高温胁迫下硅添加对紫花苜蓿抗氧化系统和超微结构的影响

硅添加对缓解植物的高温胁迫具有重要作用,紫花苜蓿(Medicago sativa)作为优质豆科牧草在高温胁迫下会严重减产,因此研究硅添加对高温胁迫下紫花苜蓿生长的影响及其相关机制对于提高紫花苜蓿产量具有重要指导意义。本研究采用盆栽试验在两种温度条件(常温20℃/25℃,高温35℃/40℃)以及两个硅浓度水平(0和2 mmol·L^(−1))条件下对紫花苜蓿进行栽培处理,从抗氧化系统和叶片超微结构等方面研究了硅缓解紫花苜蓿对高温胁迫的适应机制。结果表明,紫花苜蓿的生物量、株高、叶绿素a、叶绿素b以及叶绿素总含量、叶片光系统Ⅱ实际光合效率和光系统Ⅱ的最大光合效率受高温影响显著下降(P<0.05),添加硅显著提高了这些参数。相反的是,高温胁迫使紫花苜蓿叶片的相对电导率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性等抗氧化特性显著提高,添加硅进一步显著提高了高温下的SOD和CAT活性,但显著降低了相对电导率(P<0.05)。另外,高温胁迫使叶片的细胞膜和叶绿体类囊体出现不同程度的损伤,质体小球增多,而添加硅的叶片细胞形态完整,叶绿体类囊体形态较好,只有少量的质体小球。由此可见,在高温胁迫下硅添加能够促进紫花苜蓿幼苗的生长,通过增强抗氧化酶的活性,清除叶片受到高温胁迫过度累积的活性氧,有效保护了活性氧对细胞原生质膜的损伤,保持了叶片微观形态结构的稳定性,提高光合能力,从而提高了紫花苜蓿的耐热性。

急性缺血性脑卒中患者血清骨保护素和血钙水平与脑微出血的相关性研究

目的探讨急性缺血性脑卒中患者血清骨保护素(OPG)、血钙水平与脑微出血的相关性。方法选取97例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据头颅磁敏感加权成像结果分为脑微出血组31例和无脑微出血组66例。收集2组患者的人口学资料和实验室检查指标,并检测患者血清OPG、血钙水平。比较不同病变程度和不同出血部位的脑微出血患者血清OPG、血钙水平,采用Spearman秩相关分析明确血清OPG、血钙与脑微出血的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨脑微出血的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清OPG、血钙对脑微出血的预测价值。结果脑微出血组年龄、饮酒者占比、高血压者占比、收缩压、舒张压、糖尿病者占比和血清OPG、血钙水平与无脑微出血组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄大、饮酒史、高血压史、收缩压高、OPG水平高是脑微出血的独立危险因素(OR=1.480、1.330、1.843、1.632、1.652,P<0.05),血钙水平高是脑微出血的独立保护因素(OR=0.721,P<0.05)。血清OPG、血钙单独和联合预测急性缺血性脑卒中患者脑微出血的AUC分别为0.853、0.825、0.921,联合预测的价值高于单独预测(Z=2.895、3.138,P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,血清OPG与脑微出血严重程度呈正相关(r_(s)=0.736,P<0.05),血钙与脑微出血严重程度呈负相关(r_(s)=-0.752,P<0.05)。不同部位脑微出血患者血清OPG、血钙水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论急性缺血性脑卒中脑微出血患者血清OPG升高、血钙降低,血清OPG、血钙水平与脑微出血病情密切相关,早期联合检测可有效预测脑微出血发生风险。

基于利益相关者的国家矿山公园旅游可持续发展评价

矿山公园开发经营中各类利益相关者诉求及其关系协调对旅游可持续发展产生重要影响。基于政府部门、相关企业、压力团体和社区居民4类利益相关者多方面利益诉求,构建矿山公园旅游可持续发展评价体系,选取遂昌国家矿山公园为案例地,评价其旅游可持续发展水平。借助贡献度、关联度及障碍度分析利益相关者的多方面影响,通过3种维度组合计算指标综合影响值并将其排序归类,以此深入探讨影响矿山公园旅游可持续发展的关键因素。评价结果表明:遂昌国家矿山公园旅游处于基本可持续发展阶段,且初具发展潜力;政府部门贡献度最大,相关企业次之,压力团体和社区居民对矿山公园旅游开发的参与度和话语权不足;政府的支持、企业间的协助与居民的环保意识等为旅游可持续发展提供强大动力,但居民参与决策的力度不足使得旅游可持续发展受限。

