农业大学学报》 CAS 2019年第3期175-181,共7页
旨在建立‘马身猪’皮下前体脂肪细胞的体外培养体系,探讨其分化过程中脂质合成及代谢相关基因的表达。对8日龄仔猪的颈部皮下脂肪组织进行采样,用Ⅰ型胶原酶进行消化,分离出原代前体脂肪细胞,进行传代和诱导分化;在此过程中观察细胞的... 旨在建立‘马身猪’皮下前体脂肪细胞的体外培养体系,探讨其分化过程中脂质合成及代谢相关基因的表达。对8日龄仔猪的颈部皮下脂肪组织进行采样,用Ⅰ型胶原酶进行消化,分离出原代前体脂肪细胞,进行传代和诱导分化;在此过程中观察细胞的形态、绘制细胞的生长曲线,对诱导后的细胞进行油红O染色,并采用qRTPCR法检测脂肪沉积相关基因PPARγ、LPL、FABP4、FABP3和脂肪代谢相关基因ATGL与HSL的mRNA表达变化规律。结果显示,分离出的细胞形态呈不规则梭形,生长曲线呈S型,诱导15d后在细胞内有大脂滴融合,经油红O染色呈红色;PPARγ、LPL、FABP4、FABP3和HSL基因在诱导2d时表达量达到最高,极显著高于其他时间段(P<0.01),随后降低,到诱导10d时表达量与0d时基本无差异(P>0.05)。ATGL基因表达量在诱导2d时与对照组0d相比无差异(P>0.05),诱导4d后极显著降低(P<0.01),诱导8d时表达量最低。 展开更多
关键词 '马身猪’ 皮下前体脂肪细胞 诱导分化 基因表达
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猪环状RNA IGF1R促进脂肪细胞分化
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作者 张娜 李萌 +7 位作者 李娇 孟珊 蔡春波 杨阳 高鹏飞 郭晓红 曹果清 李步高 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期333-342,共10页
环状RNA(circular RNA,circRNA)作为竞争性内源RNA(competitive endogenous RNA,ceRNA)在细胞分化调控中发挥着重要作用。本研究旨在对猪环状RNA IGF1R(circular RNA insulin-like growth factor 1 receptor,circIGF1R)进行鉴定及分析,... 环状RNA(circular RNA,circRNA)作为竞争性内源RNA(competitive endogenous RNA,ceRNA)在细胞分化调控中发挥着重要作用。本研究旨在对猪环状RNA IGF1R(circular RNA insulin-like growth factor 1 receptor,circIGF1R)进行鉴定及分析,探明其表达规律,构建猪circIGF1R相关的ceRNA调控网络,并探究其异位表达对小鼠间充质干细胞(C3H10T1/2)成脂分化的调控作用。通过正反向引物PCR、Sanger测序、RNase R酶消化检测和qRT-PCR验证circIGF1R是胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)第二外显子形成的circRNA,它在猪各组织中均有表达,且其表达量在脂肪组织中随日龄增加呈上升趋势;使用miRDB、TargetScan和miRWalk在线软件预测circIGF1R靶基因,运用RNAhybrid软件进行结合位点预测,使用DAVID生物信息功能分析软件对候选靶基因进行GO和KEGG富集分析,运用Cytoscape软件构建ceRNA网络,基于基因表达相关性和预测的靶标关系,绘制了GO和KEGG富集分析及构建了ceRNA网络;双荧光素酶报告基因分析证明circIGF1R及FABP 4可与ssc(Sus scrofa chromosome)-miR-133a-5p结合;成功构建circIGF1R过表达载体,在间充质干细胞C3H10T1/2中异位表达,过表达circIGF1R后关键成脂调控因子CEBPα、CEBPβ、FABP 4和PPARγ极显著升高(P<0.01),脂滴数量显著增加。本研究结果证明,circIGF1R在猪脂肪组织中存在,并且可能通过ceRNA机制正调控C3H10T1/2细胞成脂分化,为进一步研究circIGF1R调控猪前体肌内脂肪细胞成脂分化奠定理论基础。 展开更多
关键词 环状RNA 竞争性内源RNA 胰岛素样生长因子1受体 间充质干细胞C3H10T1/2 成脂分化
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Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5通过抑制ERK1/2磷酸化抑制C3H10T1/2细胞成脂分化
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作者 黑伟 何志强 +7 位作者 张燕伟 张万锋 蔡春波 杨阳 高鹏飞 郭晓红 曹果清 李步高 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期644-652,共9页
旨在探究Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(typeⅢdomain-containing protein5,FNDC5)对C3H10T1/2细胞成脂分化的调控作用。利用qRT-PCR和Western印迹检测FNDC5在C3H10T1/2细胞成脂分化过程中的时序性表达规律;构建慢病毒包被的过表达/干扰FN... 旨在探究Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5(typeⅢdomain-containing protein5,FNDC5)对C3H10T1/2细胞成脂分化的调控作用。利用qRT-PCR和Western印迹检测FNDC5在C3H10T1/2细胞成脂分化过程中的时序性表达规律;构建慢病毒包被的过表达/干扰FNDC5载体,转染C3H10T1/2细胞,采用qRT-PCR检测成脂分化关键基因的表达情况,油红O染色检测脂滴含量,利用Western印迹检测细胞外信号调节激酶(extracellularregulatedkinase1/2,ERK1/2)及磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)的表达水平。