目的:观察激活G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的影响,并探讨其可能的机制。方法:2~3日龄乳鼠心肌细胞体外原代培养。利用串联质谱标签(TMT)蛋白质谱技术检测蛋白表达差异,并作相关生物信息学分析,...目的:观察激活G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的影响,并探讨其可能的机制。方法:2~3日龄乳鼠心肌细胞体外原代培养。利用串联质谱标签(TMT)蛋白质谱技术检测蛋白表达差异,并作相关生物信息学分析,筛查其可能的调节机制。机制研究分6组,空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+GPER1激活剂(G1)组、AngⅡ+G1+GPER1抑制剂(G15)组、AngⅡ+G1+细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂(U0126)组和AngⅡ+G1+丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)抑制剂(MK2206)组,各组n=3。检测各组心肌细胞GPER1的表达,心房钠尿肽(ANP)和B型利钠肽(BNP)的m RNA水平,ERK、AKT蛋白的表达及其相互作用,以及对自噬相关蛋白胞浆型自噬标记轻链3(LC3II)和膜型自噬标记轻链3(LC3I)的调控。流式细胞技术检测GPER1对细胞凋亡的影响。结果:AngⅡ诱导心肌细胞肥大呈浓度依赖性,ANP和BNP m RNA水平梯度升高(P<0.05)。细胞免疫荧光染色显示,心肌细胞上存在GPER1蛋白表达。荧光定量逆转录聚合酶链式反应(q RT-PCR)结果显示,激活剂G1激活GPER1,并以浓度依赖方式抑制心肌细胞ANP和BNP m RNA水平(P<0.05);在AngⅡ+G1+G15组,心肌细胞ANP和BNP m RNA水平重新升高(P<0.05)。蛋白免疫印迹法(Western-blot)结果显示,与空白对照组或AngⅡ组相比,AngⅡ+G1组p-ERK、p-AKT蛋白表达增强(P<0.05);与AngⅡ+G1组相比,AngⅡ+G1+G15组p-ERK和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05),AngⅡ+G1+MK2206组p-ERK、p-AKT蛋白表达水平和ANP、BNP m RNA水平降低(P<0.05);AngⅡ+G1+U0126组对G1诱导的p-AKT蛋白的表达无影响。流式细胞技术显示,AngⅡ+G1组与AngⅡ组心肌细胞凋亡水平无差异(P>0.05)。AngⅡ组较空白对照组LC3II/LC3I比值增大,其自噬水平显著升高(P<0.01)。而AngⅡ+G1组较AngⅡ组LC3II/LC3I比值降低,其心肌细胞自噬水平降低(P<0.01)。结论:GPER1的激活抑制心肌细胞肥大,其作用机制可能与AKT和ERK信号通路以及细胞自噬相关。展开更多
目的:探讨体部立体定向放疗(stereotactic Body Radiation Therapy,SBRT)联合FOLFIRI方案转化治疗对结肠癌肝脏寡转移的疗效及安全性。方法:收集我院肿瘤科及结直肠外科2014年6月-2018年6月收治的有完整资料的结肠癌肝脏寡转移患者45例...目的:探讨体部立体定向放疗(stereotactic Body Radiation Therapy,SBRT)联合FOLFIRI方案转化治疗对结肠癌肝脏寡转移的疗效及安全性。方法:收集我院肿瘤科及结直肠外科2014年6月-2018年6月收治的有完整资料的结肠癌肝脏寡转移患者45例,其中SBRT联合FOLFIRI转化组(观察组)21例,术前行肝转移灶SBRT及FOLFIRI方案化疗6~8周期,化疗后4~6周行左/右半结肠切除术;FOLFOXIRI转化治疗组(对照组)24例,术前行FOLFOXIRI方案化疗6~8周期,化疗后4~6周行肝转移灶切除+左/右半结肠切除术。术后两组均行补充化疗4~6周期。比较观察组SBRT前后肝脏转移灶增强MRI表现,两组的客观缓解率(ORR)、中位无进展生存期(PFS)、中位总生存期(OS)、不良反应及两组的手术时间、术中出血量、术后住院天数。结果:⑴观察组SBRT后肝脏转移灶明显缩小;⑵两组的ORR(66.67%vs.58.33%)、中位PFS(34.00月vs.36.00月)[HR=0.190;95%CI(0.742~1061)]及中位OS(38.52月vs.41.56月)[HR=0.069;95%CI(0.687~1.014)]均无统计学意义(P>0.05);⑶观察组的白细胞减少及神经毒性的发生率低于对照组,两组间差异具有统计学意义(P=0.004,P=0.005);两组血小板减少、腹泻、恶心呕吐及转氨酶升高的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。⑷观察组的手术时间、术中出血量、术后住院日优于对照组,两组间差异具有统计学意义(P=0.009,P=0.001,P=0.045)。结论:对于结肠癌肝脏寡转移患者,术前行肝转移灶SBRT联合FOLFIRI化疗疗效不劣于FOLFOXIRI化疗,且不良反应轻、术后恢复快,值得临床推广。展开更多