国家矿山公园旅游形象对比:基于游客网络评论

选取遂昌金矿、开滦煤矿、黄石铁矿和万山汞矿4个国家矿山公园为研究对象,以旅游网站游客在线可见评论数据为样本,利用文本分析法对矿山公园旅游认知形象和情感形象进行分析,并构建旅游知名度-美誉度综合形象矩阵对旅游地综合形象进行分析.研究表明:(1)矿山公园认知要素可归纳为旅游吸引物、历史文化、管理服务、旅游目的地和旅游群体5个类别,游客对各矿山公园矿产遗迹和矿业文化感知意象较为突出,各矿山公园认知形象呈“小同大异”现象;(2)游客对矿山公园旅游形象情感认知以积极情绪为主,特殊情感词体现出矿山公园旅游特色;游客消极感知多集中在景点景色、票价价格等方面,旅游性价比过低成为根本问题.(3)根据知名度和美誉度结果,将矿山公园旅游综合形象分为优势型、口碑型、问题型和改进型4种模式,并根据研究结果提出各类型发展建议,促进矿山公园旅游形象进一步提升.

场站资产的可视化管理系统

随着资产体量的增长,传统以人工进行资产管理的方式受到挑战,因此迫切需要将资产管理系统应用于企业,实现智能化高效管理。现存的资产管理系统大多侧重于基本功能实现,较少关注如何借助可视化技术更好地辅助资产管理。鉴于此,提出兼顾视觉效果与实用性的可视化管理,通过可视化RFID终端智能读写资产数据,实现场景可视化、业务可视化、数据可视化的交互,并从数据集的交互能力、可配置场站布局、人性化交互方案3个方面创新了可视化交互模式,并设计实现了场站资产的可视化管理系统,现已成功应用于长宁天然气公司。该系统通过可视化技术更好地服务于资产管理,可有效提升资产管理效率,具有较高推广价值。

鼠类行为学实验方法研究进展

动物行为学侧重以科学和客观的实验方法研究动物的各种行为,通过分析其行为目的、行为规律、行为方式等实现对动物情绪、学习、繁殖等现象的深入研究,是现代动物模型实验研究的重要技术之一。行为学实验中以鼠类动物行为研究的最为普遍,常用的经典行为学实验有旷场实验、悬尾实验、强迫游泳实验、迷宫实验、跑台实验等,其实验结果受诸多因素影响,了解行为学实验优势和局限性可为动物模型的建立和动物行为学分析提供参考。

“百白破疫苗事件”后广州市儿童家长预防接种认知、信任度及意愿调查

目的 了解广州市儿童家长在“长春长生百白破疫苗事件”后对疫苗接种的认知、信任度、意愿等情况及相关的影响因素,为后续接种预防工作的开展提供参考。方法 于2019年2—3月在广州市8家医院对903名儿童家长进行问卷调查,使用列联分析、相关分析、多元线性回归分析等方法对数据进行处理。结果 家长对疫苗的认知度在学历和年龄上差异有统计学意义(P<0.05);身边的医疗行业从业人员正向影响家长对疫苗的认知度与信任度(P<0.05);疫苗品牌关注度、事件处理满意度均正向影响家长对疫苗质量的信任度(P<0.05);家长对疫苗质量信任度、疫苗品牌关注度与未来的接种意愿呈正相关(Eta~2>0.13)。结论 疫苗事件严重影响了家长对疫苗质量的信任度,政府相关部门应积极响应、及时反馈,加大疫苗相关知识的科普力度,充分发挥医疗意见领袖作用,针对低学历、年龄较大的家长进行重点宣传。