C3H10T1/2细胞成脂诱导分化8d,Fndc5的表达量明显升高(P<0.05);C3H10T1/2细胞中过表达FNDC5,成脂分化关键基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)、脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)和CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT enhancer binding protein alpha, C/EBPα)的表达量显著降低(P<0.01),CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT enhancer binding protein beta, C/EBPβ)表达量明显降低(P<0.05),脂滴含量明显减少,P-ERK1/2的含量明显降低(P<0.05)。C3H10T1/2细胞中干扰FNDC5,成脂分化关键基因PPARγ、C/EBPβ、FABP4和C/EBPα的表达量显著升高(P<0.01),脂滴含量明显增加,P-ERK1/2的含量明显升高(P<0.05)。本研究发现,FNDC5可以通过抑制ERK1/2的磷酸化水平,抑制C3H10T1/2细胞的成脂分化,为FNDC5调控脂肪沉积的机制研究提供参考数据。 展开更多
关键词 C3H10T1/2细胞 成脂分化 Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白5基因 ERK1/2
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Muscle hypertrophy in transgenic mice due to over-expression of porcine myostatin mutated at its cleavage site 被引量:1
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作者 QIAN Li-li MA De-zun +6 位作者 GAO Peng-fei JIANG Sheng-wang WANG Qing-qing cai chun-bo XIAO Gao-jun AN Xiao-rong CUI Wen-tao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第11期2571-2577,共7页
Myostatin, a member of the transforming growth factor beta(TGF-β) superfamily, is a dominant inhibitor that acts to limit skeletal muscle growth and development. In this study, we generated transgenic mice that exp... Myostatin, a member of the transforming growth factor beta(TGF-β) superfamily, is a dominant inhibitor that acts to limit skeletal muscle growth and development. In this study, we generated transgenic mice that express porcine myostatin containg mutations at its cleavage site(RSRR) to evaluate its effect on muscle mass. Results showed that the weight of four skeletal muscles including gastrocnemius, rectus femoris, tibialis anterior, and pectoralis increased by 17.83 and 28.39%, 21.76 and 28.70%, 34.31 and 41.62%, 53.21 and 27.54% in transgenic male and female mice, respectively, compared to their corresponding non-transgenic control mice. Measurement of muscle fiber size and number indicated that the mean myofiber size increased by 50.73 and 61.30% in transgenic male and female mice respectively compared to the non-transgenic controls. However, there was no difference in the number of myofiber between transgenic and non-transgenic male mice. These results clearly demonstrated that the increase in skeletal muscle mass in transgenic mice is caused by hypertrophy instead of hyperplasia. 展开更多
关键词 porcine myostatin muscle mass transgenic mice MUTATION HYPERTROPHY HYPERPLASIA
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Targeted myostatin loss-of-function mutation increases type Ⅱ muscle fibers in Meishan pigs
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作者 QIAN Li-li XIE Jing-yi +5 位作者 GAO Ting cai chun-bo JIANG Sheng-wang BI Han-fang XIE Shan-shan CUI Wen-tao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2022年第1期188-198,共11页