文摘目的:观察激活G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的影响,并探讨其可能的机制。方法:2~3日龄乳鼠心肌细胞体外原代培养。利用串联质谱标签(TMT)蛋白质谱技术检测蛋白表达差异,并作相关生物信息学分析,筛查其可能的调节机制。机制研究分6组,空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+GPER1激活剂(G1)组、AngⅡ+G1+GPER1抑制剂(G15)组、AngⅡ+G1+细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂(U0126)组和AngⅡ+G1+丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)抑制剂(MK2206)组,各组n=3。检测各组心肌细胞GPER1的表达,心房钠尿肽(ANP)和B型利钠肽(BNP)的m RNA水平,ERK、AKT蛋白的表达及其相互作用,以及对自噬相关蛋白胞浆型自噬标记轻链3(LC3II)和膜型自噬标记轻链3(LC3I)的调控。流式细胞技术检测GPER1对细胞凋亡的影响。结果:AngⅡ诱导心肌细胞肥大呈浓度依赖性,ANP和BNP m RNA水平梯度升高(P<0.05)。细胞免疫荧光染色显示,心肌细胞上存在GPER1蛋白表达。荧光定量逆转录聚合酶链式反应(q RT-PCR)结果显示,激活剂G1激活GPER1,并以浓度依赖方式抑制心肌细胞ANP和BNP m RNA水平(P<0.05);在AngⅡ+G1+G15组,心肌细胞ANP和BNP m RNA水平重新升高(P<0.05)。蛋白免疫印迹法(Western-blot)结果显示,与空白对照组或AngⅡ组相比,AngⅡ+G1组p-ERK、p-AKT蛋白表达增强(P<0.05);与AngⅡ+G1组相比,AngⅡ+G1+G15组p-ERK和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05),AngⅡ+G1+MK2206组p-ERK、p-AKT蛋白表达水平和ANP、BNP m RNA水平降低(P<0.05);AngⅡ+G1+U0126组对G1诱导的p-AKT蛋白的表达无影响。流式细胞技术显示,AngⅡ+G1组与AngⅡ组心肌细胞凋亡水平无差异(P>0.05)。AngⅡ组较空白对照组LC3II/LC3I比值增大,其自噬水平显著升高(P<0.01)。而AngⅡ+G1组较AngⅡ组LC3II/LC3I比值降低,其心肌细胞自噬水平降低(P<0.01)。结论:GPER1的激活抑制心肌细胞肥大,其作用机制可能与AKT和ERK信号通路以及细胞自噬相关。
文摘目的:探讨体部立体定向放疗(stereotactic Body Radiation Therapy,SBRT)联合FOLFIRI方案转化治疗对结肠癌肝脏寡转移的疗效及安全性。方法:收集我院肿瘤科及结直肠外科2014年6月-2018年6月收治的有完整资料的结肠癌肝脏寡转移患者45例,其中SBRT联合FOLFIRI转化组(观察组)21例,术前行肝转移灶SBRT及FOLFIRI方案化疗6~8周期,化疗后4~6周行左/右半结肠切除术;FOLFOXIRI转化治疗组(对照组)24例,术前行FOLFOXIRI方案化疗6~8周期,化疗后4~6周行肝转移灶切除+左/右半结肠切除术。术后两组均行补充化疗4~6周期。比较观察组SBRT前后肝脏转移灶增强MRI表现,两组的客观缓解率(ORR)、中位无进展生存期(PFS)、中位总生存期(OS)、不良反应及两组的手术时间、术中出血量、术后住院天数。结果:⑴观察组SBRT后肝脏转移灶明显缩小;⑵两组的ORR(66.67%vs.58.33%)、中位PFS(34.00月vs.36.00月)[HR=0.190;95%CI(0.742~1061)]及中位OS(38.52月vs.41.56月)[HR=0.069;95%CI(0.687~1.014)]均无统计学意义(P>0.05);⑶观察组的白细胞减少及神经毒性的发生率低于对照组,两组间差异具有统计学意义(P=0.004,P=0.005);两组血小板减少、腹泻、恶心呕吐及转氨酶升高的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。⑷观察组的手术时间、术中出血量、术后住院日优于对照组,两组间差异具有统计学意义(P=0.009,P=0.001,P=0.045)。结论:对于结肠癌肝脏寡转移患者,术前行肝转移灶SBRT联合FOLFIRI化疗疗效不劣于FOLFOXIRI化疗,且不良反应轻、术后恢复快,值得临床推广。