CCDC25在非小细胞肺癌细胞中高表达及其促细胞增殖的分子机制

目的:探讨CCDC25蛋白在非小细胞肺癌细胞中的表达及其对非小细胞肺癌增殖的影响。方法:应用GEPIA数据库分析CCDC25在肺癌组织中表达明显高于癌旁组织,结合Western blot检测和免疫荧光,检测其在非小细胞肺癌细胞系中的表达和定位。Western blot检测YAP、p-YAP、LATS1、p-LATS1蛋白表达量。克隆形成实验和MTS实验检测CCDC25过表达对肿瘤细胞增殖能力的影响。结果:CCDC25在非小细胞肺癌细胞系中明显高表达,CCDC25过表达促进肿瘤细胞增殖能力(P<0.05)。CCDC25过表达抑制YAP蛋白的磷酸化促进YAP蛋白水平的升高(P<0.05)。结论:CCDC25可能通过调控YAP蛋白表达,进而促进非小细胞肺癌的演进。

全脑小胶质细胞分布与C6胶质瘤侵袭性研究

小胶质细胞是大脑胶质瘤的重要非肿瘤成分之一。胶质瘤和小胶质细胞的相互作用促进肿瘤生长。然而,小胶质细胞的时空异质性对胶质瘤生物学特性的影响仍不确定。该研究在28只SD大鼠脑组织中植入C6胶质瘤细胞的基础上建立大脑胶质瘤模型,研究肿瘤进展过程中小胶质细胞的分布与肿瘤进展的关系。在模型建立后,首先在手术后第7、9、12、14、16、18、22、23和24天采用核磁共振进行T2加权成像扫描(T2WI),并选取肿瘤径线最大的层面测量肿瘤直径和平均信号强度。然后,牺牲实验动物,取全部脑组织制作切片以进行苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色和免疫荧光染色。选取肿瘤径线最大HE染色图片分别于肿瘤内、肿瘤周围及肿瘤对侧脑区定义9个感兴趣区域;使用尺度不变特征变换算法来配准和融合HE染色图像与免疫荧光图像。最后,将HE切片上定义的感兴趣区域映射到免疫荧光染色图像,测量每个感兴趣区域内小胶质细胞的平均荧光强度,并分析平均荧光强度与C6胶质瘤成瘤时间的相关关系。结果显示,肿瘤区域的平均荧光强度明显大于其他感兴趣区域中的平均荧光强度(P<0.001),且平均荧光强度随着成瘤时间和肿瘤直径的增加而增加,分别拟合于二次曲线和线性函数;肿瘤平均荧光强度与平均信号强度呈显著正相关(P<0.001)。研究结果表明,C6胶质瘤的进展在肿瘤内和非肿瘤的全脑范围内触发了小胶质细胞的加速趋化,在全脑范围内监测小胶质细胞分布的时空异质性可为靶向微环境的胶质瘤治疗提供参考依据。

深圳地区916例健康体检者血栓弹力图参考范围的探讨

目的通过测定深圳地区健康成年人血栓弹力图(TEG)数据,探讨确立符合本地区特点的血栓弹力图参考范围,比较性别、年龄之间的差异,并与试剂厂家提供的参考值进行比较。方法选取2020年9月-2021年8月本院体检科916例健康成人,年龄19-59岁之间,用乐普公司西芬斯弹力图仪进行血栓弹力图检测,并对凝血反应时间(R)、血块形成时间(K)、凝固角(α-Angle)、最大震幅(MA)、凝血综合指数(CI)、纤维蛋白溶解指数LY30和EPL等数据进行分析。结果深圳地区916例成人健康体检者TEG各参数参考范围为:R 3.25-8.19 min,K 0.66-3.18 min,α-Angle 47.70-76.56 deg,MA 50.05-72.91 mm,CI-4.3-3.4,LY300-2.2%,EPL 0-3%,各参数中Angle、CI、K、LY30、MA、R值均有超过或低于厂家提供的参考范围,916人中有227人至少1项超过或低于厂家提供的参考范围,78例被诊断凝血功能异常,根据厂家提供的参考范围,检测特异性为75.2%。结论深圳地区TEG参数参考范围与厂商提供的参考范围存在明显差异,TEG实验室应建立本地区人群特点的参考范围,临床参考值范围可根据性别和年龄分组来设定。