Myostatin(MSTN) is a negative regulator of skeletal muscle growth and development. The skeletal muscle in MSTN^(-/-)mice is significantly hypertrophied, with muscle fiber type II increasing significantly while muscle ... Myostatin(MSTN) is a negative regulator of skeletal muscle growth and development. The skeletal muscle in MSTN^(-/-)mice is significantly hypertrophied, with muscle fiber type II increasing significantly while muscle fiber type I decreasing.However, it is still not clear how the skeletal muscle types change in MSTN^(-/-)pigs, and how the mechanism for MSTN regulates fiber types, especially in large animals like pigs. This study conducted a comprehensive analysis of the composition of skeletal muscle fibers in MSTN^(-/-)pigs produced in our laboratory. It was observed that, compared with wild-type(WT) pigs, both the total mass of skeletal muscle and type IIb muscle fibers increased significantly(P<0.01),while the type I and type IIa muscle fibers decreased significantly(P<0.01), in MSTN^(-/-)Meishan pigs. In addition, to explore the influence of MSTN on muscle fiber type and its regulation mechanism in the embryonic stage, this study selected a few genes(Myf5, Mef2 d, MyoD and Six1) associated with muscle fiber type and validated their expression by quantitative RT-PCR. Herein, it was found that Myh7, Myh2, Myh4 and Myh1 can be detected in the skeletal muscle of pigs at 65 days of gestation(dg). Compared with WT pigs, in MSTN^(-/-)Meishan pigs, Myh7 decreased significantly(P<0.01), while Myh4(P<0.001) and Myh1(P<0.05) increased significantly. Meanwhile, the increased expression of Myf5(P<0.05), Mef2 d(P<0.01) and Six1(P<0.05) in MSTN^(-/-)Meishan pigs suggested that MSTN should regulate the directional development of muscle fiber types in the early stage of embryonic development. Thus, at the embryonic stage, the type II muscle fibers began to increase in MSTN^(-/-)pigs. These results can provide valuable information not only for pig meat quality improvement, but also for the study of human skeletal muscle development and disease treatment. 展开更多
关键词 MSTN Meishan pigs muscle fiber type muscle fiber development
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MyoD相关非编码RNA调控骨骼肌生长发育的研究进展 被引量:5
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作者 吴怡琦 晋大鹏 +8 位作者 秦本源 李文霞 张雪莲 史文倩 蔡春波 高鹏飞 郭晓红 李步高 曹果清 《生命科学》 CSCD 北大核心 2020年第1期29-37,共9页
骨骼肌的生长发育是一个受多种功能性因子调控的精密网络过程,其中MyoD是一种骨骼肌特异性转录因子,能够识别并启动骨骼肌特异基因的转录。非编码RNA是一类具有多种生物功能但不能编码蛋白质的RNA。现就目前与MyoD协同作用,共同参与肌... 骨骼肌的生长发育是一个受多种功能性因子调控的精密网络过程,其中MyoD是一种骨骼肌特异性转录因子,能够识别并启动骨骼肌特异基因的转录。非编码RNA是一类具有多种生物功能但不能编码蛋白质的RNA。现就目前与MyoD协同作用,共同参与肌细胞增殖、分化、融合等过程的非编码RNA及其作用机制进行综述,以期为阐明与MyoD相关非编码RNA的作用机制提供理论参考。 展开更多
关键词 MYOD 非编码RNA 骨骼肌 作用机制
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