KIR3DL3等位基因多态性与南方汉族人群白血病的关联研究

目的了解中国南方汉族人群KIR3DL3等位基因多态性与白血病的相关性。方法收集急性髓系白血病患者（AML组,n=137）、急性淋巴细胞白血病患者（ALL组,n=141）以及健康无关志愿献血者（对照组,n=306）的血样（3组均为南方汉族）,提取基因组DNA,应用本实验室设计的引物对KIR3DL3全部外显子进行测序分型,用Assign 4. 7. 1软件判定基因型。使用SPSS 22. 0统计软件对2个病例组与对照组中检出的每个KIR3DL3等位基因做差异性分析。结果 AML组、ALL组和对照组分别检出了12、14、16种等位基因。ALL病例组和对照组中KIR3DL3＊004和＊028等位基因的检出比例分别为12. 77%（18/141） vs 1. 63%（5/306）与11. 35%（16/141） vs 3. 27%（10/306）,（Pc〈0. 05）。AML病例组中检出的各等位基因的检出比例与对照组比较无明显差异（P〉0. 05）。结论本组人群携带的KIR3DL3＊004、＊028等位基因为中国南方汉族人群发生ALL的易感因子。

通过渗透微泵稳定抑制小鼠血浆CD26/DPPIV分子酶活性的研究

目的研究采用皮下植入渗透微泵给予西他列汀对小鼠体内CD26/DDPIV蛋白酶活性的作用效果与持续时间。方法将灌注西他列汀药物的渗透泵经手术植入BL6/C57小鼠皮下,通过高效液相色谱-质谱监测小鼠体内血液药物浓度,酶标法检测小鼠血浆DPPIV蛋白酶活性,流式细胞术观察小鼠脾T细胞CD26分子的表达,利用Transwell小室检测小鼠T细胞迁移能力。取渗透泵周围皮肤,病理切片检查小鼠皮下病理损害或炎性反应。结果B6/C57小鼠在植入渗透泵后,体内药物浓度比采用直接皮下注射法稳定,持续时间久,血浆DPPIV蛋白酶活性抑制程度与血药浓度明显相关。给药24 h后,小鼠脾T细胞CD26分子表达无明显变化,渗透泵组迁移能力较对照组明显降低。皮下植入渗透泵小鼠组饮食活动度无明显改变,皮肤病理检查未见炎性反应与病理损害。结论通过渗透泵给予小鼠药物能够保持西他列汀血药浓度稳定,持续抑制体内DPPIV活性,降低T细胞迁移能力,为CD26/DPPIV分子功能与免疫体内研究提供更方便有效的途径。

杉木提取物凝胶剂修复大鼠皮肤创面的效果研究

目的探讨杉木提取物凝胶在大鼠皮肤创面愈合过程中的效果。方法将32只SD大鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、低剂量组及高剂量组,每组8只,将各组大鼠进行全层皮肤缺损造模后,阴性对照组皮肤破损处不予处理,阳性对照组予以莫匹罗星0.1g,低剂量组予以0.1 g/mL杉木凝胶剂0.1 g,高剂量组予以0.2 g/mL杉木凝胶剂0.1g,所有小组大鼠均持续治疗14 d,统计伤后第3、7、14天皮肤愈合率,治疗14d后对愈合处皮肤进行全层取材,HE染色观察皮肤组织愈合情况,采用抑菌试验方法对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌进行杉木原液抗菌效果评估。结果伤后第3天,高剂量组愈合率高于阴性对照组,低于阳性对照组,低剂量组愈合率低于阳性对照组(P<0.05);伤后第7天高剂量组愈合率高于阴性对照组(P<0.05),低剂量组愈合率低于阳性对照组(P<0.05);伤后第14天,高剂量组愈合率高于阴性对照组(P<0.05),低剂量组愈合率明显低于阳性对照组(P<0.05),高于阴性对照组(P<0.05);与伤前比较,各组伤后第3、7、14天愈合率均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组相比,高剂量组与阳性对照组表皮层与真皮层结构清楚、显著增厚、分层明显,且毛细血管增生明显。高剂量与低剂量杉木在金黄色葡萄球菌平板中抑菌圈直径大于生理盐水(P<0.05),小于莫匹罗星(P<0.05);高剂量杉木在大肠埃希菌平板中抑菌圈直径大于生理盐水(P<0.05),小于莫匹罗星(P<0.05),低剂量杉木在大肠埃希菌平板中抑菌圈直径小于莫匹罗星(P<0.05),与生理盐水无显著差异(P>0.05)。结论杉木提取物凝胶剂可调控机体炎症反应,促进大鼠皮肤创面的修复,同时具有明显抑菌作用,避免创面感染,利于皮肤伤口愈合。

场站实物资产的可视化管理发展思考——以长宁公司为例

以页岩气为代表,新一代天然气野外采集系统正朝着无人化、智能化方向发展,对场站中实物资产的管理也提出了“减少人工清点、增加无人智能”的新要求。从资产管理特别是场站资产管理的一般要求出发,以长宁公司页岩气场站资产管理信息系统为例,分析了现有系统的主要不足,重点从引入知识图谱、可视化管理、RFID技术等方面进行了发展思路阐述,以期为以页岩气开发为代表的场站实物资产管理信息系统的未来建设提供较全面的设计参考。

芍药甘草汤修复PM_(2.5)暴露系统性红斑狼疮小鼠的作用机制研究

目的:建立PM_(2.5)暴露系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型,研究芍药甘草汤对PM_(2.5)致SLE小鼠病理损伤的治疗作用与机制。方法:40只C57BL/6雌性小鼠随机分为空白对照组、SLE组、SLE+PM_(2.5)组(模型组)及芍药甘草汤组。模型组通过PM_(2.5)全身暴露建立PM_(2.5)暴露SLE小鼠模型。治疗结束后ELISA法检测小鼠血清抗ds-DNA抗体含量和肺泡灌洗液中活性氧(ROS)含量;HE染色观察肾脏和肺组织病理形态学改变;Western Blot检测相关蛋白NF-κB p65、p-NF-κB p65、TLR4、COX-2的表达水平;16S rRNA基因分析小鼠肠道微生物的变化。结果:与模型组比较,芍药甘草汤治疗后脾脏指数和血清抗ds-DNA抗体水平显著降低(P<0.01);小鼠肾小球基底膜均匀、足突轻微融合;小鼠肺泡灌洗液中ROS含量降低(P<0.05);HE染色切片发现小鼠肺组织肺泡炎症细胞渗出减少,NF-κB p65、p-NF-κB p65、TLR4、COX-2炎症相关蛋白水平显著降低(P<0.05);16S rRNA基因分析结果显示,各组小鼠肠道微生物菌群具有多样性且组间结构存在差异性(P<0.05),芍药甘草汤治疗后肠道菌群多样性提高,且保护性细菌丰度上调。结论:PM_(2.5)可加重SLE发病,芍药甘草汤可改善PM_(2.5)暴露后SLE小鼠的病理损伤,其作用机制可能是通过修复PM_(2.5)诱导的炎症及肠道菌群紊乱对SLE发挥治疗作用。

CD8^(+)Trm与肿瘤细胞空间分布特征对局部晚期非小细胞肺癌复发的预测价值

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)侵袭性边缘(IM)中CD8^(+)组织驻留记忆T细胞(CD8^(+)Trm)的表达和二维空间分布及其对复发的影响。方法回顾性收集2014-01-01-2018-12-31在山东省肿瘤医院行根治性手术的104例局部晚期NSCLC患者资料,并随访无复发生存期(RFS)。使用全自动组织微阵列制作仪(TMA Grand Master,3DHISTECH Ltd.)构建组织芯片,并利用多色免疫荧光技术精准量化CD8、CD8^(+)Trm的密度及接近度(20/30/40μm)。使用X-Tile确定截断值,将患者分为高/低密度/接近度组,Kaplan-Meier法及log-rank检验评估RFS差异。Cox比例风险回归模型确定关键复发因子。结果在局部晚期NSCLC患者的IM区域中,CD8^(+)Trm约占CD8的29.0%,CD8与CD8^(+)Trm高浸润患者分别为17(16.4%)和60例(57.7%),CD8及CD8^(+)Trm高接近度(20μm)患者分别为76(73.1%)和43例(41.4%)。多因素Cox分析显示,CD8及CD8^(+)Trm细胞的密度均非局部晚期NSCLC患者预后评估的独立风险因素,χ^(2)=1.578,P=0.209;χ^(2)=0.483,P=0.487。整体CD8的接近度亦与复发无关,但CD8^(+)Trm高接近度组(30μm)患者RFS高于低接近度组患者,P=0.008,HR=0.41,95%CI:0.22~0.79。结论IM区域浸润的CD8^(+)Trm与肿瘤细胞的频繁相互作用可能促进肿瘤免疫,降低局部晚期NSCLC复发风险。

D型流感病毒实时荧光定量PCR方法的建立与应用

为了建立一种可以快捷、灵敏、安全地检测D型流感病毒(Influenza D virus,IDV)的实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR,RT-qPCR)方法,试验首先将IDV NP基因作为检测目标,根据其序列的保守区设计了一对RT-qPCR引物,然后采用单一变量法对RT-qPCR反应条件中的引物浓度和退火温度进行优化,建立了一种可检测IDV的RT-qPCR方法,并对该方法的灵敏度、重复性和特异性进行检测,最后应用该方法进行临床样本检测。结果表明:所建立的RT-qPCR方法的最佳引物浓度和退火温度分别为400 nmol/L和61℃,标准曲线为y=-3.572x+42.02(R^(2)=0.9993);该方法能检测到的最低拷贝数为8.30×10^(1)copies,灵敏度是常规PCR的100倍左右;组内重复和组间重复变异系数(CV)值均小于3%;同时检测牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、牛疱疹病毒4型(BHV-4)和牛流行热病毒(BEFV)的结果均为阴性;应用该方法对收集到的244份有呼吸道症状的牛鼻拭子样品进行检测,阳性率为1.23%。说明成功建立了IDV RT-qPCR检测方法,该方法具有灵敏度高、重复性和特异性好的特点,为IDV的防控提供了可靠的技术支撑。

融入功能分区的土地利用变化多情景模拟——以福建南平市建阳区为例

土地利用变化多情景模拟是合理配置土地资源的重要依据。已有研究通常聚焦于省级、城市群等较大尺度区域,较少关注南方山区城镇土地利用变化及其面临的生态安全约束。本文以福建省南平市建阳区为研究区,应用RSEI-MCR-PLUS耦合模型,将生态约束下的土地功能分区融入土地利用变化模拟,分析惯性发展、经济发展优先、生态保护优先、可持续发展四种情景下2030年建阳区土地利用空间格局。结果表明:(1)建阳区内适宜开发区、缓冲开发区、限制开发区、生态缓冲区和生态保护区面积占比分别为3.17%、27.94%、26.73%、25.68%和16.48%,各功能区以适宜开发区为中心空间上呈环状分布。(2)惯性发展情景下,建设用地呈现多点扩散,土地资源利用效率相对低下;经济发展优先情景下,新增建设用地侵占林地和耕地,加剧空间冲突;生态保护优先情景下,土地资源利用效率低下,并限制经济快速发展;可持续发展情景下,建设用地呈组团式发展,生态系统得到保护,土地资源配置更为合理。本成果可为合理配置土地资源、优化山区国土空间开发保护格局提供科学参考。

HLA-DPA1和-DPB1基因第2、第3外显子同步测序分型的研究

目的:建立可靠的HLA-DPA1和-DPB1基因第2、第3外显子同步测序分型的方法。方法:采用一对位点特异性引物扩增HLA-DPA1基因的第2外显子、第2内含子、第3外显子及其两翼的部分内含子序列,采用2对位点特异性引物扩增HLA-DPB1目的基因片段:第1对引物扩增HLA-DPB1基因第2外显子及两翼的部分内含子序列,第2对引物扩增HLA-DPB1基因第3外显子及两翼的部分内含子序列。PCR产物经核酸外切酶和碱性磷酸酶纯化,用本文的测序引物分别对HLA-DPA1和-DPB1第2、第3外显子进行双向测序。纯化的测序反应产物,经ABI 3730测序仪电泳,用Assign 4.7.1分析软件判定基因型。结果:HLA-DPA1及-DPB1基因的PCR扩增获得了清晰的目的条带,对其第2、第3外显子进行测序,所获的序列中无背景杂峰。用本文的方法对随机的96人份造血干细胞志愿捐献者标本进行HLA-DPB1测序分型,与采用SeCore^(TM) DPB1商品化测序分型试剂盒平行对照检测的结果相一致。结论:本文的方法在群体遗传学及疾病关联研究等领域具有广泛的使用价值。